- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
The shade dried plant material (2 k
The shade dried plant material (2 kg) was powdered and
extracted with hexane in a Soxhlet apparatus for 24 h. The solvent
was evaporated under reduced pressure in a rotary flash
evaporator to obtain a residue (20 g). The residue was adsorbed
on silica gel and subjected to column chromatography over silica
gel (100 cm×40 mm, diametre). The column was subjected
to elution with hexane first followed by mixture containing
increasing amounts of acetone. The fractions eluted at 2%
(1.5 L), 4% (3.75 L), 6% (1.5 L) and 10% (3.0 L) were collected
separately and concentrated to obtain residues A (0.310 g), B
(13.10 g), C (0.645 g) and D (4.72 g). The residue A (0.31 g) was
loaded on a silica gel column (60–120 mesh, 50 cm×10 mm,
diametre) and eluted with 2% ethylacetate in hexane to obtain
compound 1 (0.20 g). The residue B (13.10 g) was loaded on
a silica gel column (60–120 mesh, 100 cm×25 mm, diametre)
and eluted with 3% ethylacetate in hexane to obtain compound
2 (12.0 g). The residue C (0.645 g) was loaded on a silica gel
column (60–120 mesh, 30 cm×10 mm, diametre) and eluted
with 5% ethylacetate in hexane to obtain compound 3 (0.490 g).
The residue D (4.72 g) was loaded on a silica gel column
(60–120 mesh, 60 cm×20 mm, diametre) and eluted with 6%
ethylacetate in hexane to obtain compound 4 (3.50 g). On completion
of the hexane extraction, the powdered plant materialwas
extracted with chloroform to obtain 100 g of residue. The extract
was dissolved in a 1:1 mixture of chloroform and methanol.
The residue was adsorbed on silica gel and subjected to column
chromatography over silica gel (60–120 mesh, 150 cm×40 cm,
diametre). The column was subjected to elution with hexane
first followed by increasing polarities of hexane/acetone. The
fractions eluted at 15% (4.5 L), 30% (2.75 L), 40% (1.5 L)
and 50% (5.0 L) were collected separately and concentrated
to obtain residues E (15.90 g), F (6.25 g), G (0.78 g) and H
(23.0 g). The residue E (15.90 g) was loaded on a silica gel column
(60–120 mesh, 100 cm×35 mm, diametre) and eluted with
10% ethylacetate in hexane to obtain compound 5 (0.80 g), elution
with 12% ethylacetate afforded compound 6 (6.0 g) and
elution with 15% afforded compound 7 (7.0 g). The residue
F (6.25 g) was loaded on a silica gel column (60–120 mesh,
50 cm×20 mm, diametre) and eluted with 15% ethylacetate in
hexane to obtain compound 8 (2.0 g) and compound 9 (1.5 g).
Further elution of the column with 17% ethylacetate afforded
compound 10 (0.50 g). The residue G (0.78 g) was loaded on
a silica gel column (60–120 mesh, 30 cm×15 mm, diametre)
and eluted with 18% ethylacetate in hexane to obtain compound
11 (0.295 g). Further elution of the column with 22% ethylacetate
led to the isolation of compound 12 (0.185). The residue
H (23.0 g) was loaded on a silica gel column (60–120 mesh,
150 cm×40 mm, diametre) and eluted with 25% ethylacetate
in hexane to obtain compound 13 (20.0 g). Further elution of the
column with 35% afforded compound 14 (0.245 g).
in DMSO (5 mg/mL solution) were mixed and incubated with
50L of enzyme in a 96-well microplate for 5 min. Reaction
mixture was further incubated for another 10 min with 50 L
substrate [5 mM, p-nitrophenyl--d-glucopyranoside, prepared
in 100mM phosphate buffer (pH 6.8)] and release of nitrophenol
was read at 405 nm spectrophotometrically (SPECTRAMAX
PLUS384, Molecular Devices, USA). Percent -glucosidase
inhibition was calculated as (1-B/A) ×100, where A was the
absorbance of reactants without test compound and B was
the absorbance of reactants with test samples. All the samples
were run in triplicate and acarbose was taken as standard
reference compound. Several dilutions of primary solution
(5 mg/mL DMSO) were made and assayed accordingly to
obtain concentration of the test sample required to inhibit
50% activity (IC50) of the enzyme applying suitable regression
analysis.
