Streptococcus infection of fishes h

Streptococcus infection of fishes has become a major problem affecting a variety of wild caught and cultured fish throughout the world. Lactococcus garvieae infection was the most serious disease affecting primarily farmed amberjack Seriola dumerili and yellowtail S. quinqueradiata in Japan. After the successful application of commercial formalin killed oral/injectable vaccines against L. garvieae [1], the economic damage caused by L. garvieae has been decreased. However, the vaccinated and unvaccinated farmed fishes exhibited comparable clinical signs of L. garvieae infection such as high mortality with severe necrotic lesions at their caudal peduncles [2] and [3]. The α-hemolytic Streptococcus dysgalactiae of Lancefield group C was identified as the causative agent of these epizootics [2]. Mortality was attributed to the lethal effects of severe bacterial septicemia and systemic granulomatous inflammatory disease [4].

S. dysgalactiae has been isolated from kingfish S. lalandi, yellowtail S. quinqueradiata and amberjack S. dumerili in Japan, cobia Rachycentron canadum, basket mullet Liza alata and gray mullet Mugil cephalus in Taiwan, golden pomfret Trachinotus ovatus, amur sturgeon Acipenser schrenckii, Siberian sturgeon Acipenser baerii, grass carp Ctenopharyngodon idella, crucian carp Carassius carassius, Soiny mullet L. haematocheila and pompano Trachinotus blochii in China, hybrid red tilapia Oreochromis sp. in Indonesia, white spotted snapper Lutjanus stellatus and pompano T. blochii in Malaysia, Nile tilapia O. niloticus in Brazil, and rainbow trout Oncorhynchus mykiss in Iran [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11] and [12]. Outside of the aquatic arena, S. dysgalactiae is considered as a main causative agent of bovine mastitis [13] and [14], ovine suppurative polyarthritis [15], bacteremia and ascending upper limb cellulitis in humans engaged in cleaning fish [16], [17] and [18]. Eventually, the growing numbers of reports involving the clinical/pathological implementations of S. dysgalactiae are highly suggestive of a critically expanding importance of such pathogen.

Despite its clinical importance, just a few studies involving the fish S. dysgalactiae have been published till now [8], [11], [19] and [20]. Thus, little information is available about the outbreaks and epidemiology of such pathogen in farmed fish. Molecular typing methods permit typing of strains of the same bacterial species that appear indistinguishable by conventional methods, such as antibiogram or serotyping. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) is considered as a gold standard typing method [21]. The bacterial whole genome is investigated by PFGE to assess genetic relationships among bacterial isolates. PFGE is useful in studying a short-term as well as a long-term epidemiological follow-up [21]. Biased sinusoidal field gel electrophoresis (BSFGE) is a modified PFGE [8]. Other molecular method, such as the sequencing of tuf gene has also been allowed the analysis of intraspecies sequence variations that reached up to 2.6% in streptococci [22].

The most prevalent molecular assays applied for genetic analysis of fish pathogen S. dysgalactiae are sequencing of housekeeping genes [5], [7], [8], [11], [20] and [23], PFGE and BSFGE profiles [2], [8] and [11]. In this study, BSFGE analysis of SmaI was employed to establish distinct genetic profiles for S. dysgalactiae strains collected from a variety of moribund fishes and geographical areas. In addition, the partial sequencing of tuf gene and the phylogeny of the obtained sequences were investigated to evaluate the applicability of these techniques in future epidemiological studies.

