Absorption experiments were carried

Absorption experiments were carried out using Transwell inserts
(polycarbonate membrane, 0.4 μm pore size, 12 mm diameter, Corning
Inc., USA). Insertswere placed in 12-well plates. Caco-2 cellswere seeded
at 1 × 105 cells/mL on the membrane insertswith 1.5 mL of medium
in the apical/luminal side and basolateral side, respectively. Cells were
allowed to grow and differentiate to confluent monolayers for
20–26 days post seeding by changing the medium three times a week.
Transepithelial electrical resistance (TEER) of cells grown in the
Transwell was measured using the Millicell-ERS voltmeter (Millipore
Co., USA). Only monolayers with a TEER value higher than 400 Ω cm2
were used for experiments. TEER values were also obtained after completion
of transport experiments.
For experiments, mediumwas decanted, and the cellswere carefully
washed with HBSS (pH 7.4, 37 °C). 1 mL samples containing 37.5 μM
C3G were added to the apical side of the cells. Transepithelial transport
was followed in the CO2 incubator. At 1 h the C3G concentrations at apical
and basolateral sides were sampled, adjusted with HCl (1.0 M) to
make pH ≈ 2, cooled in an ice bath, and measured using HPLC. C3G
transport fromapical side to basolateral side across the apical cell membranewas
the C3G absorption. The adhesion of C3G to apical brushwas
in the serosal solution, which was calculated by deducting absorption
amount from luminal net disappearance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การดูดซึมทดลองดำเนินการโดยใช้แทรก Transwell(โพลีคาร์บอเนตเมมเบรน 0.4 ไมครอนขนาดรูขุมขน เส้นผ่าศูนย์กลาง 12 มม. Corningอิงค์ สหรัฐอเมริกา) Insertswere วางในดี 12 แผ่น Cellswere Caco-2 ฟิตเนสที่ 1 × 105 เซลล์/มล.ใน insertswith เมมเบรนของกลาง 1.5 mLในด้าน apical luminal และด้าน basolateral ตามลำดับ เซลล์อนุญาตให้เติบโต และแตกต่างเพื่อ monolayers confluent สำหรับวันที่ 20 – 26 ลงเพาะ โดยการเปลี่ยนตัวกลาง 3 ครั้งต่อสัปดาห์ความต้านทาน Transepithelial ไฟฟ้า (TEER) ของเซลล์ที่ปลูกในTranswell ซึ่งวัดได้โดยใช้โวลต์มิเตอร์ Millicell ERS (มิลลิพอร์บริษัท สหรัฐอเมริกา) เพียง monolayers TEER มูลค่าสูงกว่า 400 Ω cm2ใช้สำหรับการทดลอง นอกจากนี้ยังได้รับค่า TEER หลังจากเสร็จสิ้นการทดลองขนส่งสำหรับการทดลอง การดีแคนติ้ง mediumwas และ cellswere การอย่างระมัดระวังล้าง ด้วย HBSS (pH 7.4, 37 ° C) ตัวอย่าง 1 มล.ที่ประกอบด้วย 37.5 μ mC3G ถูกเพิ่มไปยังเซลล์ข้าง apical ขนส่ง Transepithelialตามมาในตู้อบ CO2 ที่ความเข้มข้น h 1 C3G ที่ apicalและด้าน basolateral ถูกเก็บตัว อย่าง ปรับกับ HCl (1.0 M)ทำให้ค่า pH ≈ 2 ระบายความร้อนด้วยน้ำแข็งในการ และวัดโดยใช้ HPLC C3Gขนส่ง fromapical ด้านข้าง basolateral ข้าม membranewas เซลล์ apicalการดูดซึม C3G การยึดเกาะของ C3G apical brushwasในการแก้ปัญหา serosal ซึ่งคำนวณ โดยหักการดูดซึมยอดเงินจาก luminal สุทธิหายตัวไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดลองการดูดซึมได้ดำเนินการโดยใช้ Transwell แทรก
(เมมเบรนโพลีคาร์บอเนต 0.4 ไมครอนขนาดรูขุมขน 12 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางคอร์นนิ่ง
อิงค์สหรัฐอเมริกา) Insertswere วางไว้ในจานเดียว 12 Caco-2 cellswere เมล็ด
ที่ 1 × 105 เซลล์ / มิลลิลิตรในเมมเบรน insertswith 1.5 มิลลิลิตรของกลาง
ในปลายด้าน / luminal และด้านข้าง basolateral ตามลำดับ เซลล์ที่ถูก
ได้รับอนุญาตให้เติบโตและความแตกต่างที่จะไหลมารวมกัน monolayers สำหรับ
20-26 วันหลังจากการเพาะโดยการเปลี่ยนกลางสามครั้งต่อสัปดาห์.