extracted with hexane in a Soxhlet apparatus for 24 h. The solvent
was evaporated under reduced pressure in a rotary flash
evaporator to obtain a residue (20 g). The residue was adsorbed
on silica gel and subjected to column chromatography over silica
gel (100 cm×40 mm, diametre). The column was subjected
to elution with hexane first followed by mixture containing
increasing amounts of acetone. The fractions eluted at 2%
(1.5 L), 4% (3.75 L), 6% (1.5 L) and 10% (3.0 L) were collected
separately and concentrated to obtain residues A (0.310 g), B
(13.10 g), C (0.645 g) and D (4.72 g). The residue A (0.31 g) was
loaded on a silica gel column (60–120 mesh, 50 cm×10 mm,
diametre) and eluted with 2% ethylacetate in hexane to obtain
compound 1 (0.20 g). The residue B (13.10 g) was loaded on
a silica gel column (60–120 mesh, 100 cm×25 mm, diametre)
and eluted with 3% ethylacetate in hexane to obtain compound
2 (12.0 g). The residue C (0.645 g) was loaded on a silica gel
column (60–120 mesh, 30 cm×10 mm, diametre) and eluted
with 5% ethylacetate in hexane to obtain compound 3 (0.490 g).
The residue D (4.72 g) was loaded on a silica gel column
(60–120 mesh, 60 cm×20 mm, diametre) and eluted with 6%
ethylacetate in hexane to obtain compound 4 (3.50 g). On completion
of the hexane extraction, the powdered plant materialwas
extracted with chloroform to obtain 100 g of residue. The extract
was dissolved in a 1:1 mixture of chloroform and methanol.
The residue was adsorbed on silica gel and subjected to column
chromatography over silica gel (60–120 mesh, 150 cm×40 cm,
diametre). The column was subjected to elution with hexane
first followed by increasing polarities of hexane/acetone. The
fractions eluted at 15% (4.5 L), 30% (2.75 L), 40% (1.5 L)
and 50% (5.0 L) were collected separately and concentrated
to obtain residues E (15.90 g), F (6.25 g), G (0.78 g) and H
(23.0 g). The residue E (15.90 g) was loaded on a silica gel column
(60–120 mesh, 100 cm×35 mm, diametre) and eluted with
10% ethylacetate in hexane to obtain compound 5 (0.80 g), elution
with 12% ethylacetate afforded compound 6 (6.0 g) and
elution with 15% afforded compound 7 (7.0 g). The residue
F (6.25 g) was loaded on a silica gel column (60–120 mesh,
50 cm×20 mm, diametre) and eluted with 15% ethylacetate in
hexane to obtain compound 8 (2.0 g) and compound 9 (1.5 g).
Further elution of the column with 17% ethylacetate afforded
compound 10 (0.50 g). The residue G (0.78 g) was loaded on
a silica gel column (60–120 mesh, 30 cm×15 mm, diametre)
and eluted with 18% ethylacetate in hexane to obtain compound
11 (0.295 g). Further elution of the column with 22% ethylacetate
led to the isolation of compound 12 (0.185). The residue
H (23.0 g) was loaded on a silica gel column (60–120 mesh,
150 cm×40 mm, diametre) and eluted with 25% ethylacetate
in hexane to obtain compound 13 (20.0 g). Further elution of the
column with 35% afforded compound 14 (0.245 g).
in DMSO (5 mg/mL solution) were mixed and incubated with
50L of enzyme in a 96-well microplate for 5 min. Reaction
mixture was further incubated for another 10 min with 50 L
substrate [5 mM, p-nitrophenyl--d-glucopyranoside, prepared
in 100mM phosphate buffer (pH 6.8)] and release of nitrophenol
was read at 405 nm spectrophotometrically (SPECTRAMAX
PLUS384, Molecular Devices, USA). Percent -glucosidase
inhibition was calculated as (1-B/A) ×100, where A was the
absorbance of reactants without test compound and B was
the absorbance of reactants with test samples. All the samples
were run in triplicate and acarbose was taken as standard
reference compound. Several dilutions of primary solution
(5 mg/mL DMSO) were made and assayed accordingly to
obtain concentration of the test sample required to inhibit
50% activity (IC50) of the enzyme applying suitable regression
analysis.
