The importance of rotaviruses as et

The importance of rotaviruses as etiologic agents of infantile diarrhea in humans and animals is now clearly established (15, 25). The recognition that rotaviruses are the major cause of life-threatening diarrheal disease and of significant morbidity in young children has focused efforts on disease prevention and control against these viruses. Studies on rotavirus gene struc- ture and function are helping these efforts. For example, the cloning and subsequent expression of individual protein prod- ucts have helped to elucidate the function of each protein in virus structure, replication, and assembly (12, 34). Analysis of the antigenic, functional, and molecular properties of ex- pressed gene products, alone or in conjunction with other viral proteins, is allowing intrinsic properties of each gene product to be determined. Finally, the availability of large amounts of immunogenic structural proteins is facilitating vaccine testing and the production of inexpensive diagnostic tests. The genome of rotaviruses consists of 11 segments of double-stranded RNA. The double-stranded RNA is enclosed in the viral capsid, which consists of three layers of proteins (12). The rotavirus outer layer is composed of the glycoprotein VP7 and dimeric spikes of VP4 (12, 37, 42, 46). Both outer capsid proteins induce neutralizing antibodies (6, 12, 22, 36). VP4 is the viral hemagglutinin (24, 31). The major capsid protein VP6, which comprises >80% of the protein mass of the particle, is located on the inner capsid and contains the subgroup antigen (15). The presence of VP6 on virus particles has been associated with viral RNA polymerase activity (5). Baculovirus-expressed VP6 spontaneously forms into the na- tive trimeric conformation and can further assemble into
* Corresponding author. Mailing address: Division of Molecular Virology, Baylor College of Medicine, One Baylor Plaza, Houston, TX 77030. Phone: [phone]. Fax: [phone]. Electronic mail address: [e-mail].
heterogeneous particle-like structures (17, 38, 39). The core particle contains VP1, VP2, VP3, and the 11 RNA segments. VP2, which comprises about 90% of the core protein mass, forms particles when expressed alone and is one protein that binds to viral RNA (27, 47). Since expressed VP2 assembles into core-like particles and coexpression of VP2 and VP6 results in the formation of double-layered virus-like particles (VLPs) (27), we expressed different combinations of VP2, VP4, VP6, and VP7, using the baculovirus expression system to determine what other rotavi- rus-like particles could be formed. We report the production, purification, and characterization of VP2/6, VP2/4/6, VP2/6/7, and VP2/4/6/7 VLPs. VLPs containing a VP7 from two differ- ent serotypes also were characterized.