Phosphate buffer solution (5mL) was

Phosphate buffer solution (5mL) was injected into the peritoneal cavity of sacrificed mice. The abdomen of the
mice was then massaged to bring the cells into a suspension. Exactly 3mL of the exudate was then collected and
sonicated. The absorbance of the exudates was then determined at 405nm5. 1ml of Staphylococcus aureus suspended
in nutrient broth was then added to the exudates. The absorbance immediately after the addition of the microbes and
30minutes after the addition of the microbes were determined to calculate percentage of inhibition.
2.2.2. Test against specific immune response
Determination of total antibody titre
Haemagluttination method titre assay was performed to determine primary antibody titre and secondary antibody
titre. On the seventh day, after immunization, blood was collected from individual animals of all the groups from the
vein for serum preparation. The pooled serum was diluted with 50μL phosphate buffer (pH7.4) with 2 fold serial
dilution in 96-well micro-titre plates and mixed with 25μL of 2% SRBC suspension in Phosphate buffer. Plates were
incubated at 37 ºC for 24 hours. The value of primary antibody titre was considered the highest serum dilution
showing 50% haemagluttination. This procedure was repeated on the twelfth day to determine secondary antibody
titre.
Delayed type hypersensitivity test
Seven days after sensitization, the animals were challenged with 0.05mL 2% SRBC in the right hind footpad by
injection. Increase in footpad oedema was measured 24 hours and 48 hours after the challenge using a
plethysmometer.
Number of lymphocytes
After 10 days of powder administration; the mice were sacrificed and the thymus and spleen isolated. The thymus
and spleen were teased in phosphate buffer solution. The solution is then filtered and 100μL of it was observed
under microscope using a haematocytometer and the number of lymphocytes was counted.
Statistical analysis
Statistical analysis was performed using paired-T test7. The significance in difference was accepted at p < 0.05.
The values are expressed as mean ± S.D
3. Results and Discussion
Immunomodulators are substances that have an effect on the immune response. That effect can be to either
stimulate the immune system or to suppress it. This study employed the use of pumpkin seeds which are usually
used as sources of nutrition to determine whether or not these food sources may have effects on the immune
response. If it is indeed possible use these food sources as immunomodulators it can be employed as a form of
medical nutrition therapy.
The carbon clearance test is done to observe the effect of test substances, in this case pumpkin seed powder
against the non-specific immune response. More specifically this test shows phagocytosis by the phagocytic cells in
the body of the mice. Phagocyte cell activity can be determined by observing the speed of carbon particle clearance
administered intravenously as a foreign substance in the blood by determining the transmittance of the blood
samples (in 1% acetic acid) at specific time intervals. The greater the transmittance values the smaller the amount of
carbon particles in the blood. The transmittance was determined at 675nm using a UV-Vis Spectrophotometer.
Once the transmittance values were determined, a graph of 100-%Transmittance versus the time interval was
plotted. The slope of each line corresponds to the rate of the carbon clearance. In turn, the rate of the carbon
