Luria–Bertani (LB) medium ranging f

Luria–Bertani (LB) medium ranging from 20 to 1280 mg/ml. To each
tube, 100 ml of the inoculum containing approximately 107 CFU/ml
microorganisms was added. A control test was also performed containing
inoculated broth supplemented with only DMSO under
identical conditions with gentamicin as reference. The tubes were
then incubated at 37 C for 24 h and examined for evidence of the
growth. The first tube without turbidity was determined as the
MIC value. All assays were performed in triplicate.
The MBC was regarded as the lowest concentration of the samples
that allowed less than 0.1% of the original inoculum treated
with the extract or compound samples to survive and grow on the
surface of the medium used. The MBC values were determined
according to the method of Shan, Cai, John, and Cork (2008). In brief,
the samples (50 ml) for theMBC assays were taken from the tubes of
the MIC assays in which any visible turbidity was not observed.
Then, they were spread on freshly prepared nutrient agar plates
and were incubated at 37 C for 24 h so as to determine theMBC values.
After the incubation, the plates were observed for growth. Triplicate
samples were performed for each test concentration.
2.8. Scanning electron microscope (SEM) observations
To determine the efficacy of the essential oil and the morphological
changes of bacteria, SEM observation was performed on
the tested bacteria. The method of SEM was modified from Shan
et al. (2008). The bacteria cells were incubated in nutrient broth
at 37 C for 10 h. The suspension was divided into two portions.
One portion was added suitable concentrations (MIC) of the essential
oil with enzyme liquefaction treatment, the other portion was
left untreated as a control. The resuspension was incubated at
37 C for 4 h, and then the cells from both tubes were harvested
by centrifugation and were fixed with a 2.5% glutaraldehyde solution
overnight at 4 C. After this, a drop of each resuspension was
filtered by 30%, 50%, 70%, 90%, and 100% ethanol, respectively.
Then, cells were dried at ‘‘critical point’’ in liquid CO2 under
95 bar pressure. The samples were gold-covered by cathodic spraying.
Finally, morphology of the bacterial cells was observed on a
scanning electron microscope (SEM) (Quanta-200, Philips-FEI Co.,
Amsterdam, Netherlands).
2.9. Statistical analysis
Experimental results were means ± SD of three parallel measurements.
Statistical analyses were performed by Data Processing
System (DPS, version 7.05) and Excel program.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตั้งแต่ 20 ถึง 1280 mg/ml กลาง Luria-Bertani (ปอนด์) แต่ละหลอด 100 ml ของ inoculum ประกอบด้วยประมาณ 107 CFU/mlมีเพิ่มจุลินทรีย์ ยังทำการทดสอบการควบคุมประกอบด้วยซุป inoculated เสริม ด้วย DMSO ภายใต้เงื่อนไขเหมือนกับ gentamicin เป็นอ้างอิง หลอดได้แล้ว incubated ที่ 37 C ใน 24 ชม และตรวจสอบหาหลักฐานของการเจริญเติบโต หลอดแรกไม่ มีความขุ่นได้กำหนดเป็นการค่า MIC Assays ทั้งหมดถูกทำใน triplicateช่อง MBC ถูกถือว่าเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของตัวอย่างที่ได้น้อยกว่า 0.1% ของ inoculum เดิมถือว่าสารสกัดหรือตัวอย่างประกอบเพื่อความอยู่รอด และเติบโตในพื้นผิวของสื่อที่ใช้ มีกำหนดค่าที่ช่อง MBCตามวิธี ของชาน ไก จอห์น คอร์ก (2008) สังเขปตัวอย่าง (50 มล.) สำหรับ theMBC assays ที่ได้มาจากท่อของassays ไมค์ที่ซึ่งมีความขุ่นของน้ำที่มองเห็นได้ไม่สังเกตแล้ว พวกเขาถูกโบกซึ่งทำแผ่นธาตุอาหาร agarและมี incubated ที่ 37 C ใน 24 ชมเพื่อกำหนดค่า theMBCหลังจากบ่ม แผ่นได้สังเกตการเจริญเติบโต Triplicateตัวอย่างที่ดำเนินการสำหรับแต่ละความเข้มข้นของการทดสอบ2.8 การสังเกตที่การสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM)การตรวจสอบประสิทธิภาพของน้ำมันหอมระเหยและการกระทบเปลี่ยนแปลงของแบคทีเรีย SEM สังเกตทำการตามแบคทีเรียที่ผ่านการทดสอบ มีการปรับเปลี่ยนวิธีการ SEM จากชานal. ร้อยเอ็ด (2008) เซลล์แบคทีเรียถูก incubated ในธาตุอาหารซุปที่ 37 C สำหรับ 10 h ระบบกันสะเทือนถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนส่วนหนึ่งเข้ามา (MIC) ความเข้มข้นเหมาะสมของสำคัญน้ำมัน ด้วยเอนไซม์บำบัด liquefaction ส่วนถูกด้านซ้ายไม่ถูกรักษาเป็นตัวควบคุม การ resuspension ตะกอนถูก incubated ที่C 37 สำหรับ 4 h และเซลล์จากหลอดทั้งสองได้เก็บเกี่ยวโดย centrifugation และก็คง มีการแก้ไขปัญหา 2.5% glutaraldehydeนอนที่ค. 4 หลังจากนี้ resuspension ตะกอนแต่ละหยดถูกกรอง โดย 30%, 50%, 70%, 90% และเอทานอ ล 100% ตามลำดับเซลล์ถูกอบแห้งใน ''จุดสำคัญ '' ใน CO2 เหลวภายใต้ดันบาร์ 95 ตัวอย่างได้ครอบคลุมทอง โดยพ่น cathodicสุดท้าย สัณฐานวิทยาของเซลล์แบคทีเรียถูกสังเกตในการกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM) (Quanta 200 บริษัทฟิลิปส์หุย การสแกนอัมสเตอร์ดัม เนเธอร์แลนด์)2.9. สถิติวิเคราะห์ผลการทดลองหมายถึง± SD วัดขนานที่สามได้วิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการ โดยการประมวลผลข้อมูลระบบ (DPS รุ่น 7.05) และโปรแกรม Excel