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความสำคัญของ rotaviruses เป็น etiologic ตัวแทนของโรคท้องร่วงแบบเด็ก ๆ ในมนุษย์และสัตว์อย่างชัดเจนง (15, 25) การรู้ว่า rotaviruses เป็นสาเหตุสำคัญ ของโรคผลคุกคามชีวิต และ การเจ็บป่วยที่สำคัญในเด็กได้เน้นความพยายามควบคุมกับไวรัสเหล่านี้และป้องกันโรค ศึกษาเกี่ยวกับโรตาไวรัสยีน struc-ture และฟังก์ชั่นช่วยความพยายามเหล่านี้ ตัวอย่างเช่น นิพจน์ของโปรตีนแต่ละใบสั่งผลิต-ucts cloning และต่อมาได้ช่วย elucidate การทำงานของแต่ละโปรตีนในโครงสร้างของไวรัส การจำลอง และแอสเซมบลี (12, 34) วิเคราะห์คุณสมบัติแอนติเจน ทำงาน และโมเลกุลของ ex-กดยีนผลิตภัณฑ์ เพียงอย่างเดียว หรือร่วมกับโปรตีนอื่น ๆ ไวรัส จะอนุญาตคุณสมบัติแท้จริงของผลิตภัณฑ์แต่ละยีนจะเป็นผู้กำหนด ในที่สุด ความพร้อมของจำนวนมากของโปรตีนโครงสร้าง immunogenic เป็นอำนวยความสะดวกการทดสอบวัคซีนและการวินิจฉัยราคาไม่แพง จีโน rotaviruses ประกอบด้วย 11 ส่วนของสองครั้งที่ควั่น RNA สองครั้งที่ควั่น RNA มีอยู่ใน capsid ของไวรัส ซึ่งประกอบด้วยสามชั้นของโปรตีน (12) โรตาไวรัสชั้นนอกประกอบด้วยไกลโคโปรตีน VP7 และขวาก dimeric ของ VP4 (12, 37, 42, 46) ทั้งโปรตีน capsid นอกก่อให้เกิดแอนติบอดีล้ำ (6, 12, 22, 36) VP4 คือ hemagglutinin ไวรัส (24, 31) โปรตีนสำคัญ capsid vp6 มัน ซึ่งประกอบด้วย > 80% ของมวลของอนุภาค โปรตีนอยู่ใน capsid ภายใน และประกอบด้วย antigen กลุ่มย่อย (15) การปรากฏตัวของ vp6 มันบนอนุภาคไวรัสได้เชื่อมโยงกับกิจกรรมไวรัส RNA พอลิเมอเรส (5) แสดง Baculovirus vp6 มันรูปแบบเป็นโครงสร้างที่ trimeric tive นาได้ทันที และสามารถเพิ่มเติมรวมเป็น* ผู้เขียนที่สอดคล้องกัน ที่อยู่: ส่วนของโมเลกุลวิทยา วิทยาลัย แพทย์ Baylor หนึ่ง Baylor พลาซ่า ฮูสตัน TX 77030 โทรศัพท์: [phone] โทรสาร: [phone] ที่อยู่อีเมล: [e-mail]ต่างกันอนุภาคโครงสร้างเหมือน (17, 38, 39) อนุภาคหลักประกอบด้วย VP1, VP2, VP3 และส่วน RNA 11 VP2 ประกอบประมาณ 90% ของมวลโปรตีนหลัก รูปแบบอนุภาคเมื่อแสดงคนเดียว และเป็นโปรตีนหนึ่งที่ผูกกับอาร์เอ็นเอไวรัส (27, 47) ตั้งแต่ VP2 แสดงประกอบเป็นหลักเหมือนอนุภาคและ coexpression ของ VP2 และ vp6 มันส่งผลให้การก่อตัวของอนุภาคไวรัสเหมือนสองชั้น (VLPs) (27), เราแสดงการรวมกันของ VP2, VP4, vp6 มัน และ VP7 ใช้ระบบ baculovirus นิพจน์เพื่อกำหนด rotavi มาตุภูมิเหมือนอนุภาคอื่น ๆ ที่อาจเกิดขึ้น เรารายงานการผลิต ทำให้บริสุทธิ์ และจำแนกลักษณะของ VP2/6, VP2/4/6, VP2 6/7 และ VP2 4/6/7 VLPs. VLPs ที่ประกอบด้วย VP7 จาก serotypes สองจมูกแตกต่างยังมีลักษณะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความสำคัญของการ rotaviruses เป็นเชื้อที่เป็นสาเหตุของโรคท้องร่วงในวัยแรกเกิดในคนและสัตว์อยู่ในขณะนี้ชัดเจน (15, 25) การรับรู้ว่า rotaviruses เป็นสาเหตุสำคัญของโรคอุจจาระร่วงที่คุกคามชีวิตและอย่างมีนัยสำคัญของการเจ็บป่วยในเด็กเล็กได้มุ่งเน้นความพยายามในการควบคุมและป้องกันโรคจากไวรัสเหล่านี้ การศึกษาเกี่ยวกับโรตาไวรัสยีน ture โครงสร้างและการทำงานจะช่วยให้ความพยายามเหล่านี้ ยกตัวอย่างเช่นการโคลนและการแสดงออกที่ตามมาของโปรตีนแต่ละ ucts prod- ได้ช่วยในการอธิบายการทำงานของแต่ละโปรตีนในโครงสร้างไวรัส, การจำลองแบบและการชุมนุม (12, 34) การวิเคราะห์แอนติเจนที่ทำงานและโมเลกุลคุณสมบัติของผลิตภัณฑ์ยีนกดอดีตคนเดียวหรือร่วมกับโปรตีนของเชื้อไวรัสอื่น ๆ จะช่วยให้คุณสมบัติที่แท้จริงของผลิตภัณฑ์ยีนแต่ละคนที่จะได้รับการพิจารณา ในที่สุดความพร้อมของจำนวนมากของโปรตีนโครงสร้างภูมิคุ้มกันคือการอำนวยความสะดวกในการทดสอบวัคซีนและการผลิตของการทดสอบการวินิจฉัยที่ไม่แพง จีโนมของ rotaviruses ประกอบด้วย 11 ส่วนของ RNA เกลียวคู่ อาร์เอ็นเอเกลียวคู่ถูกปิดล้อมใน capsid ไวรัสซึ่งประกอบด้วยสามชั้นของโปรตีน (12) ชั้นนอกโรตาไวรัสประกอบด้วยไกลโคโปรตีน VP7 และ spikes dimeric ของ VP4 (12, 37, 42, 46) ทั้งโปรตีน capsid นอกทำให้เกิด neutralizing แอนติบอดี (6, 12, 22, 36) VP4 เป็น hemagglutinin ไวรัส (24, 31) VP6 capsid โปรตีนที่สำคัญซึ่งประกอบด้วย> 80% ของมวลโปรตีนของอนุภาคตั้งอยู่บน capsid ด้านในและมีแอนติเจนกลุ่มย่อย (15) การปรากฏตัวของ VP6 อนุภาคไวรัสที่ได้รับการเชื่อมโยงกับกิจกรรมโพลิเมอร์ rna ไวรัส (5) ไวรัส-แสดง VP6 ธรรมชาติเข้ามาในรูปแบบโครงสร้าง NA- trimeric Tive และต่อไปสามารถประกอบเข้า
* ผู้รับผิดชอบ ที่อยู่ทางไปรษณีย์: กองไวรัสวิทยาโมเลกุลเบย์เลอร์วิทยาลัยการแพทย์เบย์เลอร์หนึ่งพลาซ่า, ฮูสตัน, เท็กซัส 77030. โทรศัพท์: [phone] โทรสาร: [phone] ที่อยู่อิเล็กทรอนิกส์ mail: [e-mail].
ที่แตกต่างกันของอนุภาคโครงสร้างเหมือน (17, 38, 39) อนุภาคหลักมี VP1, VP2, VP3 และกลุ่มอาร์เอ็นเอ 11 VP2 ซึ่งประกอบด้วยประมาณ 90% ของมวลโปรตีนหลักในรูปแบบอนุภาคเมื่อแสดงคนเดียวและเป็นหนึ่งในโปรตีนที่จับกับอาร์เอ็นเอไวรัส (27, 47) ตั้งแต่แสดง VP2 มั่งเป็นอนุภาคหลักเหมือนและ coexpression ของ VP2 และผล VP6 ในการก่อตัวของสองชั้นอนุภาคไวรัสเช่น (VLPs) (27) ที่เราแสดงความแตกต่างกันของ VP2, VP4, VP6 และ VP7 ใช้ ระบบการแสดงออกของเชื้อไวรัสเพื่อตรวจสอบสิ่ง rotavi- อนุภาคมาตุภูมิเหมือนอื่น ๆ อาจจะเกิดขึ้น เรารายงานการผลิต, การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะของ VP2 / 6, VP2 / 4/6, VP2 / 6/7 และ VP2 / 4/6/7 VLPs VLPs มี VP7 