2.4. DNA Isolation and Quantificati

2.4. DNA Isolation and Quantification
Actively growing shoot apices of the stock plant and 31 plants produced through micropropagation were harvested
and immediately frozen at −80˚C. Samples were ground in liquid nitrogen and homogenized in a tissue
lyser (Qiagen, Valencia, CA) for 2 min at 30 Hz to disrupt leaf material. Total genomic DNA was extracted
from 500 mg of leaf tissue using a DNeasy Plant Maxi Kit (Qiagen, Valencia, CA). DNA quality was checked
on a 1% (w/v) agarose gel, and concentration was measured as equivalent of absorbance at 260 nm using a spectrophotometer
(Nano Drop, Wilmington, DE). DNA was diluted to10 ng∙μL−1 concentration using molecular
grade water and stored at −80˚C prior to use in marker analyses.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. แยกดีเอ็นเอและการนับเจริญเติบโตอย่างแข็งขันยิง apices ของพืชสต็อก และ 31 พืชผลิต micropropagation ได้เก็บเกี่ยวและแช่แข็งทันทีที่ −80˚C ตัวอย่างดินในไนโตรเจนเหลว และ homogenized ในกระดาษทิชชู่lyser (Qiagen วาเลนเซีย CA) สำหรับ 2 นาทีที่ 30 Hz ถึงทำลายใบวัสดุ ถูกแยก DNA ออกทั้งหมดจากเนื้อเยื่อใบ 500 มิลลิกรัมใช้ชุดพืชซี่ DNeasy (Qiagen วาเลนเซีย CA) คุณภาพดีเอ็นเอตรวจสอบใช้ 1% (w/v) agarose เจล และความเข้มข้นโดยวัดเป็นเทียบเท่ากับค่าที่ 260 nm ใช้สเปคเครื่อง(Nano หยด วิลมิลตัน DE) ดีเอ็นเอถูก to10 เจือจางความเข้มข้น ng∙μL−1 ที่ใช้โมเลกุลเกรดน้ำ และเก็บไว้ที่ −80˚C ก่อนที่จะใช้ในการวิเคราะห์เครื่องหมาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การแยกดีเอ็นเอและการหาปริมาณ
apices การเจริญเติบโตอยู่ในระหว่างการถ่ายทำของพืชหุ้นและ 31 โรงงานผลิตผ่านขยายพันธุ์เก็บเกี่ยว
และแช่แข็งทันทีที่-80˚C ตัวอย่างพื้นดินในไนโตรเจนเหลวและปั่นในเนื้อเยื่อ
lyser (Qiagen, วาเลนเซีย, CA) เป็นเวลา 2 นาทีวันที่ 30 เฮิร์ตซ์ที่จะทำลายวัสดุใบ ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัด
จาก 500 mg ของเนื้อเยื่อใบโดยใช้ชุด Maxi DNeasy พืช (Qiagen, วาเลนเซีย, CA) คุณภาพดีเอ็นเอถูกตรวจสอบ
ได้ที่ 1% (w / v) เจล agarose และความเข้มข้นของวัดเท่ากับการดูดกลืนแสงที่ 260 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer
(นาโนวาง Wilmington, DE) ดีเอ็นเอถูกเจือจาง to10 NG ∙ไมโครลิตร-1 ใช้ความเข้มข้นของโมเลกุล
น้ำเกรดและเก็บไว้ที่-80˚Cก่อนที่จะใช้ในการวิเคราะห์เครื่องหมาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การแยกดีเอ็นเอและปริมาณอย่างการยิง apices ของตลาดหลักทรัพย์ และโรงงานที่ผลิตผ่านการขยายพันธุ์พืช 31 เก็บและทันทีที่แช่แข็งที่อุณหภูมิ 80 C −˚จำนวนพื้นดินในไนโตรเจนเหลวและบดในเนื้อเยื่อlyser ( QIAGEN , Valencia , CA ) สำหรับ 2 นาทีที่ 30 Hz จะทำลายวัสดุใบ รวมดีเอ็นเอจีโนมจาก 500 มิลลิกรัม เนื้อเยื่อใบใช้ dneasy พืช maxi ชุด ( เพิ่ม , Valencia , CA ) ตรวจสอบคุณภาพดีเอ็นเอใน 1% ( w / v ) เจล และสมาธิวัดการดูดกลืนแสงที่ 260 นาโนเมตรเป็นเทียบเท่าของการใช้วัสดุ( นาโน วาง , Wilmington , DE ) ดีเอ็นเอ to10 ng L − 1 ∙μเจือจางความเข้มข้นของการใช้โมเลกุลเกรดน้ำและอุณหภูมิ− 80 ˚ C ก่อนที่จะใช้ในการวิเคราะห์เครื่องหมาย