Material and methods
Bacterial isolates

Twenty clinical S. dysgalactiae isolates were used in the current study. All S. dysgalactiae isolates were isolated from lesions in the caudal peduncle or the kidney of moribund fishes. Geographic origin and fish species from which S. dysgalactiae isolates were retrieved are shown in Table 1. The reference strain S. dysgalactiae subsp. dysgalactiae ATCC43078 was included for comparative purpose.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Streptococcus infection of fishes has become a major problem affecting a variety of wild caught and cultured fish throughout the world. Lactococcus garvieae infection was the most serious disease affecting primarily farmed amberjack Seriola dumerili and yellowtail S. quinqueradiata in Japan. After the successful application of commercial formalin killed oral/injectable vaccines against L. garvieae [1], the economic damage caused by L. garvieae has been decreased. However, the vaccinated and unvaccinated farmed fishes exhibited comparable clinical signs of L. garvieae infection such as high mortality with severe necrotic lesions at their caudal peduncles [2] and [3]. The α-hemolytic Streptococcus dysgalactiae of Lancefield group C was identified as the causative agent of these epizootics [2]. Mortality was attributed to the lethal effects of severe bacterial septicemia and systemic granulomatous inflammatory disease [4].S. dysgalactiae has been isolated from kingfish S. lalandi, yellowtail S. quinqueradiata and amberjack S. dumerili in Japan, cobia Rachycentron canadum, basket mullet Liza alata and gray mullet Mugil cephalus in Taiwan, golden pomfret Trachinotus ovatus, amur sturgeon Acipenser schrenckii, Siberian sturgeon Acipenser baerii, grass carp Ctenopharyngodon idella, crucian carp Carassius carassius, Soiny mullet L. haematocheila and pompano Trachinotus blochii in China, hybrid red tilapia Oreochromis sp. in Indonesia, white spotted snapper Lutjanus stellatus and pompano T. blochii in Malaysia, Nile tilapia O. niloticus in Brazil, and rainbow trout Oncorhynchus mykiss in Iran [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11] and [12]. Outside of the aquatic arena, S. dysgalactiae is considered as a main causative agent of bovine mastitis [13] and [14], ovine suppurative polyarthritis [15], bacteremia and ascending upper limb cellulitis in humans engaged in cleaning fish [16], [17] and [18]. Eventually, the growing numbers of reports involving the clinical/pathological implementations of S. dysgalactiae are highly suggestive of a critically expanding importance of such pathogen.Despite its clinical importance, just a few studies involving the fish S. dysgalactiae have been published till now [8], [11], [19] and [20]. Thus, little information is available about the outbreaks and epidemiology of such pathogen in farmed fish. Molecular typing methods permit typing of strains of the same bacterial species that appear indistinguishable by conventional methods, such as antibiogram or serotyping. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) is considered as a gold standard typing method [21]. The bacterial whole genome is investigated by PFGE to assess genetic relationships among bacterial isolates. PFGE is useful in studying a short-term as well as a long-term epidemiological follow-up [21]. Biased sinusoidal field gel electrophoresis (BSFGE) is a modified PFGE [8]. Other molecular method, such as the sequencing of tuf gene has also been allowed the analysis of intraspecies sequence variations that reached up to 2.6% in streptococci [22].The most prevalent molecular assays applied for genetic analysis of fish pathogen S. dysgalactiae are sequencing of housekeeping genes [5], [7], [8], [11], [20] and [23], PFGE and BSFGE profiles [2], [8] and [11]. In this study, BSFGE analysis of SmaI was employed to establish distinct genetic profiles for S. dysgalactiae strains collected from a variety of moribund fishes and geographical areas. In addition, the partial sequencing of tuf gene and the phylogeny of the obtained sequences were investigated to evaluate the applicability of these techniques in future epidemiological studies.