clearance can be used to determine the phagocytic index. The phagocytic index is determined by comparing by ratio,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชัน (5mL) ถูกฉีดเข้าไปในโพรง peritoneal ของหนูเสียสละ หน้าท้องของหนูมีแล้วนวดเพื่อให้เซลล์เข้าระงับ Exudate ตรง 3mL แล้วรวบรวมไว้ และsonicated Absorbance ของ exudates ถูกกำหนดแล้วที่ 405nm5 1ml ของหมอเทศข้างลาย Staphylococcus ที่หยุดชั่วคราวในซุปธาตุอาหารถูกเพิ่มไป exudates ด้วย Absorbance ทันทีหลังจากการเพิ่มของจุลินทรีย์ และ30minutes หลังจากการเพิ่มของจุลินทรีย์ถูกกำหนดในการคำนวณเปอร์เซ็นต์ของการยับยั้งการ2.2.2 การทดสอบกับการตอบสนองภูมิคุ้มกันเฉพาะความมุ่งมั่นของ titre แอนติบอดีรวมทำการ Haemagluttination วิธี titre วิเคราะห์เพื่อกำหนด titre แอนติบอดีหลักและแอนติบอดีรองtitre ในวันเจ็ด หลังจากรับวัคซีน เลือดที่เก็บจากสัตว์แต่ละกลุ่มทั้งหมดจากการหลอดเลือดดำสำหรับการเตรียมเซรั่ม ซีรั่มรวมถูกผสมกับ 50μL ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7.4) ด้วยอนุกรม 2 พับเจือจางใน 96-ดีไมโคร titre แผ่น และผสมกับ 25μL 2% SRBC ระงับในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ แผ่นได้incubated ที่ 37 ºC 24 ชั่วโมง ค่าของ titre แอนติบอดีหลักได้ถือว่าเจือจางซีรั่มสูงแสดง 50% haemagluttination ขั้นตอนนี้ถูกทำซ้ำในวันสิบสองเพื่อดูแอนติบอดีรองtitreทดสอบที่ไวต่อยาชนิดล่าช้าเจ็ดวันหลังจาก sensitization สัตว์ถูกท้าทาย ด้วย 0.05mL 2% SRBC ใน footpad หลังขวาโดยฉีด เพิ่มขึ้น footpad oedema ถูกวัดตลอด 24 ชั่วโมงและ 48 ชั่วโมงหลังจากใช้ความท้าทายplethysmometerจำนวน lymphocytesหลังจาก 10 วันผงบริหาร หนูได้เสียสละ และต่อมไทมัสและม้ามแยกต่างหาก ต่อมไทมัสและม้ามได้ teased ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชัน โซลูชันมีกรองแล้ว และ 100μL จะถูกตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ โดยใช้ haematocytometer แบบและจำนวนของ lymphocytes ที่นับวิเคราะห์ทางสถิติวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยใช้ T คู่ test7 ความสำคัญในความแตกต่างที่ p < 0.05 ยอมรับค่าจะแสดงเป็นหมายถึง ± S.D3. ผลลัพธ์ และสนทนาImmunomodulators เป็นสารที่มีผลกระทบการตอบสนองภูมิคุ้มกัน ผลที่ได้จะใดกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกัน หรือไม่ใส่ก็ ใช้เมล็ดฟักทองซึ่งมักว่าจ้างศึกษาใช้เพื่อกำหนดว่า แหล่งอาหารเหล่านี้อาจมีผลภูมิคุ้มกันที่เป็นแหล่งของสารอาหารตอบสนอง ถ้าเป็นจริงได้ ใช้แหล่งอาหารเหล่านี้เป็น immunomodulators ที่สามารถทำงานเป็นรูปแบบของทางการแพทย์โภชนบำบัดทดสอบเคลียร์คาร์บอนจะทำการสังเกตผลของการทดสอบสาร ในกรณีนี้ฟักทองเมล็ดผงกับการตอบสนองภูมิคุ้มกันไม่ใช่เฉพาะ อื่น ๆ โดยเฉพาะการทดสอบนี้แสดง phagocytosis โดย phagocytic เซลล์ในร่างกายของหนูออก กิจกรรมเซลล์ phagocyte สามารถถูกกำหนด โดยการสังเกตความเร็วของเคลียร์อนุภาคคาร์บอนจัดการ intravenously เป็นสารแปลกปลอมในเลือด โดยกำหนด transmittance ของเลือดตัวอย่าง (ใน 1% กรดอะซิติก) ในช่วงเวลาเฉพาะ ยิ่ง transmittance ที่ค่าขนาดเล็กจำนวนเขม่าในเลือด Transmittance ที่กำหนดที่ 675nm โดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง UV Visเมื่อมีกำหนดค่า transmittance กราฟของ Transmittance 100% เมื่อเทียบกับช่วงเวลามีพล็อต ความชันของแต่ละบรรทัดที่สอดคล้องกับอัตราของเคลียร์คาร์บอน ในเลี้ยว อัตราของคาร์บอนสามารถใช้เคลียร์เพื่อกำหนดดัชนี phagocytic ดัชนี phagocytic จะถูกกำหนด โดยการเปรียบเทียบโดยอัตราส่วน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (5 มล) ถูกฉีดเข้าไปในช่องท้องของหนูเสียสละ ช่องท้องของ
หนูที่ได้รับการนวดจากนั้นจะนำเข้าสู่เซลล์ระงับ แน่นอน 3 mL ของสารหลั่งถูกเก็บรวบรวมแล้วและ
sonicated การดูดกลืนแสงในสารที่หลั่งก็ตัดสินใจแล้วที่ 405nm5 1ml ของเชื้อ Staphylococcus aureus ระงับ
ในน้ำซุปแล้วสารอาหารที่ถูกบันทึกอยู่ในสารที่หลั่ง การดูดกลืนแสงในทันทีหลังจากที่การเพิ่มขึ้นของจุลินทรีย์และ
30 นาทีหลังจากการเพิ่มของจุลินทรีย์ที่ได้รับการพิจารณาในการคำนวณอัตราร้อยละของการยับยั้ง.
