attempted to develop PDR against CT

attempted to develop PDR against CTV in transgenic
citrus plants. Forty-two transgenic lines carrying either
the p25 CP gene from the mild CTV strain T-317
or the highly virulent strain T-305 were produced.
Some of the transgenic lines showed a susceptible
phenotype similar to non-transformed controls,
whereas others showed protection against CTV. This
protection was characterized by a significant delay in
CTV establishment and accumulation. In addition, a
proportion of plants, ranging from 10-33 %, from six
transgenic lines (SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15,
SCP.16, and MCP.24) were resistant to CTV. These
lines consistently showed protection in different challenge
experiments by both graft- and aphid-inoculation.
Inoculation failure was discarded since: (1)
100% of the non-transgenic control plants became infected
in all evaluation experiments, indicating that
the inoculation systems were highly efficient and reliable;
(2) only these six lines exhibited the protection
phenotype consistently; and (3) CTV was detected
by PC-RT-NESTED-PCR in transgenic and
control scions from all plants, before removing bark
chips in graft-inoculation experiments. Mestre et al.
(1997b) reported that CTV can be passively transported
through the phloem tubes even in CTV-resistant
citrus genotypes. Similarly, in our experiments
viral RNA could be detected by RT-PCR in virus-resistant
transgenic plants before removing the source
of inoculum.
A fraction of transgenic plants from the CTV-protected
lines were fully resistant and did not show any
sign of virus infection. When these resistant plants
were propagated and re-inoculated with CTV by
grafting, the resistance phenotype was again reproduced
in a similar proportion of plants, while the rest
of them showed a delay in virus accumulation and
symptom attenuation. These findings could be explained
by: (1) the dose of virus delivered to individual
plants may be variable and in some cases it was
sufficient to overcome resistance; (2) sequence variants
of CTV are sometimes unevenly distributed in
infected plants (D’Urso et al. 2000) and therefore, individual
plants may have received inocula with different
viral populations; or (3) the level of expression
of the transgenes could vary during evaluation experiments,
and this may affect the efficiency of the protection
mechanism. Variation of the expression level
of the transgenes during the course of evaluation tests
was shown for the transgenic line SCP.15. Indeed,
GUS activity changed after CTV inoculation and progressively
increased in SCP.15 plants (results not

