2.3. Simultaneous saccharification

2.3. Simultaneous saccharification and ethanol fermentation
The yeastSaccharomyces cerevisiaeYC-097 was used throughout
this study. The stock cultures were maintained on YPD agar plates
at 4C and transferred to fresh plates every 4 weeks to avoid the
micro-organism degradation. The inoculum preparation was by
means of micro-organism transfer from stock cultures to a fresh
plate and grew for 48 h at 30C. Following this period, single colonies were transferred to a 250 mL flask with 100 mL YPD medium.
The flask was placed on a orbital shaker with a shaking diameter
5 cm and a shaking frequency 200 rpm and incubated at 30C for
24 h. This was used as the inoculum for ethanol fermentation, its
yeast concentration is about 1.510
8
cells mL
1
. The ethanol fermentation was carried out in a 250 mL flask with 95 mL ethanol
fermentation medium and 5 mL inoculum at 40C and 200 rpm
for 72 h. During the fermentation, small samples were taken at regular intervals for later analytic usage. The compositions of culture
medium were as follows (g L1
):
The YPD agar medium: D-glucose 20, peptone 20, yeast extract
10, agar 15.
The YPD medium: D-glucose 20, peptone 20, yeast extract 10.
The ethanol fermentation medium: two-step treated RS 100,
peptone 20, yeast extract 10.
The YPD agar medium and the YPD medium were autoclaved at
121C for 20 min after pH was adjusted to 7 by addition of 1 M
NaOH or 1 M HCl. The ethanol fermentation medium was autoclaved at 121C for 30 min after pH was adjusted to 5.5 by
addition of 1 M NaOH or 1 M HCl. Then 150 mg Onazuka R-10
and 5 mL Novozyme 188 were added to 1 L sterilized ethanol
fermentation medium

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. พร้อมหมัก saccharification และเอทานอลYeastSaccharomyces cerevisiaeYC-097 ถูกใช้ตลอดการศึกษานี้ วัฒนธรรมหุ้นถูกรักษาไว้บนแผ่น agar YPDที่ 4 C และโอนย้ายไปที่แผ่นสดทุก 4 สัปดาห์เพื่อหลีกเลี่ยงการไมโครสิ่งมีชีวิตย่อยสลาย มีการเตรียม inoculum โดยวิธีการโอนไมโครสิ่งมีชีวิตจากวัฒนธรรมหุ้นสดแผ่น และเติบโตใน h 48 ที่ 30 ซี ตามรอบระยะเวลา อาณานิคมเดียวนี้ถูกโอนย้ายไปหนาว 250 mL กับกลาง YPD 100 มลหนาวถูกวางในเชคเกอร์ของวงโคจรมีขนาดงก ๆ5 ซม.และความถี่งก ๆ 200 rpm และ incubated ที่ C 30 สำหรับ24 ชม นี้ถูกใช้เป็น inoculum หมักเอทานอล ของความเข้มข้นของยีสต์คือ 10 ประมาณ 1.58เซลล์ mL1. การหมักเอทานอลถูกดำเนินในหนาว 250 mL ด้วยเอทานอล 95 mLหมักกลางและ 5 mL inoculum ที่ 40 C และ 200 รอบต่อนาทีสำหรับ 72 h ระหว่างการหมัก ตัวอย่างขนาดเล็กที่ถ่ายอย่างสม่ำเสมอภายหลังคู่ใช้ องค์ของวัฒนธรรมกลางมีดังนี้ (g L 1):สื่อ agar YPD: D-กลูโคส 20, peptone 20 สารสกัดจากยีสต์10, agar 15สื่อ YPD: D-กลูโคส 20 ยีสต์ peptone 20 แยก 10สื่อการหมักเอทานอล: สองขั้นตอนถือว่า RS 100peptone 20 ยีสต์แยก 10สื่อ agar YPD และสื่อ YPD ถูก autoclaved ที่121 C สำหรับ 20 นาทีหลังจาก pH ถูกปรับถึง 7 แห่ง 1 MNaOH หรือ 1 M HCl สื่อการหมักเอทานอลถูก autoclaved ที่ 121 C ใน 30 นาทีหลังจากถูกปรับ pH 5.5 โดยแห่ง 1 M NaOH หรือ 1 M HCl แล้ว 150 mg Onazuka R-10และมีเพิ่ม 5 mL Novozyme 188 การ 1 L sterilized เอทานอลหมักกลาง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 saccharification พร้อมกันและการหมักเอทานอล
yeastSaccharomyces cerevisiaeYC-097
ถูกนำมาใช้ตลอดทั้งการศึกษาครั้งนี้ หุ้นวัฒนธรรมที่ได้รับการดูแลบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ YPD
ที่ 4 องศาเซลเซียสและโอนไปยังแผ่นสดใหม่ทุก 4
สัปดาห์เพื่อหลีกเลี่ยงการย่อยสลายจุลินทรีย์ การเตรียมหัวเชื้อที่ได้จากวิธีการของการถ่ายโอนจุลินทรีย์จากวัฒนธรรมหุ้นสดแผ่นและเติบโตเป็นเวลา48 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียส ต่อไปเวลานี้อาณานิคมเดียวถูกย้ายไปขวด 250 มิลลิลิตรที่มีขนาดกลาง 100 มล YPD. ขวดถูกวางลงบนเครื่องปั่นวงโคจรที่มีเส้นผ่าศูนย์กลางสั่น5 ซม. และความถี่ในการเขย่า 200 รอบต่อนาทีและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา24 ชั่วโมง นี้ถูกนำมาใช้เป็นหัวเชื้อในการหมักเอทานอลที่ความเข้มข้นของยีสต์ประมาณ 1.5 10 8 เซลล์มิลลิลิตร1 เอทานอลหมักได้ดำเนินการในขวด 250 มิลลิลิตรที่มีเอทานอล 95 มิลลิลิตรขนาดกลางและหมักหัวเชื้อ5 มิลลิลิตรที่ 40 องศาเซลเซียสและ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา72 ชั่วโมง ในระหว่างการหมักตัวอย่างเล็ก ๆ ที่ถูกนำมาในช่วงเวลาปกติสำหรับการใช้งานการวิเคราะห์ในภายหลัง องค์ประกอบของวัฒนธรรมกลางมีดังนี้ (ช L 1): สื่อวุ้น YPD: D-กลูโคส 20 เปปโตน 20, สารสกัดจากยีสต์ที่10 วุ้น 15. กลาง YPD: D-กลูโคส 20 เปปโตน 20, สารสกัดจากยีสต์ 10 . สื่อการหมักเอทานอล: สองขั้นตอนที่ได้รับการรักษาอาร์เอส 100, เปปโตน 20, สารสกัดจากยีสต์ 10. กลางวุ้น YPD และสื่อ YPD ถูกเบาที่? 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีหลังจากที่มีการปรับค่า pH 7 โดยนอกเหนือจาก 1 M NaOH หรือ 1 M HCl การหมักเอทานอลขนาดกลางที่ได้รับการนึ่งฆ่าเชื้อที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีหลังจากที่มีการปรับค่า pH 5.5 โดยนอกเหนือจาก1 M NaOH หรือ 1 M HCl แล้ว 150 มก. Onazuka R-10 และ 5 มิลลิลิตร 188 Novozyme ถูกเพิ่มเข้าไปในการฆ่าเชื้อ 1 ลิตรเอทานอลขนาดกลางหมัก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 เส้นพร้อมกันและการหมักเอทานอลจาก yeastsaccharomyces cerevisiaeyc-097

