Materials and methodsPlant material

Materials and methods
Plant material and in vitro culture
Diploid plants of A. thaliana ecotype Columbia
(2n = 2x = 10) were used as sources of explants. Axenic
plants were obtained from seeds sterilized for 5 min in a
mixture of 3 % H2O2 (v/v): 70 % (v/v) EtOH (1 : 1), and
rinsed five times with sterile distilledwater. Seedswere placed
in culture vessels containing hormone-free MS medium
(Murashige and Skoog 1962) enriched with mineral salts,
vitamins, sucrose (3 %,w/v) and agar (0.8 %,w/v).The plants
were grown at 21 C, 16-h photoperiod and 70 lmol m-2 s-1
irradiance. The same growth-room conditions were used for
tissue culture. Leaf explants were obtained by cutting young
rosette leaves excised from 3-week-old plants into 1 cm2
squares, each with a part of a mid vein. Explants were cultured
on a B5 callus-inducing medium (Gamborg et al. 1968)
containing 0.5 mg/L of 2,4-D and 0.05 mg/L of kinetin
(Valvakens et. al 1988). Two and 6-week old calli were
transferred on to a shoot-inducing B5 medium supplemented
with 0.15 mg/L of IAA and 5 mg/L of 2iP (Valvakens et al.
1988). The regenerated rosettes and shootswere transferred to
a root-inducing B5 medium supplemented with 0.125 mg/L
of NAA. These procedures produced regenerated plants (R1),
and the next generation phase (R2) was obtained from seeds
that were collected from the R1 regenerants. The pH of all
media was adjusted to 5.8 and autoclaved at 121 C for
20 min (Jiang et al. 2011).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการพืชวัสดุและเพาะพฤติกรรมมักพืชของ A. thaliana ecotype โคลัมเบีย(2n = 2 x = 10) ถูกใช้เป็นแหล่งของ explants Axenicพืชที่ได้จากเมล็ดที่ผ่านการฆ่าเชื้อสำหรับ 5 นาทีในการส่วนผสม 3% H2O2 (v/v): 70% (v/v) คะแนน (1:1), และล้าง 5 ครั้ง ด้วย distilledwater เป็นหมัน Seedswere ที่วางไว้ในเรือวัฒนธรรมประกอบด้วยฮอร์โมนฟรี MS ปานกลาง(Murashige และ Skoog 1962) ที่อุดมไป ด้วยเกลือแร่วิตามิน ซูโครส (3 %,w/v) และอาหาร (0.8 %,w/v) พืชที่ปลูกที่ 21 C, 16 h ชั่วโมง และ 70 lmol m-2 s-1irradiance ใช้สำหรับเงื่อนไขการเติบโตห้องเดียวกันเนื้อเยื่อ Explants ใบรับ โดยหนุ่มตัดกุหลาบใบสรรพสามิตจากพืชอายุ 3 สัปดาห์ 1 cm2สี่เหลี่ยม มีส่วนของเส้นกลาง Explants มีอ่างบนมี B5 กระตุ้นให้เกิดแคลลัส (Gamborg et al. 1968)ที่ประกอบด้วย 2, 4-D 0.5 mg/L และ 0.05 mg/L kinetin(Valvakens et. al 1988) สอง และ calli 6 - สัปดาห์เก่าได้โอนไปกระตุ้นให้เกิดยิง B5 สื่อเสริม0.15 mg/L ของ IAA และ 5 mg/L 2iP (Valvakens et al1988) อาศัยแหวนและ shootswere โอนไปการกระตุ้นให้เกิดราก B5 กลางเสริม ด้วย 0.125 mg/Lของ NAA ขั้นตอนเหล่านี้ผลิตสร้างพืช (R1),และระยะรุ่นถัดไป (R2) ได้รับจากเมล็ดที่ถูกเก็บรวบรวมจาก R1 regenerants ค่า pH ของปรับปรุงสื่อการนึ่งที่ 121 C สำหรับ และ 5.820 นาที (Jiang et al. 2011)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
วัสดุจากพืชในวัฒนธรรมและหลอดทดลอง
ซ้ำพืช A. thaliana พันธุ์โคลัมเบีย
