Cloning and expression of two sider

Cloning and expression of two siderophore receptor genes, pfeA, and fpvA of Pseudomonas aeruginosa origin, encoding outer membrane receptor for enterobactin, a catechol type siderophore and for pyoverdin, a mixed ligand type siderophore, respectively, were studied in two Cajanus cajan rhizobial isolates, IC3123 and ST1. Expression of an approximately 80/89 kDa protein band was seen in all the transformants while the corresponding parental strains failed to express the same. Functionality of the construct, pAKEnt (plasmid containing pfeA) and pAKFpvA (plasmid harbouring fpvA), was checked by transforming it in P. aeruginosa K407Δ pfeA and P. aeruginosa K437Δ fpvA, respectively and monitoring phenotypic complementation. Positive cross utilization of cognate siderophores by respective transformant and failure to utilize the same by corresponding parent strains, confirmed the expression of the respective genes. The constructs, pAKEnt and pAKFpvA, were mobilized in to Rhizobium sp. strains IC3123 and ST1 and expression of the corresponding gene in transformants led to utilization of the respective siderophores and stimulation in the growth of the transformants in the presence of respective siderophore producing strains in a co-inoculation study. Peanut and pigeon pea plants inoculated with transformants harbouring pAKEnt and pAKFpvA constructs, not only showed better rhizospheric colonization but also showed better plant growth with respect to increase in root weight, shoot weight, nodule number and chlorophyll content as compared to the parental strains. Amongst the two constructs, pAKEnt showed relatively higher increase in growth response as compared to pAKFpvA, which could be attributed to higher affinity of enterobactin for Fe3+ (K = 1052 M−1) as compared to pyoverdine (K = 1032 M−1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การโคลนและการแสดงออกของยีนตัวรับสอง siderophore, pfeA และ fpvA ของ Pseudomonas aeruginosa กำเนิด เข้ารหัสรับเมมเบรนชั้นนอกสำหรับ enterobactin, catechol การพิมพ์ siderophore และสำหรับ pyoverdin, siderophore เป็นชนิดของลิแกนด์ผสม ตามลำดับ มีศึกษาในสอง Cajanus cajan rhizobial แยก IC3123 และ ST1 นิพจน์ของการประมาณ 80/89 kDa โปรตีนวงที่เห็นในทุก transformants ขณะที่สอดคล้องกันโดยผู้ปกครองสายพันธุ์ล้มเหลวการแสดงเดียวกัน ฟังก์ชันการทำงานของโครงสร้าง pAKEnt (plasmid ที่ประกอบด้วย pfeA) และ pAKFpvA (plasmid รีวิว fpvA), ตรวจสอบ โดยตรวจสอบเสริมฤทธิ์ complementation ฟีโนไทป์ และเปลี่ยนใน P. aeruginosa K407Δ pfeA และ fpvA P. aeruginosa K437Δ ตามลำดับ บวกข้ามการใช้วลี siderophores โดย transformant ที่เกี่ยวข้องและการใช้ประโยชน์เดียวกัน โดยสายพันธุ์หลักที่สอดคล้องกัน ยืนยันการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้อง โครงสร้าง pAKEnt และ pAKFpvA ถูกระดมในไรโซเบียม sp.