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พยายามพัฒนาลาวกับ CTV ในถั่วเหลืองพืชส้ม สองบรรทัดถั่วเหลืองดำเนินการอย่างใดอย่างหนึ่งยีน CP p25 จาก CTV อ่อนสายพันธุ์ T-317หรือผลิตพันธุ์สูง virulent T 305บางส่วนของใบถั่วเหลืองพบว่าความไวต่อphenotype เหมือนกับไม่ใช่แปลงควบคุมในขณะที่คนอื่นพบป้องกัน CTV นี้มีลักษณะป้องกันความล่าช้าที่สำคัญในก่อตั้ง CTV และสะสม แห่งสัดส่วนของพืช ตั้งแต่ 10-33%, 6ถั่วเหลืองบรรทัด (SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15SCP.16 และ MCP.24) ได้ทนต่อ CTV เหล่านี้บรรทัดแสดงป้องกันอย่างต่อเนื่องในความท้าทายที่แตกต่างกันทดลองโดยทั้งสองรับสินบน - และ aphid-inoculationล้มเหลว inoculation ถูกละทิ้งเนื่องจาก: (1)100% ของพืชควบคุมไม่ใช่ถั่วเหลืองกลายเป็นติดเชื้อในการทดลองประเมินผลทั้งหมด แสดงที่ระบบ inoculation ได้มีประสิทธิภาพสูง และเชื่อถือ ได้(2) เฉพาะบรรทัดเหล่านี้หกจัดแสดงการป้องกันphenotype อย่างสม่ำเสมอ และ CTV (3) ตรวจพบโดยพี-RT-ซ้อน-PCR ในถั่วเหลือง และควบคุม scions จากพืชทั้งหมด ก่อนที่จะเอาเปลือกอบรับสินบน inoculation ทดลอง เว et al(1997b) รายงานว่า CTV สามารถใช้ passively ขนส่งผ่านท่อเปลือกชั้นในแม้ใน CTV ทนส้มศึกษาจีโนไทป์ ในทำนองเดียวกัน ในการทดลองของเราอาร์เอ็นเอไวรัสถูกตรวจพบ โดย RT-PCR ในทนทานต่อไวรัสถั่วเหลืองพืชก่อนที่จะเอาต้นของ inoculumเศษพืชถั่วเหลืองจาก CTV ป้องกันบรรทัดถูกเต็มทน และไม่แสดงใด ๆเครื่องติดไวรัส เมื่อพืชเหล่านี้ทนเผยแพร่ และ inoculated ใหม่กับ CTV โดยgrafting, phenotype ต้านทานได้อีกทำซ้ำในสัดส่วนที่คล้ายคลึงกันของพืช ในขณะที่ส่วนเหลือพวกเขาแสดงให้เห็นว่าการเลื่อนเวลาในไวรัสสะสม และอาการอ่อน สามารถอธิบายผลการวิจัยเหล่านี้โดย: (1) ปริมาณของไวรัสที่ส่งให้บุคคลพืชอาจผันแปร และในบางกรณีเพียงพอที่จะเอาชนะความต้านทาน (2) ลำดับย่อยของ CTV ในบางครั้งซึ่งกระจายในติดไวรัสพืช (D'Urso et al. 2000) ดัง นั้น แต่ละพืชอาจได้รับ inocula พร้อมประชากรไวรัส หรือ (3) ระดับของนิพจน์ของ transgenes สามารถเปลี่ยนแปลงระหว่างการทดลองประเมินผลและอาจมีผลต่อประสิทธิภาพของการป้องกันกลไกการ ความผันแปรของระดับนิพจน์ของ transgenes ในระหว่างการทดสอบประเมินผลที่แสดงในบรรทัดถั่วเหลือง SCP.15 แน่นอนกิจกรรม GUS CTV inoculation และความก้าวหน้าในการเปลี่ยนแปลงเพิ่มขึ้นในพืช SCP.15 (ผลไม่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พยายามที่จะพัฒนาสปปกับ CTV
ในพันธุ์พืชที่มีรสเปรี้ยว สี่สิบสองสายพันธุ์การดำเนินการอย่างใดอย่างหนึ่ง
P25 ยีน CP จากความเครียด CTV อ่อน T-317
หรือสายพันธุ์รุนแรงสูง T-305 มีการผลิต. บางส่วนของสายพันธุ์พบว่ามีความเสี่ยงที่ฟีโนไทป์ที่คล้ายกับการควบคุมที่ไม่ได้เปลี่ยนในขณะที่คนอื่นๆ แสดงให้เห็นว่าการป้องกัน กับ CTV นี้ป้องกันโดดเด่นด้วยความล่าช้าที่สำคัญในการจัดตั้งCTV และการสะสม นอกจากนี้สัดส่วนของพืชตั้งแต่ 10-33% จากหกสายพันธุ์ (SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 และ MCP.24) มีความทนทานต่อ CTV เหล่านี้สายอย่างต่อเนื่องแสดงให้เห็นว่าการป้องกันที่แตกต่างกันในการท้าทายการทดลองทั้งgraft- และเพลี้ย-ฉีดวัคซีน. ความล้มเหลวของการฉีดวัคซีนถูกทิ้งตั้งแต่ (1) 100% ของพืชควบคุมที่ไม่ใช่พันธุ์กลายเป็นติดเชื้อในทุกการทดลองประเมินผลแสดงให้เห็นว่าระบบการฉีดวัคซีนเป็นอย่างมากมีประสิทธิภาพและเชื่อถือ; (2) เท่านั้นเหล่านี้หกเส้นแสดงการป้องกันฟีโนไทป์อย่างต่อเนื่อง; และ (3) CTV ที่ตรวจพบโดยPC-RT-PCR ซ้อนใน-ยีนและการควบคุมตราหน้าจากพืชทั้งหมดก่อนที่จะถอดเปลือกชิปในการทดลองปลูกถ่ายอวัยวะ-การฉีดวัคซีน เมสเตร et al. (1997b) รายงานว่า CTV สามารถขนส่งอดทนผ่านท่อใยเปลือกไม้แม้ในCTV ทนยีนส้ม ในทำนองเดียวกันในการทดลองของเราไวรัสอาร์เอ็นเอจะได้รับการตรวจพบโดย RT-PCR ในไวรัสทนพืชดัดแปรพันธุกรรมก่อนที่จะลบแหล่งที่มาของเชื้อ. เศษของพืชดัดแปรพันธุกรรมจาก CTV การป้องกันสายทนอย่างเต็มที่และไม่ได้แสดงใดๆเข้าสู่ระบบของการติดเชื้อไวรัส . เมื่อพืชทนเหล่านี้ถูกแพร่กระจายและ re-เชื้อด้วย CTV โดยการปลูกถ่ายอวัยวะ, ฟีโนไทป์ต้านทานถูกทำซ้ำอีกครั้งในสัดส่วนที่ใกล้เคียงของพืชในขณะที่ส่วนที่เหลือของพวกเขาแสดงให้เห็นถึงความล่าช้าในการสะสมไวรัสและลดทอนอาการ การค้นพบนี้สามารถอธิบายได้โดย (1) ปริมาณของเชื้อไวรัสที่ส่งมอบให้กับบุคคลที่พืชอาจจะเป็นตัวแปรและในบางกรณีมันก็เพียงพอที่จะเอาชนะความต้านทาน; (2) สายพันธุ์ลำดับของCTV บางครั้งจะกระจายในพืชที่ติดเชื้อและดังนั้นจึงบุคคล(D'Urso et al, 2000). พืชอาจได้รับ inocula ที่แตกต่างกันกับประชากรของไวรัส; หรือ (3) ระดับของการแสดงออกของtransgenes อาจแตกต่างกันไปในระหว่างการทดลองประเมินผลและอาจส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพของการป้องกันที่กลไก การเปลี่ยนแปลงของระดับการแสดงออกของ transgenes ในระหว่างการทดสอบการประเมินผลก็แสดงให้เห็นสำหรับสายพันธุ์SCP.15 อันที่จริงกิจกรรม GUS การเปลี่ยนแปลงหลังจากการฉีดวัคซีน CTV และมีความก้าวหน้าที่เพิ่มขึ้นในSCP.15 พืช (ผลไม่ได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พยายามที่จะพัฒนาโครงการกับ CTV ในต้นพืชส้ม

