The inhibitory activities of the 15

The inhibitory activities of the 15 compounds in the E.coli DNA-gyrase superwiling assay and their
ability to facilitate the “cleavable complex” are compared with some known 4-quinolone antibacterials (Table
I). Eight of the 15 flavones tested inhibited the DNA-gyrase catalytic activity. The use of the DNA-gyrase
supcrcoiling inhibition assay has been the classical approach in identifying and quantitating inhibition of
DNA-gyrase by quinolones (9). This assay can detect both Gyr A and Gyr B subunit inhibitors, since the
reaction exposes the holoenzyme to the potential inhibitor. Unfortunately, in a catalytic assay, reaction
conditions such as pH, ionic strength, intercalation, chelation, and other non-specific effects can arise and be
mistakenly read as specific inhibition. Since flavones are known to inhibit several enzymes by non-specific
mechanisms (lo,1 l), one could not conclude based on the results of the inhibition of the catalytic activity,
that these flavones were bonafide inhibitors of the enzyme. A more specific variation on the supercoiling
inhibition assay is the DNA-gyrase “cleavable complex” assay. In this assay, the endpoint is the detection
and quantitation of linearized, cleaved fragments of the starting substrate, as compared to change in topomer
position as with the supercoiling inhibition assay. A major difference in these assays is that the generation
of the linearized fragment requires the catalytic activity of the holoenzyme to remain intact (i.e. free from
non-specific inhibition) in order for the “cleavable complex” intermediate of DNA gyrase*DNAVrug to be
formed, which in turn inhibits the resealing of the DNA. Any activity that prevents the binding or catalytic

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมการยับยั้งจาก 15 สารในการทดสอบ superwiling E.coli ดีเอ็นเอ gyrase
ของพวกเขาและความสามารถในการอำนวยความสะดวกใน"ซับซ้อน cleavable" เมื่อเทียบกับบางส่วนที่รู้จักกัน 4 antibacterials ควิโนโลน (ตารางที่
I) แปดของ 15 flavones ยับยั้งการทดสอบดีเอ็นเอ gyrase เร่งปฏิกิริยา การใช้ดีเอ็นเอ gyrase
ทดสอบการยับยั้ง supcrcoiling ได้รับวิธีการคลาสสิกในการระบุและการยับยั้ง quantitating
ของดีเอ็นเอgyrase โดย quinolones (9) การทดสอบนี้สามารถตรวจสอบได้ทั้ง Gyr A และ B Gyr ยับยั้ง subunit
เนื่องจากปฏิกิริยาexposes holoenzyme เพื่อยับยั้งที่มีศักยภาพ แต่น่าเสียดายที่ในการทดสอบตัวเร่งปฏิกิริยาปฏิกิริยาเงื่อนไขเช่นค่า pH ความแข็งแรงอิออนเสพ, ขับและผลกระทบที่ไม่เฉพาะเจาะจงอื่น ๆ ที่อาจเกิดขึ้นและถูกเข้าใจผิดอ่านยับยั้งเฉพาะ ตั้งแต่ flavones เป็นที่รู้จักกันในการยับยั้งเอนไซม์หลายที่ไม่เฉพาะเจาะจงกลไก(ดูเถิด 1 ลิตร) หนึ่งไม่สามารถสรุปขึ้นอยู่กับผลของการยับยั้งการเร่งปฏิกิริยาที่ว่าฟลาโวนเหล่านี้เป็นสารยับยั้งสุจริตของเอนไซม์ รูปแบบที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้นใน supercoiling ทดสอบการยับยั้งเป็นดีเอ็นเอ gyrase "ซับซ้อน cleavable" ทดสอบ ในการทดสอบนี้ปลายทางคือการตรวจสอบและปริมาณ linearized ชิ้นส่วนแยกของพื้นผิวที่เริ่มต้นเมื่อเทียบกับการเปลี่ยนแปลงใน topomer ตำแหน่งเช่นเดียวกับการทดสอบการยับยั้ง supercoiling ความแตกต่างที่สำคัญในการตรวจเหล่านี้ก็คือการสร้างของส่วน linearized ที่ต้องใช้เร่งปฏิกิริยาของ holoenzyme จะยังคงอยู่เหมือนเดิม (คือเป็นอิสระจากการยับยั้งไม่เฉพาะเจาะจง) เพื่อให้ "ซับซ้อน cleavable" กลางดีเอ็นเอ gyrase * DNAVrug ที่จะเกิดขึ้นซึ่งจะช่วยยับยั้ง resealing ของดีเอ็นเอ กิจกรรมใด ๆ ที่จะป้องกันไม่ให้มีผลผูกพันหรือตัวเร่งปฏิกิริยา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมการยับยั้งของ 15 สารประกอบใน E.coli อัตลักษณ์ทางเพศ superwiling assay และความสามารถเพื่อความสะดวก
" cleavable คอมเพล็กซ์ " เมื่อเทียบกับบางคนที่รู้จัก 4-quinolone antibacterials ( โต๊ะ
ฉัน ) แปดของ 15 นิลในสูตรการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งอัตลักษณ์ทางเพศความว่องไว . ใช้ของอัตลักษณ์ทางเพศ
supcrcoiling ยับยั้งโดยมีวิธีการคลาสสิกในการระบุและ quantitating การยับยั้ง
gyrase ดีเอ็นเอโดยควิโนโลน ( 9 ) วิธีนี้สามารถตรวจจับได้ทั้ง gyr และหน่วยการ gyr B ตั้งแต่
ปฏิกิริยา exposes ฮอโลเอนไซม์กับสารยับยั้งที่มีศักยภาพ น่าเสียดาย ในการทดสอบปฏิกิริยา ปฏิกิริยา
เงื่อนไข เช่น pH , ความแรงของไอออน intercalation chelation , ,และผลที่ไม่เฉพาะเจาะจงอื่น ๆสามารถเกิดขึ้นได้
ผิดอ่านเป็นการเฉพาะ ตั้งแต่รู้จักยับยั้งเอนไซม์นิลในสูตรต่างๆ โดยกลไกที่ไม่เฉพาะเจาะจง
( ทองหล่อ 1 ) , หนึ่งไม่สามารถสรุปได้จากผลของการยับยั้งกิจกรรม catalytic
ที่นิลในสูตรเหล่านี้เป็น bonafide ตัวยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ การเปลี่ยนแปลงเฉพาะใน supercoiling
และทดสอบ gyrase " ดีเอ็นเอ cleavable ซับซ้อน " การทดสอบ ในการทดสอบนี้ ปลายทางคือการตรวจหาและช่วงของเซลล์ของ
, ชิ้นส่วนของเริ่มตั้งต้น เมื่อเทียบกับการเปลี่ยนตำแหน่ง topomer
ด้วย supercoiling ยับยั้งแบคทีเรีย ความแตกต่างที่สำคัญในวิธีการเหล่านี้คือรุ่น
ของช่วงเบสต้องการฤทธิ์ของโฮโลเอนไซม์ที่จะยังคงเหมือนเดิม ( เช่นฟรีจาก
เฉพาะการยับยั้ง ) เพื่อให้ " cleavable ซับซ้อน " กลาง dnavrug gyrase * ดีเอ็นเอเป็น
เกิดขึ้นซึ่งจะยับยั้ง resealing ของดีเอ็นเอ กิจกรรมใด ๆที่ป้องกันไม่ให้ผูกพันหรือ catalytic