0/5000
สีที่มีผงวัสดุพืชแห้ง (2 กิโลกรัม) และสกัด ด้วยเฮกเซนในเครื่อง Soxhlet ใน 24 ชม ตัวทำละลายไม่หายไปภายใต้ความดันที่ลดลงในแฟลชโรตารี่evaporator รับสารตกค้าง (20 กรัม) สารตกค้างถูก adsorbedบนซิลิกาเจ และภายใต้คอลัมน์ chromatography กว่าซิลิกาเจล (100 cm × 40 mm, diametre) คอลัมน์ถูกต้องการ elution ด้วยเฮกเซนก่อน ตาม ด้วยส่วนผสมที่ประกอบด้วยยอดเงินที่เพิ่มขึ้นของอะซิโตน ส่วน eluted ที่ 2%(1.5 L), เก็บ (3.75 ลิตร) 4%, 6% (1.5 L) และ 10% (3.0 ลิตร)แยกต่างหาก และเข้มข้นที่สามารถตกได้ (0.310 กรัม), B(13.10 กรัม), C (0.645 กรัม) และ D (4.72 กรัม) มีสารตกค้าง (0.31 g)โหลดบนคอลัมน์ซิลิก้าเจล (60 – 120 ตาข่าย 50 ซม. × 10 มม.diametre) และ eluted กับ ethylacetate 2% ในเฮกเซนจะได้รับผสม 1 (0.20 กรัม) สารตกค้าง B (13.10 g) ถูกโหลดในซิลิก้าเจลคอลัมน์ (60 – 120 ตาข่าย 100 เซนติเมตร × 25 mm, diametre)และ eluted กับ ethylacetate 3% ในเฮกเซนรับผสม(12.0 กรัม) 2 สารตกค้าง C (0.645 g) ถูกโหลดในซิลิก้าเจลคอลัมน์ (60 – 120 ตาข่าย 30 ซม. × 10 มม. diametre) และ eluted5% ethylacetate ในเฮกเซนรับผสม 3 (0.490 กรัม)สารตกค้าง D (4.72 g) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิก้าเจล(60 – 120 ตาข่าย 60 ซม. × 20 มม. diametre) และ eluted 6%ethylacetate ในเฮกเซนรับผสม 4 (3.50 กรัม) เมื่อเสร็จสมบูรณ์เฮกเซนสกัด materialwas พืชผงสกัด ด้วยคลอโรฟอร์มได้ 100 กรัมของสารตกค้าง การดึงข้อมูลถูกละลายในส่วนผสม 1:1 ของคลอโรฟอร์มและเมทานอลสารตกค้างใน adsorbed บนซิลิก้าเจล และการคอลัมน์chromatography ผ่านซิลิก้าเจล (60 – 120 ตาข่าย 150 cm × 40 ซม.diametre) คอลัมน์ถูกยัดเยียดให้ elution ด้วยเฮกเซนก่อน ตาม ด้วยการเพิ่มขั้วของเฮกเซน/อะซิโตน ที่ส่วนที่ eluted ที่ (4.5 ลิตร) 15%, 30% (2.75 L) 40% (1.5 L)และ 50% (5.0 L) ถูกเก็บแยกต่างหาก และเข้มข้นรับตกอี (15.90 กรัม), F (6.25 กรัม), G (0.78 กรัม) และ H(23.0 กรัม) สารตกค้างอี (15.90 g) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิก้าเจล(60 – 120 ตาข่าย 100 เซนติเมตร × 35 mm, diametre) และ eluted ด้วย10% ethylacetate ในเฮกเซนรับผสม 5 (0.80 กรัม), elution12% ethylacetate นี่ผสม 6 (6.0 กรัม) และelution 15% นี่ผสม 7 (7.0 กรัม) สารตกค้างF (6.25 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิก้าเจล (60 – 120 ตาข่าย50 ซม. × 20 มม. diametre) และ eluted กับ ethylacetate 15% ในเฮกเซนรับผสม 8 (2.0 g) และผสม 9 (1.5 กรัม)Elution เพิ่มเติมของคอลัมน์กับ ethylacetate 17% ที่นี่ผสม 10 (0.50 กรัม) สารตกค้าง G (0.78 กรัม) ถูกโหลดในซิลิก้าเจลคอลัมน์ (60 – 120 ตาข่าย 30 ซม. × 15 mm, diametre)และ eluted กับ ethylacetate 18% ในเฮกเซนรับผสม11 (0.295 กรัม) Elution เพิ่มเติมของคอลัมน์กับ ethylacetate 22%นำไปสู่การแยกของผสม 12 (0.185) สารตกค้างH (23.0 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิก้าเจล (60 – 120 ตาข่าย150 ซม. × 40 mm, diametre) และ eluted กับ ethylacetate 25%ในเฮกเซนรับผสม 13 (20.0 กรัม) Elution เพิ่มเติมของการคอลัมน์ที่ มี 35% นี่ผสม 14 (0.245 กรัม)ใน DMSO (โซลูชัน 5 mg/mL) ผสม และ incubated ด้วยเอนไซม์ใน microplate 96-ดีสำหรับ 5 นาทีปฏิกิริยา 50 Lส่วนผสมเพิ่มเติมเป็น