Although reporter gene and fluoresc

Although reporter gene and fluorescent/luminescent probe based assays have been widely deployed in HTS with great successes, transfection of engineered cells and dye loading manipulation sometimes cause distortion in cell physiology, leading to loss of data fidelity and reliability22. The emergence of innovative label-free platforms aims at overcoming the limitations of label-based measurements by providing non-invasive means of detection. This approach enables real-time trace of kinetic information concerning a signal transduction process that is inevitably omitted by conventional traditional end-point assays. Current label-free systems used in cell-based investigations could be categorized into three major classes according to different detection principles: quartz microbalance, refraction index and cell impedance22, 23, 24 and 25. Quartz microbalance and refraction index are frequently employed in evaluation of binding properties of drug candidates, and are applicable to HTS. Impedance could be used in screening for potential leads that modulate a variety of biological events such as cell attachment, apoptosis, migration and activities of specific receptors such as GPCRs and tyrosine kinases. For example, CellKey system and RT-CES are amenable for 96- and 384-well plate based HTS with a throughput around 20,000 samples per 6 hours. However, significant cost associated with special assay plates makes these methods less attractive in large-scale operations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ว่ายีนเรืองแสงและการตรวจ / เรืองแสงตามการสอบสวนได้ถูกนำไปใช้กันอย่างแพร่หลายใน HTS กับความสำเร็จที่ยิ่งใหญ่ transfection ของเซลล์วิศวกรรมและการจัดการ loading ย้อมบางครั้งทำให้เกิดความบิดเบี้ยวในสรีรวิทยาของเซลล์ที่นำไปสู่​​การสูญเสียข้อมูลและความจงรักภักดี reliability22การเกิดขึ้นของแพลตฟอร์มฉลากฟรีนวัตกรรมจุดมุ่งหมายที่จะเอาชนะข้อ จำกัด ของการตรวจวัดตามฉลากโดยให้วิธีการไม่รุกรานของการตรวจสอบ วิธีการนี​​้จะช่วยให้การติดตามเรียลไทม์ของข้อมูลที่เกี่ยวกับการเคลื่อนไหวที่เกี่ยวข้องกับขั้นตอนการส่งสัญญาณที่ถูกละเว้นหลีกเลี่ยงไม่ได้โดยทั่วไปการตรวจจุดสิ้นสุดแบบดั้งเดิมระบบฉลากฟรีที่ใช้ในปัจจุบันในการสืบสวนตามเซลล์สามารถแบ่งออกเป็นสามชั้นเรียนที่สำคัญตามหลักการการตรวจสอบที่แตกต่างกัน: ไมโครแบบควอทซ์ดัชนีการหักเหและเซลล์ impedance22, 23, 24 และ 25 ไมโครแบบควอทซ์และดัชนีการหักเหของแสงที่ถูกว่าจ้างบ่อยในการประเมินผลของคุณสมบัติที่มีผลผูกพันของผู้สมัครยาเสพติดและใช้กับ HTSความต้านทานสามารถนำมาใช้ในการคัดกรองที่มีศักยภาพที่นำไปสู่​​การปรับความหลากหลายของกิจกรรมทางชีวภาพเช่นเซลล์ของสิ่งที่แนบ apoptosis โยกย้ายและกิจกรรมของผู้รับที่เฉพาะเจาะจงเช่น GPCRs และไคเนสซายน์ ตัวอย่างเช่น cellkey ระบบและ RT-งาน CES จะถูกคล้อยสำหรับ 96 - 384 และแผ่นดีขึ้น HTS กับ throughput ที่ประมาณ 20,000 ตัวอย่างต่อ 6 ชั่วโมง อย่างไรก็ตามค่าใช้จ่ายอย่างมีนัยสำคัญที่เกี่ยวข้องกับแผ่นทดสอบพิเศษที่ทำให้วิธีการเหล่านี้น่าสนใจน้อยลงในการดำเนินงานขนาดใหญ่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ว่าโปรแกรมรายงานยีนและ assays ฟลูออเรส เซนต์/luminescent โพรบที่ใช้ได้อย่างกว้างขวางใช้ในเมอร์กับความสำเร็จมาก transfection ที่ออกแบบและจัดการการโหลดย้อมบางครั้งทำให้เพี้ยนในสรีรวิทยาของเซลล์ การนำไปสู่การสูญเสียของคุณภาพข้อมูลและ reliability22 การเกิดขึ้นของแพลตฟอร์มฟรีป้ายชื่อนวัตกรรมมุ่งที่ขจัดข้อจำกัดของใช้ป้ายชื่อวัดหมดสิ้นโดยให้ตรวจสอบวิธีการไม่รุกราน วิธีนี้ช่วยให้ติดตามแบบเรียลไทม์ข้อมูลเดิม ๆ ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการ transduction สัญญาณที่ย่อมละเว้น โดย assays เลือกแบบธรรมดา ปัจจุบันฟรีป้ายชื่อระบบใช้ในการสืบสวนตามเซลล์สามารถแบ่งประเภทเป็นประเภทสามหลักตามหลักการตรวจหารายการที่แตกต่างกัน: ควอตซ์ microbalance ดัชนีหักเหและเซลล์ impedance22, 23, 24 และ 25 ดัชนีหักเหและ microbalance ควอตซ์บ่อยพนักงานในการประเมินคุณสมบัติของผู้สมัครยาผูก และใช้กับ HTS. ความต้านทานสามารถใช้ในการตรวจคัดกรองสำหรับลูกค้าเป้าหมายที่มีศักยภาพที่ modulate ความหลากหลายของชีวภาพเช่นเซลล์แนบ apoptosis โยกย้าย และกิจกรรมของ receptors เฉพาะเช่น GPCRs และ tyrosine kinases ตัวอย่าง ระบบ CellKey และงาน CES RT ได้ amenable สำหรับแผ่น 96 และ 384-ดีตามเมอร์ ด้วยอัตราความเร็วรอบอย่าง 20000 ต่อ 6 ชั่วโมง อย่างไรก็ตาม ต้นทุนสำคัญที่เกี่ยวข้องกับแผ่นทดสอบพิเศษทำให้วิธีการเหล่านี้น่าสนใจน้อยในการดำเนินงานขนาดใหญ่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้ว่า assays ฟลูออเรสเซนต์/สว่างสดใสและใช้อุปกรณ์ตรวจสอบยีนผู้สื่อข่าวได้รับการใช้อย่างแพร่หลายในรุ่น HTS ด้วยความสำเร็จครั้งยิ่งใหญ่ transfection ของเซลล์ได้รับการออกแบบและการจัดการการโหลดสีย้อมบางครั้งทำให้เกิดความผิดเพี้ยนในลักษณะทาง กายภาพ เซลล์เป็นทางนำไปสู่การสูญเสียของเสียงระดับ Hi - Fi ข้อมูลและความน่าเชื่อถือ 22การพัฒนาของแพลตฟอร์มป้าย - แบบไม่เสียค่าบริการเป็นนวัตกรรมใหม่มีเป้าหมายอยู่ที่การเอาชนะข้อจำกัดของการวัดฉลากโดยให้ใช้วิธีการแบบไม่รุกล้ำความเป็นส่วนตัวในการตรวจจับ วิธีนี้จะช่วยให้การตรวจสอบแบบเรียลไทม์ของข้อมูลดูแบบ Kinetic เกี่ยวกับกระบวนการ transduction สัญญาณที่ถูกตัดออกไปโดย assays จุดแบบดั้งเดิมแบบทั่วไปไม่อาจหลีกเลี่ยงได้ปัจจุบันป้าย - แบบไม่เสียค่าบริการระบบใช้ในการสืบสวนสอบสวนนั้นเซลล์ - ใช้ไม่สามารถแบ่งออกเป็นสามชั้นเรียนสำคัญตามหลักการการตรวจจับแตกต่างกัน microbalance แก้วดัชนี Refraction และเซลล์อิมพีแดนซ์ 222324 และ 25 . microbalance แก้วและดัชนี Refraction จะใช้ในการประเมินผลของคุณสมบัติของผู้สมัครรับเลือกตั้งมีผลผูกพันให้ยาและจะมีผลใช้กับ HTSอิมพีแดนซ์สามารถใช้ในการคัดเลือกเพื่อนำไปสู่เป้าหมายที่ปรับความหลากหลายของกิจกรรมทางชีววิทยาเช่นว่านั้นเป็นเอกสารแนบเซลล์ apoptosis กิจกรรมและการปรับเปลี่ยนระบบการกระตุ้นเส้นประสาทรับความรู้สึกปวดเฉพาะเช่น gpcrs และ kinases tyrosine ตัวอย่างเช่น cellkey ระบบและ Rt - CES ยอดเยี่ยม,มี ผลิตภัณฑ์ รุ่น HTS ฟ้องศาลได้สำหรับ 96 - และ 384 - รวมถึงแผ่นด้วยความเร็วในการรับส่งข้อมูลสูงสุดที่ประมาณ 20 , 000 ตัวอย่างต่อ 6 ชั่วโมง แต่ถึงอย่างไรก็ตามค่าใช้จ่ายที่เกี่ยวข้องกับแผ่นทำความร้อนสอบพิเศษทำให้วิธีการเหล่านี้ไม่น่าดึงดูดใจในการทำงานขนาดใหญ่