Transepithelial ความต้านทานไฟฟ้า (teer) ของเซลล์ที่ปลูกใน
Transwell วัดโดยใช้โวลต์มิเตอร์ Millicell-ERS (อร์ค
จำกัด , สหรัฐอเมริกา). monolayers เท่านั้นที่มีมูลค่าสูงกว่า teer 400 Ω cm2
ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลอง ค่า teer ยังได้รับหลังจากเสร็จสิ้น
การทดลองการขนส่ง.
สำหรับการทดลอง mediumwas decanted และ cellswere อย่างระมัดระวัง
ล้างด้วย HBSS (pH 7.4, 37 ° C) 1 ตัวอย่างที่มีมล 37.5 ไมครอน
C3G ถูกเพิ่มไปทางด้านปลายของเซลล์ ขนส่ง Transepithelial
ถูกใช้ในการเพาะบ่มก๊าซ CO2 ณ วันที่ 1 H เข้มข้น C3G ที่ปลาย
ด้านข้างและถูก basolateral ตัวอย่างปรับได้ด้วย HCl (1.0 ล้าน) จะ
ทำให้ค่า pH ≈ 2 ระบายความร้อนในห้องอาบน้ำน้ำแข็งและวัดโดยใช้วิธี HPLC C3G
ขนส่งด้าน fromapical ไปด้านข้าง basolateral ทั่วเซลล์ปลาย membranewas
การดูดซึม C3G การยึดเกาะของ C3G เพื่อ brushwas ยอด
ในการแก้ปัญหา serosal ซึ่งได้รับการคำนวณโดยการดูดซึมหัก
จำนวนเงินจากการหายตัวไปของสุทธิ luminal

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การดูดซึมของการทดลองใช้ transwell แทรกแผ่นโพลีคาร์บอเนต ( , 0.4 μ M รูขุมขนขนาด 12 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง คอร์นนิ่งInc . , USA ) ดี insertswere วางไว้ในจาน caco-2 ระดับเมล็ด1 × 105 เซลล์ / มิลลิลิตรในเยื่อ insertswith 1.5 มล. ขนาดกลางในปลาย / + ด้านข้างและด้าน basolateral ตามลำดับ เซลล์คือได้รับอนุญาตให้เติบโต และต่าง monolayers กระจู๋กระจี๋สำหรับ20 – 26 วันหลังเพาะ โดยการเปลี่ยนอาหารสามครั้งต่อสัปดาห์ต้านทานไฟฟ้า transepithelial ( เตี้ย ) เซลล์ที่ปลูกในtranswell ถูกวัดโดยใช้ millicell ERS ( มิลลิโวลท์มิเตอร์Co . , USA ) monolayers เท่านั้นที่มีค่าสูงกว่าΩตอนที่ 400 ตร. ซม.ที่ใช้สำหรับการทดลอง ตอนที่ยังได้รับหลังจากเสร็จค่าการทดลองของการขนส่งสำหรับการทดลอง mediumwas รินและระดับอย่างระมัดระวังล้างด้วย hbss ( pH 7.4 37 ° C ) ตัวอย่าง 1 ml ประกอบด้วย 37.5 μม.c3g ถูกเพิ่มไปยังด้านปลายของเซลล์ การขนส่ง transepithelialตามใน CO2 ตู้ฟักไข่ 1 ชั่วโมง c3g ความเข้มข้นที่ปลายและด้าน basolateral จำนวนที่ปรับมี HCl ( 1.0 M )ทำให้ pH ≈ 2 ลงในน้ำแข็ง นํ้า และการวัดโดยใช้ HPLC . c3gการขนส่ง fromapical ทาง basolateral ด้านตรงข้าม membranewas ปลายเซลล์การ c3g การดูดซึม การยึดเกาะของ c3g ที่จะเกิด brushwasในการแก้ปัญหา serosal ซึ่งคำนวณโดยหักการดูดซึมจำนวนเงินสุทธิจากการ + .