The susceptibility of Pseudomonas i

The susceptibility of Pseudomonas isolates to TTO, terpinen-4-ol, g-terpinene, cineole, a-terpineol and r-cymene was determined using a broth microdilution method based on CLSI guidelines.8 Mueller– Hinton broth (MHB; Oxoid) was supplemented with 0.002% (v/v) Tween 80 (Sigma) (MHB-T) to enhance dispersion of the TTO or components. A stock of TTO or component at twice the desired final concentration was prepared in MHB-T and mixed vigorously by vortex. This was used to prepare serial doubling dilutions in a 96-well tray over the range 0.03–8% (v/v). Overnight broth cultures of organisms in MHB were adjusted in MHB-T so that the final concentration in each well following inoculation of the microtitre tray was $5.0 · 105 cfu/mL. Inocula concentrations were confirmed by viable counts; after serial 10-fold dilution of the inoculum in sterile distilled water, four 10 mL samples from the appropriate dilution were inoculated onto well-dried blood agar plates. After incubation at 37C for 18–24 h the number of cfu was counted and the concentration of the inocula calculated. After 18 h of incu- bation of trays at 37C, the MIC was the lowest concentration of TTO that resulted in a clear well. Ten microlitres from each well was spot-inoculated onto pre-dried nutrient agar (NA) and incubated overnight at 35C to determine the MBC. The MBC was defined as the concentration of TTO or component that killed 99.9% of the inoculum. Experiments were performed at least three times and the modal value selected.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไวของ Pseudomonas แยกไป TTO, terpinen 4 ol, g terpinene, cineole เป็น terpineol และ r cymene ถูกกำหนดโดยใช้วิธี microdilution ซุปตาม CLSI guidelines.8 Mueller Hinton ซุป (MHB Oxoid) ถูกเสริม ด้วย 0.002% (v/v) Tween 80 (ซิกมา) (MHB-T) เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการกระจายตัวของ TTO หรือคอมโพเนนต์ หุ้นของ TTO หรือคอมโพเนนต์ที่สองที่ต้องสุดท้ายเข้มข้นเตรียมใน MHB T และผสมโยคะ โดย vortex นี้ถูกใช้เพื่อจัดเตรียม dilutions จะประจำในถาด 96 ดีช่วง 0.03-8% (v/v) วัฒนธรรมซุปค้างคืนของสิ่งมีชีวิตใน MHB ถูกปรับปรุงใน MHB T เพื่อให้ความเข้มข้นสุดท้ายในแต่ละดีต่อ inoculation ถาด microtitre ถูกราคา $50 · 105 cfu/mL ความเข้มข้นของ inocula ถูกยืนยัน โดยตรวจนับได้ หลังจากประจำ 10-fold เจือจางของ inoculum ในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ 10 mL ตัวอย่างที่ 4 จากการเจือจางที่เหมาะสมมี inoculated บนแผ่นแห้งดีเลือด agar หลังจากบ่มที่ 37 C สำหรับ h 18-24 มีนับจำนวน cfu และความเข้มข้นของ inocula ที่คำนวณ หลังจาก h 18 ของ incu-bation ถาดที่ 37 C, MIC มีความเข้มข้นต่ำสุดของ TTO ที่ทำให้เกิดความชัดเจน Microlitres 10 จากบ่อแต่ละได้รับ inoculated ลงธาตุอาหารแห้งก่อน agar (NA) และ incubated ค้างคืนที่ 35 C กำหนดช่อง MBC ช่อง MBC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นของ TTO หรือคอมโพเนนต์ที่ 99.9% ของ inoculum ที่ฆ่า