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Luria-Bertani (LB) กลางตั้งแต่ 20-1,280 mg / ml แต่ละหลอด 100 มล. ของเชื้อที่มีประมาณ 107 CFU / ml จุลินทรีย์ที่ถูกเพิ่มเข้ามา การทดสอบการควบคุมนอกจากนี้ยังได้ดำเนินการที่มีน้ำซุปเชื้อเสริมด้วยเพียง DMSO ภายใต้เงื่อนไขที่เหมือนกันกับgentamicin เป็นข้อมูลอ้างอิง หลอดถูกบ่มแล้วที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและตรวจสอบหาหลักฐานของการเจริญเติบโต หลอดแรกโดยไม่ต้องขุ่นถูกกำหนดเป็นค่า MIC ตรวจทั้งหมดได้รับการดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า. MBC ถูกมองว่าเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับอนุญาตน้อยกว่า0.1% ของเชื้อเดิมได้รับการรักษาด้วยสารสกัดจากตัวอย่างหรือสารที่จะอยู่รอดและเติบโตบนพื้นผิวของสื่อที่ใช้ ค่า MBC ได้รับการพิจารณาตามวิธีการของฉานCai จอห์นและคอร์ก (2008) ในช่วงสั้น ๆตัวอย่าง (50 มล.) สำหรับการตรวจ theMBC ถูกนำมาจากหลอดตรวจMIC ที่ขุ่นมองเห็นใด ๆ ก็ไม่เห็น. จากนั้นพวกเขาก็ถูกแพร่กระจายบนปรุงสดใหม่จานอาหารเลี้ยงเชื้อและได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อกำหนดค่า theMBC. หลังจากการบ่มที่แผ่นเปลือกโลกถูกตั้งข้อสังเกตสำหรับการเจริญเติบโต เพิ่มขึ้นสามเท่าตัวอย่างที่ถูกดำเนินการสำหรับความเข้มข้นของการทดสอบแต่ละ. 2.8 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสแกน (SEM) การสังเกตการตรวจสอบประสิทธิภาพของน้ำมันหอมระเหยและก้านการเปลี่ยนแปลงของเชื้อแบคทีเรียสังเกตSEM ได้ดำเนินการเกี่ยวกับเชื้อแบคทีเรียที่ผ่านการทดสอบ วิธีการของ SEM ที่ได้รับการดัดแปลงมาจากฉานet al, (2008) เซลล์แบคทีเรียถูกบ่มในน้ำซุปสารอาหารที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 ชั่วโมง ระงับแบ่งออกเป็นสองส่วน. ส่วนหนึ่งได้รับการเพิ่มความเข้มข้นที่เหมาะสม (MIC) ของที่จำเป็นน้ำมันที่มีการรักษาเหลวเอนไซม์ส่วนอื่นที่เหลือได้รับการรักษาเป็นตัวควบคุม resuspension ถูกบ่มที่37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงและจากนั้นเซลล์จากท่อทั้งสองถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงและได้รับการแก้ไขด้วยวิธีการแก้ปัญหาglutaraldehyde 2.5% ในชั่วข้ามคืนที่ 4 องศาเซลเซียส หลังจากนี้ลดลงจาก resuspension แต่ละถูกกรองโดย30%, 50%, 70%, 90% และเอทานอล 100% ตามลำดับ. จากนั้นเซลล์แห้งที่ '' จุดสำคัญ '' ใน CO2 เหลวภายใต้95 ดันบาร์ กลุ่มตัวอย่างที่ถูกปกคลุมไปด้วยทองคำโดยการฉีดพ่น cathodic. สุดท้ายสัณฐานวิทยาของเซลล์แบคทีเรียได้สังเกตบนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด (SEM) (ควอนตั้ม-200, ฟิลิป-FEI Co. , อัมสเตอร์ดัม, เนเธอร์แลนด์.) 2.9 การวิเคราะห์ทางสถิติผลการทดลองเป็นวิธี± SD สามวัดขนาน. การวิเคราะห์ทางสถิติที่ดำเนินการโดยการประมวลผลข้อมูลของระบบ (DPS, รุ่น 7.05) และโปรแกรม Excel

