The plasmid-expression system is ro

The plasmid-expression system is routinely plagued by potential plasmid instability. Chromosomal integration
is one powerful approach to overcome the problem. Herein we report a plasmid-free hyper-producer E.
coli strain for coenzyme Q10 production. A series of integration expression vectors, pxKC3T5b and pxKT5b, were
constructed for chemically inducible chromosomal evolution (multiple copy integration) and replicon-free and
markerless chromosomal integration (single copy integration), respectively. A coenzyme Q10 hyper-producer Escherichia
coli TBW20134 was constructed by applying chemically inducible chromosomal evolution, replicon-free
and markerless chromosomal integration as well as deletion of menaquinone biosynthetic pathway. The engineered
E. coli TBW20134 produced 10.7 mg per gram of dry cell mass (DCM) of coenzyme Q10 when supplemented with
0.075 g·L−1 of 4-hydroxy benzoic acid; this yield is unprecedented in E. coli and close to that of the commercial
producer Agrobacterium tumefaciens. With this strain, the coenzyme Q10 production capacity was very stable after
30 sequential transfers and no antibiotics were required during the fermentation process. The strategy presented
may be useful as a general approach for construction of stable production strains synthesizing natural products
where various copy numbers for different genes are concerned.
Keywords coenzyme Q10, Escherichia coli, chemically inducible chromosomal evolution, replicon-free and
markerless chromosomal integration, chromosomal engineering

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เป็นประจำมีเลือกระบบ plasmid นิพจน์ โดยความไม่เสถียรของ plasmid ที่มีศักยภาพ รวมของโครโมโซมเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพหนึ่งเพื่อเอาชนะปัญหา นี้เรารายงานอีฟรี plasmid ไฮเปอร์โปรดิวเซอร์coli สายพันธุ์สำหรับ coenzyme Q10 ผลิต มีชุดของการรวมเวกเตอร์นิพจน์ pxKC3T5b และ pxKT5bสร้างวิวัฒนาการของโครโมโซม inducible สารเคมี (หลายสำเนารวม) และ ฟรี replicon และรวมของโครโมโซม markerless (สำเนาเดียวรวม), ตามลำดับ Coenzyme Q10 hyper-โปรดิวเซอร์ Escherichiacoli TBW20134 ถูกสร้างขึ้น โดยใช้สารเคมี inducible วิวัฒนาการของโครโมโซม replicon ฟรีและรวมของโครโมโซม markerless ตลอดจนลบ menaquinone biosynthetic ทางเดิน การออกแบบTBW20134 e. coli ผลิต 10.7 มิลลิกรัมต่อกรัมของมวลเซลล์แห้ง (ห่วงของกระทั่ง q10 เมื่อเสริมด้วย0.075 g· L−1 ของกรด benzoic 4 hydroxy ผลตอบแทนนี้ไม่เคยเกิดขึ้น ใน E. coli และที่เชิงพาณิชย์โปรดิวเซอร์ tumefaciens อโกรแบคทีเรียม ด้วยต้องใช้นี้ coenzyme Q10 ผลิตมีเสถียรภาพมากหลังจากการถ่ายโอนลำดับที่ 30 และยาปฏิชีวนะไม่ถูกต้องในระหว่างกระบวนการหมัก กลยุทธ์การนำเสนออาจจะมีประโยชน์เป็นวิธีการทั่วไปสำหรับการก่อสร้างของสายพันธุ์มั่นคงผลิตสังเคราะห์ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติที่หมายเลขสำเนาต่าง ๆ สำหรับยีนต่าง ๆ เกี่ยวข้องคำสำคัญกระทั่ง q10, Escherichia coli วิวัฒนาการของโครโมโซม inducible สารเคมี replicon ฟรี และวิศวกรรม markerless ของโครโมโซมรวม ของโครโมโซม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ระบบพลาสมิดแสดงออกเป็นโรคประจำโดยความไม่แน่นอนที่อาจเกิดขึ้นพลาสมิด บูรณาการโครโมโซม
