For microsome preparation the tissue (digestive
gland) was homogenized in an Ultra-Turrax homogenizer
for 15 s in a tissue:buffer (0.1 M potassium phosphate, pH
7.5, 0.15 M KCl, 10 mM EDTA and 0.1 mM
phenylmethylsufonyl fluoride) ratio of 1:5 (w/v). The homogenate
was centrifuged at 12,000 x g for 20 min and the
supernatant then centrifuged twice at 105,000 x g (60 min
each). The resulting microsome fraction was resuspended
in buffer (0.2 M potassium phosphate, pH 7.5, 0.15 M KCl,
10 mM EDTA, 0.1 mM phenylmethylsufonyl fluoride and
20% glycerol) at a tissue:buffer ratio of 1:3 and then stored
at -70 °C (Vrolijk et al., 1994).
For microsome preparation the tissue (digestivegland) was homogenized in an Ultra-Turrax homogenizerfor 15 s in a tissue:buffer (0.1 M potassium phosphate, pH7.5, 0.15 M KCl, 10 mM EDTA and 0.1 mMphenylmethylsufonyl fluoride) ratio of 1:5 (w/v). The homogenatewas centrifuged at 12,000 x g for 20 min and thesupernatant then centrifuged twice at 105,000 x g (60 mineach). The resulting microsome fraction was resuspendedin buffer (0.2 M potassium phosphate, pH 7.5, 0.15 M KCl,10 mM EDTA, 0.1 mM phenylmethylsufonyl fluoride and20% glycerol) at a tissue:buffer ratio of 1:3 and then storedat -70 °C (Vrolijk et al., 1994).
การแปล กรุณารอสักครู่..

สำหรับการเตรียม microsome เนื้อเยื่อ
(ย่อยอาหารต่อม) ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในโฮโมจีไนอัลตร้า Turrax
15 ในเนื้อเยื่อ: บัฟเฟอร์ (0.1 M ฟอสเฟตโพแทสเซียมพีเอช
7.5, 0.15 M KCl, EDTA 10 มิลลิและ 0.1
มิลลิฟลูออไรphenylmethylsufonyl) อัตราส่วน 1 : 5 (w / v) homogenate
ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 XG 20
นาทีและใสแล้วปั่นครั้งที่สอง105,000 XG (60
นาทีในแต่ละครั้ง) ส่วนผล microsome ถูก resuspended
ในบัฟเฟอร์ (0.2 M ฟอสเฟตโพแทสเซียมพีเอช 7.5, 0.15 M KCl,
EDTA 10 มิลลิ 0.1 มิลลิฟลูออไร phenylmethylsufonyl และกลีเซอรีน 20%) ที่เนื้อเยื่ออัตราส่วนกันชนของ 1: 3 แล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิ-70 ° C (Vrolijk et al., 1994)
การแปล กรุณารอสักครู่..