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ลุเรีย–แบร์ตานิ ( ปอนด์ ) ( ตั้งแต่ 20 ถึง 280 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรละ
หลอด 100 มิลลิลิตรของเชื้อที่มีประมาณ 107 CFU / ml
จุลินทรีย์ที่ถูกเพิ่มเข้ามา ควบคุมการทดสอบยังแสดงที่มีเชื้อที่เติม DMSO ซุป

เพียงภายใต้เงื่อนไขเดียวกันกับยาเจนตาไมซิน เป็นข้อมูลอ้างอิง หลอดถูก
จากนั้นบ่มที่ 37  C 24 ชั่วโมง และตรวจสอบหลักฐานของ
การเจริญเติบโตหลอดแรกโดยไม่มีความขุ่น ตั้งใจเป็น
ค่า MIC สามารถแสดงทั้งสามใบ
MBC ถือเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของตัวอย่าง
ที่ให้น้อยกว่า 0.1% ของเชื้อเดิมถือว่า
กับสารสกัดหรือตัวอย่างสารประกอบจะอยู่รอดและเติบโตบนพื้นผิวของตัวกลางที่ใช้
. MBC ค่าวิเคราะห์
ตามวิธีการของไทใหญ่ ไช่ จอห์นและไม้ก๊อก ( 2008 ) ในช่วงสั้น ๆ ,
ตัวอย่าง ( 50 มล. ) สำหรับ thembc ) นำมาจาก ท่อ หรือ ไมค์ ที่ ใด ๆ

เห็นความขุ่นไม่ปฏิบัติตาม จึงมีการแพร่กระจายบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารเตรียมสด
และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง  เพื่อตรวจสอบ thembc
หลังค่า บ่มเพาะ จานเป็นสังเกตสำหรับการเจริญเติบโต ทำสำเนาสามฉบับ
ตัวอย่างแสดงสำหรับแต่ละการทดสอบความเข้มข้น .
2.8 . กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( SEM ) สังเกต
เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพของน้ำมันหอมระเหยและการเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของแบคทีเรียด้วย
,
สังเกตคือใช้ทดสอบแบคทีเรีย วิธีนี้ได้ดัดแปลงจากฉาน
et al . ( 2008 ) แบคทีเรียเซลล์ถูกเลี้ยงในสารอาหารซุป
37  นาน 10 ชั่วโมงการแบ่งออกเป็นสองส่วน ส่วนหนึ่งคือการเพิ่มความเข้มข้นเหมาะสม
( MIC ) ของน้ำมันหอมระเหย
รักษา , เอนไซม์ , ส่วนอื่น
ซ้าย untreated เป็นตัวควบคุม การ resuspension ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส 
4 H , และจากนั้นเซลล์ทั้งจากหลอดเก็บ
โดยการเหวี่ยงแยกและแก้ไขด้วย 2.5% glutaraldehyde โซลูชั่น
ค้างคืนที่ 4  Cหลังนี้ หยดของแต่ละ resuspension คือ
กรองโดย 30% , 50% , 70% , 90% และ 100% เอทานอลตามลำดับ .
แล้วเซลล์แห้งที่จุด ' ' ใน ' 'critical เหลว CO2 ภายใต้
95 บาร์แรงดัน จำนวนทองที่ปกคลุมด้วยเหล็กพ่น
ในที่สุด สัณฐานวิทยาของเซลล์แบคทีเรียพบว่าใน
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( SEM ) ( quanta-200 ฟิลิปส์เฟย Co . ,

อัมสเตอร์ดัม , เนเธอร์แลนด์ )2.9 . การวิเคราะห์ผลการทดลอง คือหมายความว่า SD ±
3
วัดขนาน สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์คือดำเนินการโดยระบบการประมวลผล
ข้อมูล ( DPS , รุ่นสุดท้าย ) และโปรแกรม Excel