จากทั้งสองสายพันธุ์ที่แตกต่างนอกจากนี้ยังมีความโดดเด่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความสำคัญของโรต้าไวรัสเป็น etiologic ตัวแทนของอุจจาระร่วงในทารกในมนุษย์และสัตว์ คือตอนนี้ที่ชัดเจน ( 15 , 25 ) ยอมรับว่า โรต้าไวรัสเป็นสาเหตุสำคัญของโรคอุจจาระร่วงที่คุกคามชีวิต และพบว่าเป็นโรคในเด็กเล็กได้มุ่งเน้นความพยายามในการควบคุมและป้องกันโรคจากไวรัสเหล่านี้ การศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของยีน - ture โรตาจะช่วยให้ความพยายามเหล่านี้ ตัวอย่างเช่น , การโคลนและการแสดงออกของโปรตีนแต่ละ ucts แยงตามมาได้ช่วยอธิบายการทำงานของแต่ละโปรตีนในโครงสร้าง , ไวรัส , และการประกอบ ( 12 , 34 ) การวิเคราะห์แอนติเจน , หน้าที่ , และโมเลกุลสมบัติของอดีตผลิตภัณฑ์ยีนกดคนเดียวหรือร่วมกับโปรตีนไวรัสอื่น ๆ จะให้สมบัติที่แท้จริงของแต่ละยีนผลิตภัณฑ์จะได้รับการพิจารณา ในที่สุด , มีจำนวนมากของโปรตีนโครงสร้าง immunogenic เป็นสกรีนวัคซีนการทดสอบและการผลิตของการทดสอบการวินิจฉัยที่ไม่แพง จีโนมของโรต้าไวรัสประกอบด้วย 11 ส่วนของคู่ตีเกลียว RNA Double stranded RNA จะอยู่ในเปลือกของไวรัส ซึ่งประกอบด้วยสามชั้นของโปรตีน ( 12 ) ชั้นนอกโรตาไวรัสประกอบด้วยโปรตีนและ vp7 ท้องเฟ้อแหลมของ vp4 ( 12 , 37 , 42 , 46 ) ทั้งเปลือกนอกโปรตีนกระตุ้น neutralizing แอนติบอดี ( 6 , 12 , 22 , 36 ) vp4 เป็นฮีแมกกูตินินไวรัส ( 24 , 31 ) หลัก vp6 โปรตีนแคปซิด ซึ่งประกอบด้วย > 80% ของโปรตีนมวลของอนุภาค ตั้งอยู่บนเปลือกชั้นใน และประกอบด้วยกลุ่มย่อยแอนติเจน ( 15 ) การปรากฏตัวของ vp6 บนอนุภาคไวรัส มีความสัมพันธ์กับกิจกรรมไวรัสอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรส ( 5 ) การผลิตแบคคิวโลไวรัสแสดง vp6 เองฟอร์มลงในนา - ข้อมูล และสามารถต่อประกอบเป็น trimeric tive* ผู้ที่สอดคล้องกัน ที่อยู่ : หน่วยไวรัสวิทยาโมเลกุล วิทยาลัยแพทย์ศาสตร์เบย์เลอร์ , Baylor Plaza Houston , TX 77030 . โทรศัพท์ : ( 713 ) 798-3585 . โทรสาร : ( 713 ) 798-3586 . ที่อยู่ไปรษณีย์อิเล็กทรอนิกส์ : [e-mail] .ข้อมูลแบบโครงสร้างอนุภาค ( 17 , 38 , 39 ) หลักประกอบด้วยอนุภาค vp1 vp2 vp3 , , , และ 11 ประเภทกลุ่ม vp2 ซึ่งประกอบด้วยประมาณ 90% ของมวลอนุภาคโปรตีนหลัก รูปแบบเมื่อแสดงคนเดียวและเป็นหนึ่งในโปรตีนที่ผูกกับไวรัส RNA ( 27 , 47 ) ตั้งแต่แสดง vp2 ประกอบเป็นหลัก เช่น อนุภาคของ vp2 vp6 coexpression และผลลัพธ์ในรูปแบบของไวรัส เช่น อนุภาค 2 ชั้น ( vlps ) ( 27 ) เราแสดงชุดค่าผสมที่แตกต่างกันของ vp2 vp4 vp6 , , , และ vp7 โดยใช้ระบบการแสดงออกของแบคคิวโลไวรัสเพื่อตรวจสอบสิ่งที่อื่น ๆ rotavi - รัสเหมือนอนุภาคที่อาจจะเกิดขึ้น เรารายงานการผลิต การทำให้บริสุทธิ์ และการศึกษาคุณสมบัติของ vp2 / 6 , vp2 / 4 / 6 vp2 / 6 / 7 และ vp2 / 4 / 6 / 7 vlps . vlps ที่มี vp7 จากสองแตกต่าง - ENT ( ยังเป็นเพียง