เป็นหนึ่งในวิธีการที่มีประสิทธิภาพในการแก้ปัญหา ในที่นี้เรารายงานพลาสมิดฟรีไฮเปอร์ผลิตอี
โคไลสายพันธุ์สำหรับโคเอนไซม์ Q10 ผลิต ชุดของเวกเตอร์แสดงออกบูรณาการและ pxKC3T5b pxKT5b ถูก
สร้างขึ้นสำหรับการวิวัฒนาการของโครโมโซมกระตุ้นทางเคมี (หลายบูรณาการคัดลอก) และ Replicon ฟรีและ
บูรณาการของโครโมโซม Markerless (บูรณาการสำเนาเดียว) ตามลำดับ Q10 โคเอนไซม์ไฮเปอร์ผลิต Escherichia
coli TBW20134 ถูกสร้างขึ้นโดยใช้วิวัฒนาการของโครโมโซมกระตุ้นทางเคมี Replicon ฟรี
รวมและ Markerless โครโมโซมเช่นเดียวกับการลบ menaquinone วิถีชีวสังเคราะห์ วิศวกรรม
อี coli TBW20134 ผลิต 10.7 มิลลิกรัมต่อกรัมของมวลเซลล์แห้ง (DCM) ของโคเอนไซม์ Q10 เมื่อเสริมด้วย
0.075 กรัม· L-1 จากกรดเบนโซอิก 4 ไฮดรอกซี; อัตราผลตอบแทนนี้เป็นประวัติการณ์ในเชื้อ E. coli และใกล้เคียงกับการค้า
ผู้ผลิต Agrobacterium tumefaciens กับสายพันธุ์นี้โคเอนไซม์ Q10 กำลังการผลิตมีเสถียรภาพมากหลังจาก
การถ่ายโอน 30 ตามลำดับและยาปฏิชีวนะที่ไม่ถูกต้องในระหว่างขั้นตอนการหมัก กลยุทธ์ที่นำเสนอ
อาจจะมีประโยชน์เป็นวิธีการทั่วไปสำหรับการก่อสร้างสายพันธุ์การผลิตที่มั่นคงสังเคราะห์ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ
ที่ตัวเลขสำเนาต่างๆสำหรับยีนที่แตกต่างกันมีความกังวล.
คำ Q10 โคเอนไซม์เชื้อ Escherichia coli วิวัฒนาการของโครโมโซมกระตุ้นทางเคมี Replicon ฟรีและ
บูรณาการของโครโมโซม Markerless, โครโมโซม วิศวกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ระบบการแสดงออกของพลาสมิดที่ถูก plagued โดยความไม่แน่นอนที่มีพลาสมิด
รวมโครโมโซมเป็นหนึ่งที่มีประสิทธิภาพและวิธีการที่จะเอาชนะปัญหา ในที่นี้เรารายงานสายพันธุ์สายพันธุ์ฟรีไฮเปอร์ผู้ผลิต E
coli ผลิต Coenzyme Q10 . ชุดบูรณาการและการแสดงออกของเวกเตอร์ pxkc3t5b pxkt5b )
,สร้างทางเคมี inducible โครโมโซมวิวัฒนาการ ( คัดลอกบูรณาการหลาย ) และ replicon ฟรีและบูรณาการของ markerless
( คัดลอกรวมเดียว ) ตามลำดับ เป็นโคเอนไซม์ คิวเทน ไฮเปอร์ผู้ผลิตเชื้อ Escherichia
tbw20134 ถูกสร้างขึ้นโดยการใช้สารเคมีของ replicon ฟรี
inducible วิวัฒนาการและบูรณาการของ markerless เช่นเดียวกับการลบเมนาควิโนนร่วมเส้นทาง วิศวกรรม
E . coli tbw20134 10.7 มิลลิกรัมต่อกรัมที่ผลิตมวลเซลล์แห้ง ( DCM ) ของ Coenzyme Q10 เมื่อเสริมด้วย
0.075 g ด้วย L − 1 4-hydroxy benzoic acid ; ผลผลิตนี้เป็นประวัติการณ์ใน E . coli และใกล้ชิดของการค้า
โปรดิวเซอร์ Agrobacterium tumefaciens . กับสายพันธุ์นี้และ Coenzyme Q10 ผลิตได้มั่นคงมาก หลังจาก
30 ลำดับการโอนและไม่มีการใช้ยาปฏิชีวนะที่ถูกต้องในระหว่างกระบวนการหมัก กลยุทธ์ที่นำเสนอ
อาจจะมีประโยชน์เป็นแนวทางทั่วไปสำหรับการก่อสร้างของสายพันธุ์ที่ผลิตสังเคราะห์ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติที่มีตัวเลขต่างๆ
คัดลอกพันธุกรรมที่แตกต่างกันเกี่ยวข้อง .
, Coenzyme Q10 , Escherichia coli ,เคมี inducible ของวิวัฒนาการ replicon ฟรีและบูรณาการของโครโมโซมโครโมโซม markerless
, วิศวกรรม