The elution
gradient to obtain correct separation of the 3 different phytoalexins
at a solvent flow of 1 mL min−1 was: 0–10 min, 94% (A) and
6% (B); 10–30 min, 94% (A) and 6% (B); 30–35 min, 82% (A) and
18% (B); 35–50 min, 67% (A) and 33% (B); 50–55 min, 42% (A) and
58% (B); 55–60 min, 94% (A) and 6% (B). The phytoalexins were
detected using a fluorescence light detector (FLD, PMTGain 10, Agilent)
at excitation and emission wavelengths of 340 and 425 nm,
respectively.
The column was set at room temperature and the
temperature of the autosampler held at 4 ◦C.
The phytoalexins were
identified by comparison with the retention time of authentic standards
of scoparone, scopoletin, and umbelliferone (Sigma–Aldrich)
and quantified by peak area comparison using standard curves
built up with authentic calibration standards ranging from 0.01 to
1 mg mL−1.
ชะ
ลาดที่จะได้รับการแยกที่ถูกต้องของ 3 ไฟโตอเล็กซินที่แตกต่างกัน
ในการไหลของตัวทำละลาย 1 มิลลิลิตรนาที 1: 0-10 นาที, 94% (A) และ
6% (B); 10-30 นาที, 94% (A) และ 6% (B); 30-35 นาที, 82% (A) และ
18% (B); 35-50 นาที, 67% (A) และ 33% (B); 50-55 นาที, 42% (A) และ
58% (B); 55-60 นาที, 94% (A) และ 6% (B) ไฟโตอเล็กซินถูก
ตรวจพบโดยใช้เครื่องตรวจจับแสงเรืองแสง (FLD, PMTGain 10 Agilent)
ในการกระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น 340 และ 425 นาโนเมตร
ตามลำดับ.
คอลัมน์นี้ถูกตั้งไว้ที่อุณหภูมิห้องและ
อุณหภูมิ autosampler จัดขึ้นที่ 4 ◦C.
ไฟโตอเล็กซินถูก
ระบุโดยเปรียบเทียบกับระยะเวลาเก็บกักของมาตรฐานที่แท้จริง
ของ scoparone, scopoletin และ umbelliferone (Sigma-Aldrich)
และปริมาณโดยเปรียบเทียบพื้นที่สูงสุดโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐาน
สร้างขึ้นด้วยมาตรฐานการสอบเทียบแท้ตั้งแต่ 0.01 ที่จะจาก
1 มิลลิกรัม mL-1
การแปล กรุณารอสักครู่..