สี่สิบสองต้นสายแบกเหมือนกัน
p25 CP ยีนอ่อน CTV เมื่อย t-317
หรือ t-305 สายพันธุ์รุนแรงสูงได้ผลิต .
บางสายพันธุ์ พบว่ามีการเปลี่ยนแปลงคล้ายกับไว

ไม่ใช่การควบคุม ในขณะที่คนอื่น ๆมีการป้องกัน CTV . นี้
การป้องกันคือ characterized โดยความล่าช้าอย่างมีนัยสำคัญ
ก่อตั้ง CTV และการสะสม นอกจากนี้
สัดส่วนของพืช ตั้งแต่ 10-33 % จากสายพันธุ์ 6
( scp.10 scp.11 scp.13 , , ,
scp.16 SCP . 15 และ MCP . 24 ) ต่อต้าน CTV . เส้นเหล่านี้มีการป้องกันในการทดลองท้าทายเสมอ

ที่แตกต่างกันโดยทั้งกราฟและเพลี้ย
การฉีดวัคซีนการฉีดวัคซีนความล้มเหลวถูกทิ้งตั้งแต่ ( 1 )
100% ไม่ใช่พันธุกรรมควบคุมพืชกลายเป็นติดเชื้อ
ในการทดลองประเมินผลทั้งหมด ระบุว่า การฉีดวัคซีน
ระบบมีประสิทธิภาพสูงและเชื่อถือได้ ;
( 2 ) เพียงหกสายและการป้องกัน
ที่มีอย่างต่อเนื่อง และ ( 3 ) CTV ที่ตรวจพบใน pc-rt-nested-pcr
โดย ยีนควบคุมฯและ
จากพืชทั้งหมดก่อนที่จะเอาเปลือก
ชิปในกราฟการการทดลอง เมสเตร et al .
( 1997b ) รายงานว่า CTV สามารถอดทนขนส่ง
ผ่านระหว่างท่อใน CTV ทน
ส้มพันธุ์ . นอกจากนี้ในการทดลองของเรา
ไวรัส RNA โดยวิธี RT-PCR ) สามารถตรวจพบไวรัสป้องกัน
พืชข้ามพันธุ์ก่อนที่จะลบแหล่งที่มาของเชื้อ
.
ส่วนของพืชดัดแปรพันธุกรรมจาก CTV ป้องกัน
เส้นอย่างต่อต้าน และไม่แสดง
สัญญาณของการติดเชื้อไวรัส . เมื่อพืชทนได้ขยายพันธุ์และเชื้อเหล่านี้

กับ CTV โดยการ ต้านทานการทำซ้ำอีกครั้ง
ในสัดส่วนที่คล้ายกันของพืช ในขณะที่ส่วนที่เหลือ
ของพวกเขาพบความล่าช้าในการสะสมและการลดทอนอาการไวรัส
. ผลการศึกษาครั้งนี้สามารถอธิบาย
โดย( 1 ) ปริมาณของไวรัสส่งพืชแต่ละ
อาจจะเป็นตัวแปร และในบางกรณีก็เพียงพอที่จะเอาชนะความต้านทาน

; ( 2 ) ลำดับตัวแปรของ CTV บางครั้งซึ่งกระจายใน
พืชที่ติดเชื้อ ( d'urso et al . 2000 ) และ ดังนั้น พืชแต่ละ
อาจได้รับ inocula กับประชากรของไวรัสที่แตกต่างกัน
; หรือ ( 3 ) ระดับของการแสดงออก
ของ transgenes อาจแตกต่างกันในระหว่างการทดลองประเมินผล
และนี้อาจส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพของกลไกป้องกัน

การเปลี่ยนแปลงของระดับการแสดงออกของ transgenes
ในระหว่างหลักสูตรของการทดสอบการประเมิน
แสดงสำหรับ scp.15 สายพันธุกรรม . แน่นอน กิจกรรม
กัสเปลี่ยนไปหลังจาก CTV ( และมีความก้าวหน้าเพิ่มขึ้นใน scp.15 พืช (

ผลไม่