incubated ในอีก 10 นาทีกับ 50 Lพื้นผิว [5 มม p-nitrophenyl--d-glucopyranoside เตรียมใน 100 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.8)] และปล่อย nitrophenolถูกอ่านที่ 405 nm spectrophotometrically (SPECTRAMAXPLUS384 อุปกรณ์โมเลกุล สหรัฐอเมริกา) -Glucosidase เปอร์เซ็นต์คำนวณเป็น (1-B/A) × 100 การที่ A ถูกยับยั้งการabsorbance reactants โดยทดสอบสารประกอบและ B ถูกabsorbance ของ reactants ด้วยตัวอย่างทดสอบ ตัวอย่างทั้งหมดถูกเรียกใช้ใน triplicate และ acarbose ถูกนำมาเป็นมาตรฐานการอ้างอิงผสม Dilutions หลายของหลัก(5 mg/mL DMSO) ทำ และ assayed ตามไปได้รับความเข้มข้นของตัวอย่างทดสอบต้องยับยั้งกิจกรรม 50% (IC50) ของเอนไซม์ที่ใช้เหมาะสมถดถอยวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..
สีวัสดุจากพืชแห้ง (2 กิโลกรัม)
ได้รับผงและสกัดด้วยเฮกเซนในอุปกรณ์วิธีการสกัดแบบเวลา24 ชั่วโมง ตัวทำละลายระเหยภายใต้ความกดดันที่ลดลงในแฟลชหมุนระเหยที่จะได้รับสารตกค้าง(20 กรัม) ที่เหลือถูกดูดซับบนซิลิกาเจลและภายใต้คอลัมน์มากกว่าซิลิกาเจล(100 ซม. × 40 มม diametre) คอลัมน์ถูกยัดเยียดไปด้วยเฮกเซนชะก่อนตามด้วยส่วนผสมที่มีจำนวนเพิ่มมากขึ้นของอะซีโตน เศษส่วนชะที่ 2% (1.5 ลิตร), 4% (3.75 ลิตร), 6% (1.5 ลิตร) และ 10% (3.0 ลิตร) ถูกเก็บแยกจากกันและมีความเข้มข้นที่จะได้รับสารตกค้างA (0.310 กรัม), B (13.10 กรัม) , C (0.645 กรัม) และ D (4.72 กรัม) ที่เหลือ A (0.31 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 50 ซม. x 10 มมdiametre) และชะกับ ethylacetate 2% ในเฮกเซนที่จะได้รับสารที่1 (0.20 กรัม) ที่เหลือ B (13.10 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 100 ซม. × 25 มม diametre) และชะกับ ethylacetate 3% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร2 (12.0 กรัม) ที่เหลือ C (0.645 กรัม) ถูกโหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์(60-120 ตาข่าย 30 ซม. x 10 มม diametre) และชะกับethylacetate 5% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 3 (0.490 กรัม). ที่เหลือ D (4.72 ช) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 60 ซม× 20 มม diametre) และชะด้วย 6% ethylacetate ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 4 (3.50 กรัม) เมื่อเสร็จสิ้นการสกัดเฮกเซนที่โรงงาน materialwas ผงสกัดด้วยคลอโรฟอร์มที่จะได้รับ100 กรัมของสารตกค้าง สารสกัดถูกละลายใน 1: 1. ส่วนผสมของคลอโรฟอร์มและเมทานอลที่เหลือถูกดูดซับบนซิลิกาเจลและภายใต้คอลัมน์โครมาโตกว่าซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 150 เซนติเมตร× 40 ซม, diametre) คอลัมน์ถูกยัดเยียดให้กับเฮกเซนชะก่อนตามด้วยการเพิ่มขั้วของเฮกเซน / อะซิโตน เศษส่วนชะที่ 15% (4.5 ลิตร), 30% (2.75 ลิตร) 40% (1.5 ลิตร) และ 50% (5.0 ลิตร) ถูกเก็บแยกจากกันและมีความเข้มข้นที่จะได้รับสารตกค้างอี(15.90 กรัม) F (6.25 กรัม) จี (0.78 กรัม) และ H (23.0 กรัม) ที่เหลืออี (15.90 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 100 ซม. × 35 มม diametre) และชะกับethylacetate 10% ในเฮกเซนที่จะได้รับสารที่ 5 (0.80 กรัม) elution กับ 12% ethylacetate สารประกอบอึด 6 (6.0 กรัม) และelution กับ 15% อึดสารประกอบ 7 (7.0 กรัม) ที่เหลือF (6.25 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล (60-120 ตาข่าย50 ซม× 20 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 15% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร8 (2.0 กรัม) และสารประกอบ 9 (1.5 กรัม ). ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 17% ethylacetate อึดสารประกอบ10 (0.50 กรัม) ที่เหลือ G (0.78 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 30 ซม× 15 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 18% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร11 (0.295 กรัม) ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 22% ethylacetate นำไปสู่การแยกสารประกอบ 12 (0.185) ที่เหลือH (23.0 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล (60-120 ตาข่าย150 เซนติเมตร× 40 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 25% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 13 (20.0 กรัม) ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 35% อึดสารประกอบ 14 (0.245 กรัม). ใน DMSO (5 mg / แก้ปัญหามิลลิลิตร) ถูกผสมและบ่มกับ50 ลิตรเอนไซม์ใน microplate 96 หลุมเป็นเวลา 5 นาที ปฏิกิริยาส่วนผสมถูกบ่มต่อไปอีก 10 นาทีกับ 50 L? ตั้งต้น [5 มิลลิ, p-Nitrophenyl - - D-glucopyranoside เตรียมในฟอสเฟตบัฟเฟอร์100mm (pH 6.8)] และปล่อยของ nitrophenol อ่านที่ 405 นาโนเมตร spectrophotometrically (SPECTRAMAX PLUS384 โมเลกุลอุปกรณ์ USA) ร้อยละ? -glucosidase ยับยั้งที่คำนวณได้เป็น (1-B / A) × 100 โดยที่ A คือการดูดกลืนแสงของสารตั้งต้นโดยไม่ต้องสารทดสอบและB คือการดูดกลืนแสงของสารตั้งต้นที่มีตัวอย่างทดสอบ ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ acarbose ถูกนำมาเป็นมาตรฐานสารอ้างอิง เจือจางหลายหลักของการแก้ปัญหา(5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร DMSO) ที่ถูกสร้างขึ้นและ assayed ตามให้ได้ความเข้มข้นของตัวอย่างการทดสอบที่จำเป็นในการยับยั้งกิจกรรม50% (IC50) ของเอนไซม์ที่ใช้การถดถอยที่เหมาะสมในการวิเคราะห์
ได้รับผงและสกัดด้วยเฮกเซนในอุปกรณ์วิธีการสกัดแบบเวลา24 ชั่วโมง ตัวทำละลายระเหยภายใต้ความกดดันที่ลดลงในแฟลชหมุนระเหยที่จะได้รับสารตกค้าง(20 กรัม) ที่เหลือถูกดูดซับบนซิลิกาเจลและภายใต้คอลัมน์มากกว่าซิลิกาเจล(100 ซม. × 40 มม diametre) คอลัมน์ถูกยัดเยียดไปด้วยเฮกเซนชะก่อนตามด้วยส่วนผสมที่มีจำนวนเพิ่มมากขึ้นของอะซีโตน เศษส่วนชะที่ 2% (1.5 ลิตร), 4% (3.75 ลิตร), 6% (1.5 ลิตร) และ 10% (3.0 ลิตร) ถูกเก็บแยกจากกันและมีความเข้มข้นที่จะได้รับสารตกค้างA (0.310 กรัม), B (13.10 กรัม) , C (0.645 กรัม) และ D (4.72 กรัม) ที่เหลือ A (0.31 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 50 ซม. x 10 มมdiametre) และชะกับ ethylacetate 2% ในเฮกเซนที่จะได้รับสารที่1 (0.20 กรัม) ที่เหลือ B (13.10 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 100 ซม. × 25 มม diametre) และชะกับ ethylacetate 3% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร2 (12.0 กรัม) ที่เหลือ C (0.645 กรัม) ถูกโหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์(60-120 ตาข่าย 30 ซม. x 10 มม diametre) และชะกับethylacetate 5% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 