2.2.2 ทดสอบกับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันเฉพาะ
การกำหนด titre แอนติบอดีทั้งหมด
ทดสอบ titre วิธี Haemagluttination ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบ titre แอนติบอดีหลักและรองแอนติบอดี
titre ในวันที่เจ็ดหลังจากการสร้างภูมิคุ้มกันโรคเลือดที่เก็บจากสัตว์ส่วนบุคคลของทุกกลุ่มจาก
หลอดเลือดดำสำหรับการเตรียมเซรั่ม ซีรั่ม pooled ถูกเจือจางด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์50μL (pH7.4) มี 2 พับอนุกรม
เจือจางใน 96 หลุมแผ่นไมโคร titre และผสมกับ25μL 2% ระงับ Cell, SRBC ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต แผ่นได้รับการ
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ค่าของ titre แอนติบอดีหลักได้รับการพิจารณาในซีรั่มลดสัดส่วนสูงสุด
50% แสดง haemagluttination ขั้นตอนนี้ซ้ำในวันที่สิบสองเพื่อตรวจสอบแอนติบอดีรอง
titre.
ชนิดล่าช้าทดสอบภูมิแพ้
เจ็ดวันหลังจากที่อาการแพ้, สัตว์ที่ถูกท้าทายด้วย 0.05mL 2% Cell, SRBC ในโจรปล้นคนเดินทางหลังขวาโดย
การฉีด การเพิ่มขึ้นของอาการบวมน้ำโจรปล้นคนเดินทางวัดตลอด 24 ชั่วโมงและ 48 ชั่วโมงหลังจากที่ท้าทายโดยใช้
plethysmometer.
จำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาว
หลังจาก 10 วันของการบริหารผง; หนูถูกเสียสละและไธมัสและม้ามแยก ไธมัส
และม้ามถูกเยาะเย้ยในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ การแก้ปัญหานี้จะถูกกรองและ100μLของมันถูกตั้งข้อสังเกต
ภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยใช้ haematocytometer และจำนวนของเซลล์เม็ดเลือดขาวนับ.
การวิเคราะห์ทางสถิติ
การวิเคราะห์สถิติที่ดำเนินการโดยใช้คู่-T TEST7 อย่างมีนัยสำคัญในความแตกต่างได้รับการยอมรับที่ p <0.05.
ค่าจะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD
3 และอภิปรายผล
ภูมิคุ้มกันเป็นสารที่มีผลต่อการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน ผลกระทบที่สามารถเป็นได้ทั้ง
กระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายหรือการปราบปรามมัน การศึกษาครั้งนี้การจ้างงานการใช้เมล็ดฟักทองซึ่งมักจะ
ใช้เป็นแหล่งของสารอาหารที่จะตรวจสอบหรือไม่ว่าแหล่งอาหารเหล่านี้อาจมีผลต่อระบบภูมิคุ้มกัน
ตอบสนอง ถ้าเป็นไปได้แน่นอนใช้แหล่งอาหารเหล่านี้เป็นภูมิคุ้มกันที่จะสามารถใช้เป็นรูปแบบของ
การรักษาด้วยโภชนาการทางการแพทย์.
การทดสอบการกวาดล้างคาร์บอนจะทำเพื่อสังเกตผลกระทบของสารทดสอบในกรณีนี้ฟักทองผงเมล็ด
กับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันที่ไม่เฉพาะเจาะจง . โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทดสอบนี้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ทำลายโดยเซลล์ phagocytic ใน
ร่างกายของหนู การทำงานของเซลล์ phagocyte สามารถกำหนดได้โดยการสังเกตความเร็วของการกวาดล้างอนุภาคคาร์บอน
ฉีดกลูโคสเป็นสารต่างประเทศในเลือดโดยการพิจารณาการส่งผ่านของเลือด
ตัวอย่าง (ใน 1% กรดอะซิติก) ในช่วงเวลาที่กำหนด มากขึ้นค่าการส่งผ่านมีขนาดเล็กปริมาณของ
อนุภาคคาร์บอนในเลือด การส่งผ่านที่ถูกกำหนดโดยใช้ 675nm UV-Vis Spectrophotometer.
เมื่อค่าการส่งผ่านได้รับการพิจารณากราฟของการส่งผ่าน 100% เมื่อเทียบกับช่วงเวลาที่ได้รับการ
พล็อต ความลาดชันของแต่ละบรรทัดที่สอดคล้องกับอัตราการกวาดล้างคาร์บอน ในทางกลับกันอัตราคาร์บอน
กวาดล้างสามารถใช้ในการกำหนดดัชนี phagocytic ดัชนี phagocytic จะถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบโดยอัตราส่วน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 5ml ) ถูกฉีดเข้าไปในโพรงช่องท้อง เสียสละหนู ท้องของหนูก็นวด
นำเซลล์ในการระงับ ตรงม. ของที่เกิดจากกลุ่มตัวอย่างและ
sonicated . มีการดูดกลืนแสงของสารที่หลั่งก็มุ่งมั่นที่ 405nm5 . 1ml เชื้อ Staphylococcus aureus ระงับ
น้ำธาตุแล้วเพิ่มให้กับสารที่หลั่ง .นทันทีหลังจากเติมจุลินทรีย์และ
30 นาทีหลังจากเติมจุลินทรีย์ที่ได้มาคำนวณหาค่าร้อยละของการยับยั้ง .
2.2.2 . ทดสอบการตอบสนองต่อภูมิคุ้มกันแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงของทั้งหมด titre

