The rice protoplast pellet was resu

The rice protoplast pellet was resuspended in lysis buffer
(100 mM Tris–HCl, pH 8.0, 150 mM NaCl, 5 mM EGTA, 5 mM EDTA,
10 mM DTT, and 0.5% [v/v] Triton X-100). Proteins were separated
by 10% SDS–PAGE and transferred onto a PVDF membrane
(Bio-Rad, Hercules, CA, USA). Primary antibodies were used at the
following dilutions: anti-GFP 1:2000; anti-ORFH79 1:3000.
Secondary antibody goat anti-mouse IgG was used at a 1:2000
dilution. Signals were visualized by chemiluminescence (Bio-Rad).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เม็ด protoplast ข้าวถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ lysis(100 มม.ตรี – HCl ค่า pH 8.0, NaCl, EGTA, EDTA, 5 มม. 5 มม. 150 มม.10 มม. DTT ก 0.5% [v/v] ไตรตั้น X 100) มีแยกโปรตีนโดย 10% SDS – หน้า และโอนย้ายไปเมมเบรน PVDF(ไบโอ-Rad เฮอร์คิวลิส CA, USA) แอนตี้หลักที่ใช้ในการต่อ dilutions: GFP ป้องกัน 1:2000 ต่อต้าน-ORFH79 1:3000ใช้แอนติบอดีที่รองเมาส์ป้องกันแพะ IgG ที่เป็น 1:2000เจือจาง สัญญาณมี visualized โดย chemiluminescence (ไบ-Rad)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เม็ดข้าวโปรโตพลาถูก resuspended ในบัฟเฟอร์สลาย
(100 มิลลิ Tris-HCl พีเอช 8.0, 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 5 มิลลิ EGTA 5 มิลลิ EDTA,
10 มม DTT และ 0.5% [v / v] Triton X-100) โปรตีนที่ถูกแยกออก
โดย 10% SDS-PAGE และโอนไปยังเมมเบรน PVDF
(Bio-Rad, Hercules, CA, USA) แอนติบอดีหลักที่ถูกนำมาใช้
เจือจางต่อไปนี้: Anti-GFP 1: 2000; ต่อต้าน ORFH79 1. 3000
แพะแอนติบอดีรอง IgG ต่อต้านเมาส์ถูกนำมาใช้ที่ 1: 2000
การลดสัดส่วน สัญญาณที่ถูกมองเห็นโดย chemiluminescence (Bio-Rad)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ข้าวเม็ดเป็นโปร resuspended ในการสลายบัฟเฟอร์
( 100 มม. นอกจากนี้ – HCl , pH 8.0 , 150 mM NaCl , 5 มม. หน่วย , 5 mM EDTA ,
10 - 20 และ 0.5 % [ 5 / 5 ] Triton X-100 ) โปรตีนแยก
10% SDS - หน้า และโอนไปยัง
เมมเบรน PVDF ( ไบโอ ราด , Hercules , CA , USA ) การใช้แอนติบอดีที่
ต่อไปนี้วิธีการต้าน GFP 1:2000 ; anti-orfh79
1:3000 .ระดับแอนติบอดี IgG anti แพะเมาส์ใช้ใน 1:2000
เจือจาง สัญญาณถูกมองเห็นโดยเคมีลูมิเนสเซนต์ ( ไบโอ ราด )