ใช้ตลอดการศึกษา หุ้นยังคงวัฒนธรรมใน ypd วุ้นแผ่น
ที่ 4  C และโอนไปยังจานใหม่ทุก 4 สัปดาห์เพื่อหลีกเลี่ยง
การย่อยสลายอินทรีย์ ไมโคร การเตรียมเชื้อโดย
หมายถึงสิ่งมีชีวิตขนาดเล็กจากการโอนหุ้นวัฒนธรรมสด
จานและเติบโต 48 H 30  C ตามช่วงเวลานี้อาณานิคมเดียวที่ถูกโอนไปยังขวด 250 ml กับ 100 ml ypd ปานกลาง
ขวดวางอยู่บนเครื่องปั่นโคจรกับสั่น ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 ซม. และความถี่
เขย่า 200 รอบต่อนาทีอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและ 
24 ชั่วโมง นี้ ใช้ เป็นเชื้อสำหรับการหมักเอทานอล ความเข้มข้นของยีสต์
ประมาณ 1.5  10
8

 เซลล์มิลลิลิตร 1

ที่หมักเอธานอลได้ดำเนินการในขวด 250 มล. 240 มิลลิลิตรเอทานอล
หมักปานกลาง และ 5 มิลลิลิตรปริมาณ 40  C 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ในระหว่างการหมัก
ตัวอย่างขนาดเล็กถูกถ่ายในช่วงเวลาปกติ หลังวิเคราะห์การใช้งาน องค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อ
ดังนี้ ( G L  1

) : ypd อาหารวุ้น : ดี กูลโคส 20 20 extract สารสกัดจากยีสต์ ,

10 15 ypd ขนาดกลาง : วุ้นดี กูลโคส 20 20 extract สารสกัดจากยีสต์ , 10
หมักเอธานอลขนาดกลาง 2 ถือว่า Rs 100
20 extract สารสกัดจากยีสต์ , 10
ypd อาหารวุ้น และ ypd ขนาดกลางถูกสังเคราะห์ใน
121  C เป็นเวลา 20 นาทีหลังจากการปรับ pH 7 และ 1 m
NaOH หรือ 1 เมตร HCL . ใช้หมักอาหารสังเคราะห์ที่ 121  C นาน 30 นาที หลังมีการปรับ pH 5.5 โดย
เพิ่ม 1 เมตรหรือ 1 M NaOH HCl . แล้ว 150 มิลลิกรัม onazuka r-10
5 ml novozyme 188 เพิ่ม 1 ล. การหมักเอทานอล
ฆ่าเชื้อขนาดกลาง