Microtuber slices of potato cultiva

Microtuber slices of potato cultivar ‘‘Atlantic’’ were co-
cultured (media: MS + 1 mg/L, IAA + 0.2 mg/L, GA3 + 0.5 mg/
L, 6-BA + 2 mg/L ZT) for two days with A. tumefaciens
LBA4404 containing the plasmid pBI121-CaMV 35S-CryIIIA
and pBI121-ST-LS1-CryIIIA respectively, then transferred
into the selected medium supplemented with 50 mg/L of
kanamycin. After three weeks, green buds sprouted directly
from the surface of the slices (Fig. 1A). When the green
X. Mi et al. / C. R. Biologies 338 (2015) 443–450 445
shoots reached a length of 1 cm, they were transferred to a
selective rooting medium containing 100 mg/L of kanamy-
cin. Roots were formed in about 10 days (Fig. 1B). Plantlets
with well-developed roots were propagated for further
molecular analysis. Genomic DNA indicating the presence of
the cry3A gene in the putative transformed plants was
extracted and confirmed by PCR assay. The result showed
that the transformed plants had a 709-bp amplification
product, which was missed in control plants (Fig. 2). qRT-
PCR analysis showed that cry3A gene expressed in roots,
stems and leaves, except the roots contained the ST-LS1
promoter and the whole tissue in the control plants, and had
higher expression in leaves than in stems and roots (Fig. 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Microtuber แผ่นมันฝรั่งพันธุ์ ''แอตแลนติก '' ได้ co-เพาะเลี้ยง (สื่อ: MS + 1 mg/L, IAA + 0.2 mg/L, GA3 + 0.5 มิลลิกรัม /L, 6 BA + 2 mg/L ZT) สองวันกับ A. tumefaciensLBA4404 ที่ประกอบด้วย plasmid pBI121 CaMV 35S-CryIIIAและ pBI121-ST-LS1-CryIIIA ตามลำดับ การโอนย้ายเป็นสื่อเลือกเสริม ด้วย 50 mg/Lกานามัยซิน หลังจากสามสัปดาห์ ตาสีเขียวงอกโดยตรงจากพื้นผิวของชิ้น (รูปที่ 1A) เมื่อสีเขียวX. Mi ร้อยเอ็ด / C. R. Biologies 338 (2015) 443-450 445ความยาว 1 เซนติเมตรถึงหน่อ พวกเขาถูกย้ายไปเลือกรากปานกลางประกอบด้วย 100 mg/L kanamy-cin รากเกิดขึ้นในประมาณ 10 วัน (รูปที่ 1B) Plantletsมีรากพัฒนาได้เผยแพร่สำหรับการเพิ่มเติมการวิเคราะห์โมเลกุล ดีเอ็นเอการบ่งชี้สถานะของมียีน cry3A ในพืชเปลี่ยนอ้างว่าฝาสกัด และยืนยันการทดสอบ PCR ผลพบว่าที่โรงงานที่รับการเปลี่ยนแปลงที่มีขยาย 709-bpผลิตภัณฑ์ ที่ผิดพลาดในโรงงานควบคุม (รูป 2) qRT-วิเคราะห์ PCR พบยีน cry3A ที่แสดงในรากลำต้นและใบ ยกเว้นรากอยู่ ST-LS1โปรโมเตอร์และเนื้อเยื่อทั้งในโรงงานควบคุม และแสดงออกที่สูงในใบมากกว่าลำต้นและราก (3 รูป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชิ้นท่อนพันธุ์ขิงมันฝรั่งพันธุ์ '' แอตแลนติก '' ได้ร่วม
