For D1: 20–30 μg protein was assayed with a final concentration of 0.1 μCi 125I-rT3 (North Institute of Biotechnology, Beijing, China) plus 500 nM unlabeled rT3 and 5 mM DTT, 1 mM EDTA in 0.1 M phosphate (pH 7.4) for 60 min at 37 °C. For D3: 30–50 μg protein with 0.1 μCi [3′-125I] T3 (North Institute of Biotechnology, Beijing, China) plus 50 nM
unlabeled T3, 20 mM DTT, 2 mM EDTA, 0.1 mM PTU and 1 μM rT3 in 0.1 Mphosphate (pH 7.4) for 60 min at 37 °C.
The enzyme activity was expressed as pmol 125I or fmol 125I released per minute per milligram
of protein.
สำหรับ D1: 20-30 ไมโครกรัมโปรตีนได้รับการวิเคราะห์ที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.1 μCi 125i-RT3 (ภาคเหนือสถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ, ปักกิ่ง, จีน) บวก 500 นาโนเมตรและไม่มีป้ายกำกับ RT3 5 มิลลิ DTT, EDTA 1 มิลลิใน 0.1 M ฟอสเฟต (pH 7.4 ) เป็นเวลา 60 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส สำหรับ D3: 30-50 ไมโครกรัมโปรตีน 0.1 μCi [3'-125i] T3 (ภาคเหนือสถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ, ปักกิ่ง, จีน) บวก 50
นาโนเมตรที่ไม่มีป้ายกำกับT3, 20 มิลลิ DTT 2 มิลลิ EDTA, 0.1 มิลลิ PTU 1 ไมครอน RT3 ใน 0.1 Mphosphate (pH 7.4) เป็นเวลา 60 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส. การทำงานของเอนไซม์ที่ได้รับการแสดงเป็น pmol 125i หรือ 125i fmol ปล่อยออกมาต่อนาทีต่อมิลลิกรัมของโปรตีน
การแปล กรุณารอสักครู่..
สำหรับ D1 : 20 – 30 μกรัมโปรตีนซีรั่มที่มีความเข้มข้นสุดท้าย 0.1 μ CI 125i-rt3 ( สถาบันทางชีวภาพ , ปักกิ่ง , จีน ) บวก 500 nm unlabeled rt3 ส่วน 5 มม. 1 mM EDTA ใน 0.1 M phosphate ( pH 7.4 ) 60 นาทีที่ 37 องศา สำหรับ D3 : 30 – 50 μกรัมโปรตีน 0.1 μ CI [ 3 ’ - 125I ] T3 ( สถาบันทางชีวภาพ , ปักกิ่ง , จีน ) บวก 50 nm
unlabeled T3 , DTT 20 mm , 2 mm EDTA , 0PTU 1 มม. และ 1 μ rt3 ใน 0.1 M mphosphate ( pH 7.4 ) 60 นาทีที่ 37 ° C
กิจกรรมเอนไซม์แสดงเป็น pmol 125I หรือ fmol 125I ออกต่อนาทีต่อมิลลิกรัม
ของโปรตีน
การแปล กรุณารอสักครู่..