3 (0.490 กรัม). ที่เหลือ D (4.72 ช) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 60 ซม× 20 มม diametre) และชะด้วย 6% ethylacetate ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 4 (3.50 กรัม) เมื่อเสร็จสิ้นการสกัดเฮกเซนที่โรงงาน materialwas ผงสกัดด้วยคลอโรฟอร์มที่จะได้รับ100 กรัมของสารตกค้าง สารสกัดถูกละลายใน 1: 1. ส่วนผสมของคลอโรฟอร์มและเมทานอลที่เหลือถูกดูดซับบนซิลิกาเจลและภายใต้คอลัมน์โครมาโตกว่าซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 150 เซนติเมตร× 40 ซม, diametre) คอลัมน์ถูกยัดเยียดให้กับเฮกเซนชะก่อนตามด้วยการเพิ่มขั้วของเฮกเซน / อะซิโตน เศษส่วนชะที่ 15% (4.5 ลิตร), 30% (2.75 ลิตร) 40% (1.5 ลิตร) และ 50% (5.0 ลิตร) ถูกเก็บแยกจากกันและมีความเข้มข้นที่จะได้รับสารตกค้างอี(15.90 กรัม) F (6.25 กรัม) จี (0.78 กรัม) และ H (23.0 กรัม) ที่เหลืออี (15.90 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 100 ซม. × 35 มม diametre) และชะกับethylacetate 10% ในเฮกเซนที่จะได้รับสารที่ 5 (0.80 กรัม) elution กับ 12% ethylacetate สารประกอบอึด 6 (6.0 กรัม) และelution กับ 15% อึดสารประกอบ 7 (7.0 กรัม) ที่เหลือF (6.25 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล (60-120 ตาข่าย50 ซม× 20 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 15% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร8 (2.0 กรัม) และสารประกอบ 9 (1.5 กรัม ). ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 17% ethylacetate อึดสารประกอบ10 (0.50 กรัม) ที่เหลือ G (0.78 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล(60-120 ตาข่าย 30 ซม× 15 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 18% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร11 (0.295 กรัม) ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 22% ethylacetate นำไปสู่การแยกสารประกอบ 12 (0.185) ที่เหลือH (23.0 กรัม) ถูกโหลดในคอลัมน์ซิลิกาเจล (60-120 ตาข่าย150 เซนติเมตร× 40 มม diametre) และชะ ethylacetate กับ 25% ในเฮกเซนที่จะได้รับสาร 13 (20.0 กรัม) ชะต่อไปของคอลัมน์ที่มี 35% อึดสารประกอบ 14 (0.245 กรัม). ใน DMSO (5 mg / แก้ปัญหามิลลิลิตร) ถูกผสมและบ่มกับ50 ลิตรเอนไซม์ใน microplate 96 หลุมเป็นเวลา 5 นาที ปฏิกิริยาส่วนผสมถูกบ่มต่อไปอีก 10 นาทีกับ 50 L? ตั้งต้น [5 มิลลิ, p-Nitrophenyl - - D-glucopyranoside เตรียมในฟอสเฟตบัฟเฟอร์100mm (pH 6.8)] และปล่อยของ nitrophenol อ่านที่ 405 นาโนเมตร spectrophotometrically (SPECTRAMAX PLUS384 โมเลกุลอุปกรณ์ USA) ร้อยละ? -glucosidase ยับยั้งที่คำนวณได้เป็น (1-B / A) × 100 โดยที่ A คือการดูดกลืนแสงของสารตั้งต้นโดยไม่ต้องสารทดสอบและB คือการดูดกลืนแสงของสารตั้งต้นที่มีตัวอย่างทดสอบ ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ acarbose ถูกนำมาเป็นมาตรฐานสารอ้างอิง เจือจางหลายหลักของการแก้ปัญหา(5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร DMSO) ที่ถูกสร้างขึ้นและ assayed ตามให้ได้ความเข้มข้นของตัวอย่างการทดสอบที่จำเป็นในการยับยั้งกิจกรรม50% (IC50) ของเอนไซม์ที่ใช้การถดถอยที่เหมาะสมในการวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..