วัสดุและวิธีการแบคทีเรียที่แยกได้20 คลินิก S. dysgalactiae ที่แยกได้ถูกใช้ในการศึกษาปัจจุบัน ทั้งหมด S. dysgalactiae แยกถูกแยกต่างหากจากได้ caudal peduncle หรือไตปลา moribund ทางภูมิศาสตร์กำเนิดและปลาสายพันธุ์จาก S. ที่แยก dysgalactiae ถูกเรียกใช้จะแสดงในตารางที่ 1 การอ้างอิงต้องใช้ S. dysgalactiae ถั่ว dysgalactiae ATCC43078 ถูกรวมเพื่อเปรียบเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การติดเชื้อ Streptococcus ของปลาได้กลายเป็นปัญหาสำคัญที่ส่งผลกระทบต่อความหลากหลายของป่าจับและการเลี้ยงปลาทั่วโลก การติดเชื้อ Lactococcus garvieae เป็นโรคที่ร้ายแรงที่สุดที่มีผลต่อการทำไร่ไถนาหลัก amberjack ปลาสำลี dumerili และ yellowtail เอส quinqueradiata ในญี่ปุ่น หลังจากที่แอพลิเคชันที่ประสบความสำเร็จในเชิงพาณิชย์ของฟอร์มาลินฆ่าวัคซีนในช่องปาก / ลิตรฉีดกับ garvieae [1], ความเสียหายทางเศรษฐกิจที่เกิดจากแอล garvieae ได้รับลดลง อย่างไรก็ตามปลาทำไร่ไถนาและการฉีดวัคซีนวัคซีนแสดงอาการเดียวกันของแอล garvieae การติดเชื้อเช่นการตายสูงมีแผลฉีกรุนแรงที่ peduncles หางของพวกเขา [2] และ [3] dysgalactiae Streptococcus α-hemolytic ของ Lancefield กลุ่ม C ถูกระบุว่าเป็นสาเหตุของ epizootics เหล่านี้ [2] ตายเป็นผลมาจากผลกระทบของภาวะโลหิตเป็นพิษตายแบคทีเรียอย่างรุนแรงและระบบอักเสบโรค granulomatous [4]. เอส dysgalactiae ได้รับการแยกออกจากคิงฟิชเอส lalandi, yellowtail quinqueradiata เอสเอสและปลา amberjack dumerili ในญี่ปุ่น Rachycentron canadum ปลาช่อนทะเล, ตะกร้ากระบอก Liza ชุมเห็ดเทศและสีเทากระบอก Mugil cephalus ในไต้หวันทอง Pomfret Trachinotus ovatus ปลาสเตอร์เจียนอามูร์ Acipenser schrenckii ปลาสเตอร์เจียนไซบีเรีย Acipenser baerii, หญ้าปลาคาร์พ Ctenopharyngodon idella ปลาคาร์พ crucian Carassius Carassius, Soiny กระบอกลิตร haematocheila และปลาจาระเม็ด Trachinotus blochii ในประเทศจีน, สีแดงไฮบริดปลานิล Oreochromis SP ในประเทศอินโดนีเซียด่างขาวปลากะพง Lutjanus stellatus และปลาจาระเม็ด T. blochii ในประเทศมาเลเซีย, ปลานิลนิลทุมในบราซิลและเรนโบว์เทราท์ Oncorhynchus mykiss ในอิหร่าน [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] และ [12] ด้านนอกของสนามกีฬาทางน้ำ, เอส dysgalactiae ถือเป็นสาเหตุหลักของโรคเต้านมอักเสบวัว [13] และ [14], polyarthritis หนองแกะ [15], แบคทีเรียและเซลลูไลขึ้นแขนในมนุษย์มีส่วนร่วมในการทำความสะอาดปลา [16] [17] และ [18] ในที่สุดตัวเลขการเติบโตของรายงานที่เกี่ยวข้องกับการใช้งานทางคลินิก / พยาธิสภาพของเอส dysgalactiae เป็นอย่างสูงนัยของความสำคัญอย่างยิ่งการขยายตัวของเชื้อโรคดังกล่าว. แม้จะมีความสำคัญทางคลินิกเพียงไม่กี่ศึกษาเกี่ยวกับปลา dysgalactiae เอสที่ได้รับการตีพิมพ์จนถึงขณะนี้ [ 8] [11], [19] และ [20] ดังนั้นข้อมูลเล็ก ๆ น้อย ๆ ที่มีอยู่เกี่ยวกับการระบาดของโรคและการระบาดของเชื้อโรคดังกล่าวในการเพาะเลี้ยงปลา พิมพ์วิธีการอนุญาตให้มีการพิมพ์โมเลกุลของสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียชนิดเดียวกับที่ปรากฏแยกไม่ออกโดยวิธีการแบบเดิมเช่น antibiogram หรือ serotyping ข่าวคราวชีพจรสนาม (PFGE) ถือเป็นทองวิธีการพิมพ์มาตรฐาน [21] ทั้งจีโนมของเชื้อแบคทีเรียมีการตรวจสอบโดย PFGE เพื่อประเมินความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมของแบคทีเรีย PFGE จะเป็นประโยชน์ในการศึกษาในระยะสั้นเช่นเดียวกับทางระบาดวิทยาในระยะยาวติดตาม [21] สนามลำเอียงไซน์เจลอิ (BSFGE) เป็น PFGE การแก้ไข [8] วิธีโมเลกุลอื่น ๆ เช่นการจัดลำดับของยีน TUF ยังได้รับอนุญาตให้มีการวิเคราะห์ intraspecies รูปแบบลำดับที่สูงถึง 2.6% ใน streptococci [22]. ตรวจโมเลกุลที่แพร่หลายมากที่สุดนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์ทางพันธุกรรมของเชื้อโรคปลาเอส dysgalactiae เป็นลำดับ ของยีนดูแลทำความสะอาด [5] [7] [8] [11] [20] และ [23], PFGE และโปรไฟล์ BSFGE [2], [8] และ [11] ในการศึกษานี้วิเคราะห์ BSFGE ของสมัยถูกจ้างมาเพื่อสร้างรูปแบบทางพันธุกรรมที่แตกต่างกันสำหรับสายพันธุ์เอส dysgalactiae เก็บรวบรวมจากความหลากหลายของปลาตายและพื้นที่ทางภูมิศาสตร์ นอกจากนี้บางส่วนลำดับของยีน TUF และเชื้อชาติของลำดับได้ถูกตรวจสอบเพื่อประเมินผลการบังคับใช้เทคนิคเหล่านี้ในการศึกษาทางระบาดวิทยาในอนาคต. วัสดุและวิธีการแบคทีเรียที่แยกยี่สิบคลินิกเอสไอโซเลทdysgalactiae ถูกนำมาใช้ในการศึกษาในปัจจุบัน ทั้งหมดเอสไอโซเลท dysgalactiae ถูกแยกออกจากแผลในคอดหางหรือไตของปลาตาย ต้นกำเนิดทางภูมิศาสตร์และพันธุ์ปลาจากการที่เอไอโซเลท dysgalactiae ถูกดึงมาแสดงในตารางที่ 1 สายพันธุ์อ้างอิงเอส subsp dysgalactiae dysgalactiae ATCC43078 ถูกรวมเพื่อการเปรียบเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การติดเชื้อ Streptococcus ปลาได้กลายเป็นปัญหาสำคัญที่มีผลต่อความหลากหลายของป่าจับและเพาะเลี้ยงปลาทั่วโลก แลคโตค คัส garvieae คือการติดเชื้อโรคที่ร้ายแรงที่สุดที่มีผลต่อหลักที่มีอยู่และ dumerili เซริโ าปลาสำลีบุริ . quinqueradiata ในญี่ปุ่น หลังจากการประสบความสำเร็จของฟอร์มาลินพาณิชย์ฆ่าช่องปาก / ฉีดวัคซีนป้องกัน .garvieae [ 1 ] คาดว่า ความเสียหายที่เกิดขึ้น โดย garvieae ได้รับลดลง อย่างไรก็ตาม การฉีดวัคซีนและ unvaccinated farmed ปลาจัดแสดงเทียบเคียงคลินิกสัญญาณของ L . garvieae การติดเชื้อเช่นอัตราการตายสูงกับรอยโรคที่รุนแรงของ caudal ก้านดอก [ 2 ] และ [ 3 ]การ dysgalactiae hemolytic Streptococcus แอลฟาของแลนส์ฟิลด์ กลุ่มซี ที่ถูกระบุว่าเป็นเจ้าหน้าที่ของโรงเรียนเหล่านี้ epizootics [ 2 ] เมื่อประกอบกับผลกระทบร้ายแรงของแบคทีเรียที่พบในระบบที่รุนแรงและอักเสบ [ 4 ] .