เลี้ยง (Media: MS + 1 มิลลิกรัม / ลิตร, IAA + 0.2 มิลลิกรัม / ลิตร, GA3 + 0.5 mg /
L, 6-BA + 2 มิลลิกรัม / ลิตร ZT) สำหรับสอง วันที่มี A. tumefaciens
LBA4404 ที่มีพลาสมิด pBI121-CaMV 35S-CryIIIA
และ pBI121-ST-LS1-CryIIIA ตามลำดับจากนั้นก็ย้าย
เข้าไปในสื่อที่เลือกเสริมด้วย 50 มิลลิกรัม / ลิตรของ
กานามัยซิ หลังจากสามสัปดาห์, ตาสีเขียวแตกหน่อโดยตรง
จากพื้นผิวของชิ้น (รูป. 1A) เมื่อสีเขียว
เอ็กซ์ Mi et al, / CR biologies 338 (2015) 443-450 445
หน่อถึงความยาว 1 ซม. ที่พวกเขาได้รับการโอนไปยัง
เลือกการขจัดสื่อที่มี 100 มิลลิกรัม / ลิตรของ kanamy-
CIN รากกำลังก่อตัวขึ้นในเวลาประมาณ 10 วัน (รูปที่ 1B.) ต้นกล้า
ที่มีรากการพัฒนาที่ดีได้รับการแพร่กระจายต่อการ
วิเคราะห์โมเลกุล ดีเอ็นเอบ่งบอกถึงการปรากฏตัวของ
ยีน cry3A ในพืชเปลี่ยนสมมุติถูก
สกัดและได้รับการยืนยันโดยวิธี PCR ทดสอบ ผลการศึกษาพบ
ว่าพืชเปลี่ยนมีการขยาย 709-BP
สินค้าซึ่งได้รับการพลาดในพืชควบคุม (รูปที่. 2) qRT-
PCR และแสดงให้เห็นว่า cry3A ยีนที่แสดงออกในราก
ลำต้นและใบยกเว้นรากที่มี ST-LS1
โปรโมเตอร์และเนื้อเยื่อทั้งในโรงงานควบคุมและมี
การแสดงออกในใบสูงกว่าในลำต้นและราก (รูปที่. 3) .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

microtuber ชิ้นมันฝรั่งพันธุ์ " " " เป็น Co - "atlanticเพาะเลี้ยง ( สื่อ : MS + IAA 1 มิลลิกรัมต่อลิตร + 0.2 มก. / ล. , GA3 + 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตรผม 6-ba + 2 มิลลิกรัมต่อลิตรเป็นเวลาสองวันกับ ZT ) A . tumefaciensLBA4404 ที่มีพลาสมิด pbi121 35S CaMV cryiiiaและ pbi121-st-ls1-cryiiia ตามลำดับ แล้วโอนในอาหารที่เสริมด้วย 50 มก. / ล.ทั้งสอง หลังจากสามสัปดาห์ ดอกตูมสีเขียวแตกหน่อได้โดยตรงจากพื้นผิวของแผ่น ( รูปที่ 1A ) เมื่อสีเขียวX มิ et al . / C . R . ชีววิทยา 338 ( 2015 ) 443 445 - 450ยิงถึงความยาว 1 เซนติเมตร พวกเขาถูกส่งไปการขจัดอาหารที่ 100 มิลลิกรัม / ลิตร kanamy -cin . รากขึ้นใน 10 วัน ( รูปที่ 1A ) เดือนกับการพัฒนารากถูกขยายพันธุ์ต่อไปการวิเคราะห์ระดับโมเลกุล ดีเอ็นเอบ่งชี้สถานะของการ cry3a กรดอะมิโนเปลี่ยนยีนในพืชการสกัดและการยืนยันโดยวิธี PCR assay . ผลการศึกษาพบว่าที่แปลงพืชมี 709 ( BPผลิตภัณฑ์ ที่พลาดในโรงงานควบคุม ( รูปที่ 2 ) ข้าพเจ้า -การวิเคราะห์ PCR พบว่า cry3a ยีนแสดงออกในรากต้นและใบ ยกเว้นรากมี st-ls1โปรโมเตอร์และเนื้อเยื่อทั้งหมดในพืชควบคุม และมีการแสดงออกสูงในใบมากกว่า ในต้นและราก ( รูปที่ 3 )