Two distinct isoforms of the Ca-dep

Two distinct isoforms of the Ca-dependent actin filament severing protein gelsolin were identified in cross-striated muscles of the American lobster. The variants (termed LG1 and LG2) differ by an extension of 18 AA at the C-terminus of LG1, and by two substitutions at AA735 and AA736, the two C-terminal amino acids of LG2. Functional comparison of the isolated and purified proteins revealed gelsolin-typical properties for both with differences in Ca2+-sensitivity, LG2 being activated at significant lower Ca-concentration than LG1: Half maximal activation for both filament severing and G-actin binding was ∼4 × 10−7 M Ca2+ for LG2 vs. ∼2 × 10−6 M Ca2+ for LG1. This indicates a differential activation for the two isoproteins in vivo where they are present in almost equal amounts in the muscle cell. Structure prediction modeling on the basis of the known structure of mammalian gelsolin shows that LG2 lacks the C-terminal alpha-helix which is involved in contact formation between domains G6 and G2. In both mammalian gelsolin and LG1, this “latch bridge” is assumed to play a critical role in Ca2+-activation by keeping gelsolin in a closed, inactive conformation at low [Ca2+]. In LG2, the reduced contact between G6 and G2 may be responsible for its activation at low Ca2+-concentration.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Isoforms ทั้งสองของใยแอกตินขึ้นอยู่กับ Ca ที่ severing gelsolin โปรตีนได้ระบุใน striated ขนกล้ามเนื้อสเตอร์อเมริกัน ตัวแปร (เรียกว่า LG1 และ LG2) แตกต่างกัน โดยการขยาย 18 เอเอที่ C-นัส LG1 และ โดยการแทนที่ AA735 และ AA736 กรดอะมิโนเทอร์มินัล C สองของ LG2 สอง เปรียบเทียบการทำงานของโปรตีนบริสุทธิ์ และแยกเปิดเผยคุณสมบัติ gelsolin ทั่วไปทั้งมีความแตกต่างใน Ca2 + -ไว LG2 ถูกเรียกใช้ในสมาธิต่ำกว่า Ca สำคัญกว่า LG1: ∼4 ×ถูกเปิดใช้งานสูงสุดครึ่งใย severing และผูกแอกติน G 10−7 M Ca2 + ใน LG2 เทียบกับ ∼2 × 10−6 M Ca2 + ใน LG1 นี้บ่งชี้ว่า การเรียกใช้ที่แตกต่างสำหรับสอง isoproteins ในสัตว์ทดลองที่มีจำนวนเกือบเท่าในเซลล์กล้ามเนื้อ คาดเดาโครงสร้างแบบจำลองโดยใช้โครงสร้างของ mammalian gelsolin รู้จักแสดงว่า LG2 ขาดที่เทอร์มินัล C อัลฟาเกลียวซึ่งจะเกี่ยวข้องกับการก่อตัวติดต่อระหว่างโดเมน G6 และ G2 ใน mammalian gelsolin และ LG1 นี้ "สลักสะพาน" จะถือว่ามีบทบาทสำคัญใน Ca2 + -เปิดใช้งาน โดยการรักษา gelsolin ใน conformation แบบปิด ไม่ได้ใช้งานที่ต่ำ [Ca2 +] ใน LG2 ติดต่อลดลงระหว่าง G6 และ G2 อาจรับผิดชอบในการเปิดใช้งานที่ต่ำ Ca2 + -สมาธิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองไอโซฟอร์มที่แตกต่างของ Ca ขึ้นอยู่กับเส้นใยโปรตีนขาดโปรตีน gelsolin ถูกระบุในกล้ามเนื้อข้ามริ้วของกุ้งก้ามกรามอเมริกัน สายพันธุ์ (เรียกว่า LG1 และ LG2) แตกต่างกันโดยการขยายตัวของ 18 AA ที่ C-ปลายทางของ LG1 และสองแทนที่ AA735 และ AA736 ทั้งสองขั้ว c- กรดอะมิโนของ LG2 การเปรียบเทียบการทำงานของโปรตีนที่แยกบริสุทธิ์และเปิดเผยคุณสมบัติ gelsolin ปกติท​​ั้งที่มีความแตกต่างใน Ca2 + ไว, LG2 ถูกเปิดใช้งานที่ต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญ Ca-เข้มข้นกว่า LG1: ครึ่งยืนยันการใช้งานสูงสุดสำหรับการพรากทั้งเส้นใยและโปรตีน G-binding ถูก ~4 × 07/10 M Ca2 + สำหรับ LG2 กับ ~2 × 10-6 M Ca2 + สำหรับ LG1 นี้แสดงให้เห็นการเปิดใช้งานแตกต่างกันสำหรับสอง isoproteins ในร่างกายที่พวกเขามีอยู่ในปริมาณที่เท่ากันเกือบจะอยู่ในเซลล์กล้ามเนื้อ โครงสร้างการสร้างแบบจำลองการคาดการณ์บนพื้นฐานของโครงสร้างที่รู้จักกันของ gelsolin เลี้ยงลูกด้วยนมแสดงให้เห็นว่า LG2 ขาด C ขั้วเกลียวอัลฟาซึ่งมีส่วนเกี่ยวข้องในการสร้างการติดต่อระหว่าง G6 โดเมนและ G2 ทั้งใน gelsolin เลี้ยงลูกด้วยนมและ LG1 นี้ "สะพานสลัก" จะถือว่ามีบทบาทสำคัญในการ Ca2 + -activati​​on โดยการรักษาใน gelsolin ปิดโครงสร้างที่ไม่ใช้งานที่ต่ำ [Ca2 +] ใน LG2, ลดการติดต่อระหว่าง G6 และ G2 อาจจะเป็นผู้รับผิดชอบในการเปิดใช้งานที่ต่ำ Ca2 + -concentration

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองต่อที่แตกต่างกันของ CA ขึ้นอยู่กับเส้นใยโปรตีนโปรตีนที่ถูกระบุในการ gelsolin ข้ามเส้นกล้ามเนื้อของกุ้งมังกรอเมริกัน ตัวแปร ( เรียกว่าและ lg1 lg2 ) แตกต่างกันโดยส่วนขยายของ 18 AA ที่ c-terminus ของ lg1 และสองที่และแทน aa735 aa736 สองซึ่งกรดอะมิโนของ lg2 .การเปรียบเทียบการทำงานของโปรตีนที่แยกและทำให้บริสุทธิ์พบ gelsolin ทั่วไปคุณสมบัติทั้งสองที่มีความแตกต่างของแคลเซียม - ไว lg2 การใช้งานอย่างมีนัยสำคัญลดลงกว่าครึ่ง lg1 CA ความเข้มข้นสูงสุดทั้งเส้นใยและการกระตุ้นการ g-actin ผูกพัน 4 × 10 − 7 เป็น∼มแคลเซียมสำหรับ lg2 vs 2 × 10 − 6 M ∼ lg1 แคลเซียมสำหรับ .นี้บ่งชี้ว่า ค่าการกระตุ้นสำหรับสอง isoproteins ในสิ่งมีชีวิตที่พวกเขามีอยู่ในเกือบจะเท่ากับจำนวนในเซลล์ของกล้ามเนื้อ ทำนายโครงสร้างแบบจำลองบนพื้นฐานของโครงสร้างของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่รู้จัก gelsolin แสดงให้เห็นว่า lg2 ขาดซึ่งเป็นเกลียวอัลฟาซึ่งเกี่ยวข้องกับการติดต่อระหว่างอาณาจักร G6 และ G2 . ทั้งในและ gelsolin lg1 ) ," สลักสะพาน " จะถือว่ามีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นให้แคลเซียม - gelsolin ในปิดใช้งานโครงสร้างที่แคลเซียมต่ำ [ ] ในการติดต่อระหว่าง lg2 , G6 และ G2 อาจจะรับผิดชอบในการเปิดใช้งานที่ระดับแคลเซียม - สมาธิ