. dysgalactiae ได้ถูกแยกจาก lalandi kingfish s , S และ S . dumerili บุริ quinqueradiata ปลาสำลีญี่ปุ่นปลาช่อนทะเล rachycentron canadum ตะกร้า ปลากระบอก ลิซ่า ชุมเห็ดเทศ และสีเทาปลากระบอกมูกิลเซฟฟลัสในไต้หวัน สีทอง trachinotus ovatus Pomfret , ปลาสเตอร์เจียน acipenser schrenckii ปลาสเตอร์เจียนไซบีเรียอามูร์ , acipenser baerii หญ้าปลาคาร์พปลาคาร์พ ctenopharyngodon idella crucian ทางเดินอาหาร , ทางเดินอาหาร , L และ soiny ปลากระบอก haematocheila Pompano trachinotus blochii ในประเทศจีน , ไฮบริด , ปลานิลสีแดง Oreochromis sp . ในอินโดนีเซียปลากระพงขาวด่างและปลากะพงแดง stellatus ช ต. blochii ในประเทศมาเลเซีย , ปลานิล . niloticus ในบราซิลและปลาเทราท์คอรินชัส mykiss ในอิหร่าน [ 5 ] [ 6 ] [ 7 ] , [ 8 ] , [ 9 ] , [ 10 ] [ 11 ] และ [ 12 ] ด้านนอกของสนามกีฬาทางน้ำ เอส dysgalactiae ถือว่าเป็นตัวแทนที่เป็นสาเหตุหลักของโรคเต้านมอักเสบในวัว [ 13 ] และ [ 14 ] ovine เป็นหนอง polyarthritis [ 15 ]อาการขึ้นแขนและโรคผิวหนังในคนร่วมในการทำความสะอาดปลา [ 16 ] [ 17 ] และ [ 18 ] ในที่สุด ตัวเลขการเติบโตของรายงานที่เกี่ยวข้องกับการใช้งานทางคลินิก / พยาธิ S . dysgalactiae ขอข้อเสนอแนะของการขยายความความสำคัญ เช่น เชื้อโรค