ทดลองได้ดำเนินการอย่างน้อย 3 ครั้ง และเลือกค่าโมดอล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความไวของเชื้อ Pseudomonas แยกไป TTO, terpinen-4-เบียร์, G-terpinene, cineole,-Terpineol และ R-cymene ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการน้ำซุป microdilution ตาม CLSI guidelines.8 Mueller- ฮินตันน้ำซุป (MHB; Oxoid) เป็น เสริมด้วย 0.002% (v / v) ทวีน 80 (Sigma) (MHB-T) เพื่อเพิ่มการกระจายตัวของ TTO หรือส่วนประกอบ หุ้นของ TTO หรือส่วนประกอบที่สองความเข้มข้นสุดท้ายที่ต้องการได้รับการจัดทำขึ้น MHB-T และแรงโดยผสมน้ำวน นี้ถูกใช้ในการเตรียมการเจือจางเพิ่มขึ้นต่อเนื่องในถาด 96 ดีกว่าช่วง 0.03-8% (v / v) วัฒนธรรมน้ำซุปในชั่วข้ามคืนของสิ่งมีชีวิตใน MHB มีการปรับใน MHB-T เพื่อให้ความเข้มข้นสุดท้ายในแต่ละการฉีดวัคซีนอย่างดีต่อไปนี้ของถาด microtitre เป็น 5.0 $ · 105 cfu / ml ความเข้มข้นของเชื้อตั้งต้นได้รับการยืนยันโดยการนับทำงานได้; หลังจากอนุกรมการเจือจาง 10 เท่าของเชื้อในน้ำกลั่นปลอดเชื้อสี่ 10 ตัวอย่างมิลลิลิตรจากการลดสัดส่วนที่เหมาะสมถูกเชื้อเข้าสู่ที่แห้งแผ่นวุ้นเลือด หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ 18-24 ชั่วโมงจำนวนโคโลนีที่นับและความเข้มข้นของเชื้อตั้งต้นคำนวณ หลังจาก 18 ชั่วโมง bation incu- ถาดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส, MIC เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของ TTO ที่ส่งผลให้ชัดเจนดี สิบ microlitres จากกันเป็นอย่างดีได้รับการเพาะเชื้อบนก่อนแห้งสารอาหารวุ้น (NA) และบ่มค้างคืนที่ 35 องศาเซลเซียสเพื่อตรวจสอบ MBC MBC ที่ได้รับการกำหนดให้เป็นความเข้มข้นของ TTO หรือส่วนประกอบที่ฆ่า 99.9% ของเชื้อ การทดลองได้ดำเนินการอย่างน้อยสามครั้งและมูลค่าคำกริยาที่เลือก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความไวของ Pseudomonas ไอโซเลตไปสักคน terpinen-4-ol g-terpinene cineole , , , , และ a-terpineol r-cymene ตั้งใจใช้ซุป microdilution วิธีตามแนวทางต่าง 8 8 – ฮินตัน น้ำซุป ( mhb ; oxoid ) เสริมด้วย 0.002 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) Tween 80 ( ซิกม่า ) ( mhb-t ) เพื่อเพิ่มการกระจายของ TTO หรือ ส่วนประกอบหุ้นของ TTO หรือส่วนประกอบในสองครั้งสุดท้ายที่ต้องการของที่เตรียมไว้ใน mhb-t ผสมอย่างแข็งขัน โดย . . นี้ถูกใช้เพื่อเตรียมอนุกรมเป็นเจือจางใน 96 ดีถาดมากกว่าช่วง 0.03 – 8 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) วัฒนธรรมของสิ่งมีชีวิตในน้ำข้ามคืน mhb ปรับข้อมูลใน mhb-t ดังนั้นที่ความเข้มข้นสุดท้ายในแต่ละดีต่อไปนี้ใส่ถาด microtitre เป็น $ 50 ด้วย 105 CFU / มล. inocula เท่ากับยืนยันได้นับ ; หลังจากการพับต่อเนื่อง 10 ของเชื้อในการฆ่าเชื้อน้ำสี่ 10 มล ตัวอย่างจากการปลูกเชื้อลงบนที่แห้งดีเลือดวุ้นแผ่น หลังจากบ่มที่ 37  C 18 – 24 H จำนวนโคโลนีถูกนับและความเข้มข้นของ inocula คํานวณหลังจาก 18 H ของ incu - bation ถาดที่ 37  C , ไมค์ คือ ความเข้มข้นต่ำสุดของ TTO ที่ส่งผลให้ชัดเจนด้วย 10 microlitres จากแต่ละจุดบนดีเชื้อก่อน NUMB3RS แห้ง ( นา ) และบ่มค้างคืนที่ 35  C หา MBC MBC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นของ TTO หรือคอมโพเนนต์ที่ฆ่า 99.9% ของเชื้อ .ทดลองอย่างน้อย 3 ครั้ง และการเลือกค่า .