haemagluttination วิธี titre assay ได้กำหนด titre แอนติบอดีประถมศึกษาและมัธยมศึกษา )
titre . ในวันที่เจ็ดหลังจากการรวบรวมเลือดจากสัตว์บุคคลทุกกลุ่มจาก
หลอดเลือดดำการเตรียมซีรั่ม รวมμเซรุ่มเจือจางด้วย 50 ลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( ph7.4 ) กับ 2 พับอนุกรม
เจือจางใน 96 ด้วยไมโคร titre แผ่น และผสมกับ 25 μ L 2 % srbc ระงับในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ จานถูก
บ่มที่ 37 º เป็นเวลา 24 ชั่วโมงคุณค่าของ titre แอนติบอดีประถมศึกษาถือว่าสูงสุดเซรั่มเจือจาง
แสดง 50% haemagluttination . ขั้นตอนนี้ซ้ำในวันที่สิบสองเพื่อหาระดับแอนติบอดี titre
.

สอบล่าช้าประเภทดำเนินเจ็ดวันหลังจากพบ สัตว์ถูกท้าทายด้วย srbc 2% 0.05ml ใน footpad ด้านหลังขวาโดย
ฉีดเพิ่ม footpad อาการบวมน้ำได้ตลอด 24 ชั่วโมง และ 48 ชั่วโมงหลังจากการท้าทายด้วย

จำนวนเม็ดเลือดขาว plethysmometer .
หลังจาก 10 วันของผงการบริหาร ; หนูเสียสละและต่อมไทมัสและม้าม โดดเดี่ยว ต่อมไทมัสและม้ามมีล้อ
ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ การแก้ปัญหาแล้วกรอง 100 ลิตร และμพบ
ภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้ haematocytometer และจำนวนลิมโฟไซต์ถูกนับ สถิติวิเคราะห์

สถิติวิเคราะห์ paired-t test7 . ความสำคัญในความแตกต่างที่ได้รับการยอมรับที่ p < 0.05 .
ค่าที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ย± S.D .
3 ผลการ immunomodulators
เป็นสารที่มีผลในการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน ผลจะเหมือนกัน
กระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันของร่างกาย หรือเพื่อยับยั้งมัน การวิจัยนี้ใช้เมล็ดฟักทองซึ่งมักจะ
ใช้เป็นแหล่งโภชนาการเพื่อตรวจสอบหรือไม่ว่าแหล่งอาหารเหล่านี้อาจจะมีผลกระทบต่อการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน

ถ้าเป็นไปได้แน่นอนใช้เหล่านี้เป็นแหล่งอาหาร immunomodulators มันสามารถใช้เป็นรูปแบบของ

โภชนบำบัดทางการแพทย์คาร์บอนพิธีการเสร็จสิ้นการทดสอบเพื่อดูผลของสารทดสอบ ในกรณีนี้ ผงเมล็ดฟักทอง
กับการตอบสนองของภูมิคุ้มกันแบบไม่จำเพาะ . มากขึ้นโดยเฉพาะการทดสอบนี้แสดงโดย phagocytosis เซลล์ฟาโกไซโตซิสใน
ร่างกายของหนู กิจกรรมเซลล์ฟาโกไซตได้ตามความเร็วของอนุภาคเขม่าเคลียร์
ผู้ที่ใช้เป็นสารแปลกปลอมในเลือดโดยการส่งผ่านของเลือด
ตัวอย่าง ( 1% กรดอะซิติก ) ในช่วงเวลาที่เฉพาะเจาะจง มากกว่าการส่งผ่านค่าขนาดเล็กปริมาณ
อนุภาคคาร์บอนในเลือด มีการตั้งใจที่ 675nm ใช้ยูวีวิสเตอร์
เมื่อการส่งผ่านค่าความมุ่งมั่นกราฟของการ 100 % เมื่อเทียบกับช่วงเวลาคือ
วางแผน ความลาดเอียงของแต่ละบรรทัดที่สอดคล้องกับอัตราของคาร์บอน เคลียร์ ในการเปิด , อัตราของคาร์บอน
อนุญาตสามารถใช้เพื่อกำหนดดัชนีสิ่งแปลกปลอม . ดัชนีสิ่งแปลกปลอมจะถูกกำหนดโดยการเปรียบเทียบด้วยอัตราส่วน