แม้จะมีคลินิกที่สำคัญเพียงไม่กี่การศึกษาที่เกี่ยวข้องกับปลา .dysgalactiae ได้รับการเผยแพร่จนถึงปัจจุบัน [ 8 ] , [ 11 ] , [ 19 ] และ [ 20 ] ดังนั้น ข้อมูลเล็ก ๆน้อย ๆสามารถใช้ได้เกี่ยวกับการระบาดและระบาดวิทยา เช่น เชื้อโรคในฟาร์มปลา โมเลกุลวิธีอนุญาตให้พิมพ์พิมพ์ของสายพันธุ์ของแบคทีเรียชนิดเดียวกันที่ปรากฏแยกโดยวิธีปกติ เช่น antibiogram หรือการสำรวจ .พัลฟิลด์ gel electrophoresis ( PFGE ) ถือว่าเป็นมาตรฐานทองคำพิมพ์วิธี [ 21 ] จีโนมทั้งหมดของตรวจสอบโดย PFGE เพื่อประเมินความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมของเชื้อที่แยกได้ . PFGE เป็นประโยชน์ในการเรียนระยะสั้น รวมทั้งการติดตามและระยะยาว [ 21 ] ลำเอียงไซน์ฟิลด์ gel electrophoresis ( bsfge ) เป็นการดัดแปลง PFGE [ 8 ] วิธีโมเลกุลอื่น ๆเช่น การหาลำดับเบสของยีน โดยได้รับอนุญาตจากการวิเคราะห์ intraspecies ลำดับการเปลี่ยนแปลงที่ถึงถึง 2.6% ในเชื้อ [ 22 ] .

ที่แพร่หลายมากที่สุดของวิธีประยุกต์สำหรับการวิเคราะห์ทางพันธุกรรมของเชื้อ S . dysgalactiae ปลาเป็นลำดับยีนของแม่บ้าน [ 5 ] , [ 7 ] , [ 8 ] , [ 11 ] [ 20 ] และ [ 23 ] และ [ 2 ] bsfge PFGE รูปแบบ [ 8 ] และ [ 11 ] ในการศึกษานี้การวิเคราะห์การใช้ bsfge ถูกนำมาใช้สร้างโปรไฟล์ที่แตกต่างกันทางพันธุกรรมสำหรับ s dysgalactiae สายพันธุ์ที่รวบรวมจากความหลากหลายของปลาที่ใกล้จะสูญพันธุ์ และพื้นที่ทางภูมิศาสตร์ นอกจากนี้ บางส่วนของยีนโดยลำดับและระบบเชื้อชาติของได้ดังนี้ คือ เพื่อประเมินการประยุกต์ใช้เทคนิคเหล่านี้ในอนาคตการศึกษาระบาดวิทยา


วัสดุและวิธีการแบคทีเรียไอโซเลท

20 คลินิก . dysgalactiae ไอโซเลทที่ใช้ในการศึกษา . ทั้งหมด dysgalactiae ไอโซเลทที่แยกได้จากรอยโรคในก้านหาง หรือ ไตของสิงโตปลา ภูมิศาสตร์ของประเทศ และพันธุ์ปลาที่เอส dysgalactiae ไอโซเลทได้แสดงในตารางที่ 1 สายพันธุ์อ้างอิง . dysgalactiae subsp .dysgalactiae atcc43078 ถูกรวมเพื่อเปรียบเทียบ