(2n = 2x = 10) ถูกนำมาใช้เป็นแหล่งที่มาของชิ้นส่วน Axenic
พืชที่ได้รับจากเมล็ดฆ่าเชื้อเป็นเวลา 5 นาทีใน
ส่วนผสมของ 3% H2O2 (v / v): 70% (v / v) เอทานอล (1: 1) และ
ล้างห้าครั้งด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ Seedswere วาง
ในภาชนะที่มีวัฒนธรรมสูตร MS ฮอร์โมนฟรี
(Murashige และ Skoog 1962) อุดมไปด้วยเกลือแร่,
วิตามิน, น้ำตาลซูโครส (3% w / v) และวุ้น (0.8% w / v) พืชได้โดยเริ่มต้น
ที่ปลูกวันที่ 21 ? C, แสง 16 ชั่วโมงและ 70 lmol M-2 s-1
รังสี เงื่อนไขการเจริญเติบโตในห้องเดียวกันถูกนำมาใช้สำหรับ
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ชิ้นส่วนใบที่ได้รับโดยการตัดหนุ่ม
ดอกกุหลาบใบตัดจากพืช 3 สัปดาห์อายุเป็น 1 cm2
สี่เหลี่ยมแต่ละคนมีส่วนหนึ่งของหลอดเลือดดำกลาง ชิ้นส่วนมาเลี้ยง
บน B5 แคลลัสชักนำกลาง (Gamborg et al. 1968)
ที่มี 0.5 มิลลิกรัม / ลิตรของ 2,4-D และ 0.05 มิลลิกรัม / ลิตรของไคเนติน
(Valvakens et al. 1988) สองและ 6 สัปดาห์แคลลัสเก่าถูก
โอนไปยังยิงชักนำ B5 เติม
กับ 0.15 มิลลิกรัม / ลิตรของ IAA และ 5 มิลลิกรัม / ลิตรของ 2iP (Valvakens et al.
1988) โบอาศัยและ shootswere โอนไปยัง
รากชักนำ B5 กลางเสริมด้วย 0.125 มิลลิกรัม / ลิตร
ของ NAA ขั้นตอนเหล่านี้ผลิตพืชอาศัย (R1)
และเฟสรุ่นต่อไป (R2) ที่ได้รับจากเมล็ดพันธุ์
ที่ถูกเก็บรวบรวมจากเพาะ R1 ค่า pH ของทุก
สื่อที่ได้รับการปรับให้ 5.8 และนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสเป็น
เวลา 20 นาที (Jiang et al. 2011)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการวัสดุและในเนื้อเยื่อพืชซ้ำพืช . thaliana พันธุ์โคลัมเบีย( 2n = 2x = 10 ) ถูกใช้เป็นแหล่งที่มาของอาหาร . axenicพืชที่ได้จากเมล็ดฆ่าเชื้อเป็นเวลา 5 นาทีในส่วนผสมของ H2O2 3 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) : 70 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) แอลกอฮอล์ ( 1 : 1 ) และล้างห้าครั้งกับน้ำกลั่นปราศจากเชื้อ seedswere วางไว้ในวัฒนธรรมเรือที่มีฮอร์โมนฟรี MS( อาหารสูตร Murashige and Skoog 1962 ) อุดมไปด้วยเกลือแร่วิตามิน ซูโครส ( 3% w / v ) และวุ้น ( 0.8 % W / V ) พืชปลูกที่ 21 องศาเซลเซียส และ 70 lmol ที่สุดด้วย 16-h แสงดังกล่าว . เงื่อนไขการใช้ห้องเดียวกันสำหรับการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ใบที่ได้จากการตัดเนื้อเยื่ออ่อนตัดจาก 3-week-old Rosette ใบพืชเป็น 1 ตร. ซม.สี่เหลี่ยม แต่ละส่วนของเส้นกลาง อาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในอาหาร B5 กระตุ้นขนาดกลาง ( Gamborg et al . 2511 )ที่มี 2 , 4-D 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตรและที่ความเข้มข้น 0.05 มิลลิกรัมต่อลิตร( valvakens et al 1988 ) 2 อายุ 6 สัปดาห์แคลลัสย้ายไปยังยิงกระตุ้น B5 MSกับ 0.15 มิลลิกรัม / ลิตร IAA และ 5 มก. / ล. 2ip ( valvakens et al .1988 ) สร้างใหม่และย้ายไปไว้ shootswereรากกระตุ้น B5 เติม 0.125 มิลลิกรัมต่อลิตรของตา ขั้นตอนเหล่านี้ผลิตต้นข้าว ( R1 )และรุ่นถัดไปของเฟส ( R2 ) ได้จากเมล็ดที่รวบรวมจาก R1 regenerants . pH ของทั้งหมดสื่อให้อยู่ในระดับที่เหมาะสมและที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสสังเคราะห์สำ20 นาที ( เจียง et al . 2011 )