สีวัสดุพืชแห้ง 2 กก. ) และผงสกัดด้วยเฮกเซนใน 1
-
เป็น 24 ชั่วโมง ตัวทำละลายระเหยภายใต้การลดความดันในเครื่องระเหยแบบหมุนเพื่อรับแฟลช
กาก ( 20 กรัม ) ตกค้างที่ดูดซับบนซิลิกาเจล และต้อง
( ซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโทกราฟี กว่า 100 ซม. มม. × 40 diametre ) คอลัมน์ที่ถูกยัดเยียด
เพื่อใช้กับน้ำก่อนตามด้วยส่วนผสมที่ประกอบด้วย
ปริมาณที่เพิ่มขึ้นของอะซิโตน เศษส่วนตัวอย่างที่ 2 %
( 1.5 ลิตร ) 4 % ( 3.75 ลิตร ) , 6% ( 1.5 ลิตร ) และ 10% ( 3.0 ลิตร ) ถูกเก็บแยกจากกัน และเข้มข้น เพื่อขอรับ
ตกค้าง ( 0.310 g ) b ,
( 13.10 G ) C ( 0.645 g ) D ( 4.72 กรัม ) กาก ( 0.31 g )
โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์ ( 60 - 120 ตาข่าย 50 × 10
มิลลิเมตรdiametre ) และตัวอย่างที่มีสาร 2 % ในเฮกเซนขอรับ
สารประกอบ 1 ( 0.20 กรัม ) ส่วน B ( 13.10 g )
โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์ ( 60 - 120 ตาข่าย 100 cm × 25 มิลลิเมตร และ diametre )
ตัวอย่างกับสาร 3 % ในเฮกเซนที่ได้รับสาร
2 ( 12.0 กรัม ) ส่วน C ( 0.645 g ) โหลดบนซิลิกาเจล
คอลัมน์ ( 60 – 120 ตาข่าย , 30 cm × 10 มม. diametre ) และตัวอย่าง
กับสาร 5% ในเฮกเซนที่ได้รับสาร 3 ( 0.490 g )
กาก D ( 4.72 g ) โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์
( 60 - 120 ตาข่าย 60 cm × 20 มม. diametre ) และตัวอย่างที่มีสาร 6 %
ในเฮกเซนที่ได้รับสาร 4 ( 3.50 กรัม ) เมื่อจบ
ของเฮกเซนสกัด , ผงพืช materialwas
สกัดคลอโรฟอร์ม เพื่อให้ได้ 100 กรัมของกาก สารสกัดจาก
ละลายใน 11 ผสมคลอโรฟอร์ม และเมทานอล
กากดูดซับบนซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟีภายใต้
กว่า ซิลิกาเจล ( 60 - 120 ตาข่าย 150 cm × 40 cm
diametre ) คอลัมน์ที่ถูกยัดเยียดให้ใช้เฮกเซน
ก่อนตามด้วยการเพิ่มขั้วของเฮกเซน / อะซิโตน
ตัวอย่างเศษส่วนที่ 15% ( 4.5 ลิตร ) , 30 % ( 2.75 ลิตร ) 40 % ( 1.5 ลิตร )
และ 50% ( 50 l ) ถูกเก็บแยกต่างหากและเข้มข้น
ได้รับสารตกค้าง E ( การลงทุน G ) F ( 6.25 กรัมกรัม ( 1 กรัม ) และ H
( 23.0 กรัม ) กาก E ( การลงทุน g ) โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์
( 60 - 120 ตาข่าย 100 cm × 35 mm diametre ) และตัวอย่างที่มีสารเฮกเซน
10 % เพื่อให้ได้สารประกอบ 5 ( 0.80 กรัม ) , ใช้สารช่วยผสมกับ 12 %
6
( 6.0 กรัม ) และ 15% โดยสาร 7 ( 7 กรัม )
-
เป็น 24 ชั่วโมง ตัวทำละลายระเหยภายใต้การลดความดันในเครื่องระเหยแบบหมุนเพื่อรับแฟลช
กาก ( 20 กรัม ) ตกค้างที่ดูดซับบนซิลิกาเจล และต้อง
( ซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโทกราฟี กว่า 100 ซม. มม. × 40 diametre ) คอลัมน์ที่ถูกยัดเยียด
เพื่อใช้กับน้ำก่อนตามด้วยส่วนผสมที่ประกอบด้วย
ปริมาณที่เพิ่มขึ้นของอะซิโตน เศษส่วนตัวอย่างที่ 2 %
( 1.5 ลิตร ) 4 % ( 3.75 ลิตร ) , 6% ( 1.5 ลิตร ) และ 10% ( 3.0 ลิตร ) ถูกเก็บแยกจากกัน และเข้มข้น เพื่อขอรับ
ตกค้าง ( 0.310 g ) b ,
( 13.10 G ) C ( 0.645 g ) D ( 4.72 กรัม ) กาก ( 0.31 g )
โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์ ( 60 - 120 ตาข่าย 50 × 10
มิลลิเมตรdiametre ) และตัวอย่างที่มีสาร 2 % ในเฮกเซนขอรับ
สารประกอบ 1 ( 0.20 กรัม ) ส่วน B ( 13.10 g )
โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์ ( 60 - 120 ตาข่าย 100 cm × 25 มิลลิเมตร และ diametre )
ตัวอย่างกับสาร 3 % ในเฮกเซนที่ได้รับสาร
2 ( 12.0 กรัม ) ส่วน C ( 0.645 g ) โหลดบนซิลิกาเจล
คอลัมน์ ( 60 – 120 ตาข่าย , 30 cm × 10 มม. diametre ) และตัวอย่าง
กับสาร 5% ในเฮกเซนที่ได้รับสาร 3 ( 0.490 g )
กาก D ( 4.72 g ) โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์
( 60 - 120 ตาข่าย 60 cm × 20 มม. diametre ) และตัวอย่างที่มีสาร 6 %
ในเฮกเซนที่ได้รับสาร 4 ( 3.50 กรัม ) เมื่อจบ
ของเฮกเซนสกัด , ผงพืช materialwas
สกัดคลอโรฟอร์ม เพื่อให้ได้ 100 กรัมของกาก สารสกัดจาก
ละลายใน 11 ผสมคลอโรฟอร์ม และเมทานอล
กากดูดซับบนซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟีภายใต้
กว่า ซิลิกาเจล ( 60 - 120 ตาข่าย 150 cm × 40 cm
diametre ) คอลัมน์ที่ถูกยัดเยียดให้ใช้เฮกเซน
ก่อนตามด้วยการเพิ่มขั้วของเฮกเซน / อะซิโตน
ตัวอย่างเศษส่วนที่ 15% ( 4.5 ลิตร ) , 30 % ( 2.75 ลิตร ) 40 % ( 1.5 ลิตร )
และ 50% ( 50 l ) ถูกเก็บแยกต่างหากและเข้มข้น
ได้รับสารตกค้าง E ( การลงทุน G ) F ( 6.25 กรัมกรัม ( 1 กรัม ) และ H
( 23.0 กรัม ) กาก E ( การลงทุน g ) โหลดบนซิลิกาเจลคอลัมน์
( 60 - 120 ตาข่าย 100 cm × 35 mm diametre ) และตัวอย่างที่มีสารเฮกเซน
10 % เพื่อให้ได้สารประกอบ 5 ( 0.80 กรัม ) , ใช้สารช่วยผสมกับ 12 %
6
( 6.0 กรัม ) และ 15% โดยสาร 7 ( 7 กรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ทะลายปาล์มที่แยกผลออกหมด
- เข้าถึงได้ง่ายในโลกปัจจุบัน
- invented cuneiform
- What if i leave the university.. And réf
- Driving along the new road, as the centr
- economic
- ฉันรักคุณ
- น่ากินมากๆ
- worse
- The study compared the use of computers
- ไม่มีใครรู้เรย
- I'm in your home!
- worse
- Black and Mendenhall (1990) started that
- 한국어세계화재단 포털 사이트
- Bring broth to pot Heat to boiling, put
- Figure 96. Probability density functions
- ดำน้ำ
- On 21 December 2015 . There are 10 build
- I can't stand with I’m just a little bit
- they’re beyond question
- คุณตั้งชื่อตุ๊กตาให้หน่อย
- On 21 December 2015 . There are 10 build
- หาจุดหมายให้กับชีวิต