สายพันธุ์ IC3123 และ ST1 และแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องในการนำไปสู่การใช้ประโยชน์ของ siderophores นั้น ๆ และกระตุ้นในการเติบโตของ transformants ในสายพันธุ์ผลิต siderophore เกี่ยวข้องในการศึกษาร่วมดัน transformants ถั่วลิสงและถั่วพืช inoculated มีรีวิว pAKEnt transformants และ pAKFpvA โครงสร้าง ไม่เพียงแต่ แสดงให้เห็นว่าดีกว่า rhizospheric ล่าอาณานิคม แต่ยัง แสดงให้เห็นได้ดีพืชเจริญเติบโต ด้วยความเคารพเพื่อเพิ่มน้ำหนักราก ถ่ายน้ำหนัก หมายเลข nodule และคลอโรฟิลเนื้อหาเปรียบเทียบกับสายพันธุ์โดยผู้ปกครอง ในหมู่ของโครงสร้างที่สอง pAKEnt แสดงให้เห็นว่าเพิ่มขึ้นค่อนข้างสูงในการตอบสนองการเจริญเติบโตเมื่อเทียบกับ pAKFpvA ซึ่งอาจเกิดจากการสูงขึ้นของความสัมพันธ์ของ enterobactin Fe3 + (K = 1052 M−1) เปรียบเทียบกับ pyoverdine (K = 1032 M−1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การโคลนและการแสดงออกของยีนสอง siderophore รับ, pfeA และ fpvA ของ Pseudomonas aeruginosa กำเนิดเข้ารหัสรับเยื่อหุ้มชั้นนอกสำหรับ enterobactin เป็น siderophore ประเภท catechol และ pyoverdin, ผสมชนิดแกนด์ siderophore ตามลำดับการศึกษาในสองต้น Cajanus สายพันธุ์ไรโซเบียม cajan, IC3123 และ ST1 การแสดงออกของประมาณ 80/89 วงโปรตีน kDa ที่เห็นใน transformants ทั้งหมดในขณะที่สายพันธุ์ที่สอดคล้องกันของผู้ปกครองที่ล้มเหลวในการแสดงเหมือนกัน ฟังก์ชั่นของการสร้าง, pAKEnt (พลาสมิดที่มี pfeA) และ pAKFpvA (พลาสมิดเก็บงำ fpvA) ได้รับการตรวจสอบโดยการเปลี่ยนใน P. aeruginosa K407Δ pfeA และ P. aeruginosa K437Δ fpvA ตามลำดับและการตรวจสอบ complementation ฟีโนไทป์ การใช้ประโยชน์ในเชิงบวกของข้าม siderophores สายเลือดโดย transformant ที่เกี่ยวข้องและความล้มเหลวที่จะใช้เหมือนกันโดยสายพันธุ์หลักที่สอดคล้องกันได้รับการยืนยันการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้อง โครงสร้าง, pAKEnt และ pAKFpvA ถูกกองกำลังในไรโซเบียม SP สายพันธุ์ IC3123 และ ST1 และการแสดงออกของยีนที่สอดคล้องกันใน transformants นำไปสู่​​การใช้ประโยชน์จาก siderophores ที่เกี่ยวข้องและการกระตุ้นในการเจริญเติบโตของ transformants ในการปรากฏตัวของแต่ละ siderophore การผลิตสายพันธุ์ในการศึกษาร่วมการฉีดวัคซีน พืชถั่วลิสงและถั่วมะแฮะเชื้อด้วย transformants เก็บงำ pAKEnt และ pAKFpvA สร้างไม่ได้แสดงให้เห็นเพียงการล่าอาณานิคม rhizospheric ดีขึ้น แต่ยังแสดงให้เห็นการเติบโตของพืชที่ดีขึ้นเกี่ยวกับการเพิ่มน้ำหนักรากถ่ายน้ำหนักจำนวนโหนกและเนื้อหาคลอโรฟิลเมื่อเทียบกับสายพันธุ์ของผู้ปกครอง ในบรรดาสองโครงสร้าง, pAKEnt แสดงให้เห็นเพิ่มขึ้นค่อนข้างสูงในการตอบสนองการเจริญเติบโตเมื่อเทียบกับ pAKFpvA ซึ่งสามารถนำมาประกอบกับความสัมพันธ์ที่สูงขึ้นของ enterobactin สำหรับ Fe3 + (K = 1052 M-1) เมื่อเทียบกับ pyoverdine (K = 1032 M-1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การโคลนและการแสดงออกของยีนตัวรับสอง , ชุด pfea และ fpva ของ Pseudomonas aeruginosa กำเนิด , เข้ารหัสจากเนื้อเยื่อชั้นนอกสำหรับ enterobactin , แคติคอลประเภทไซเดอโรฟอร์และ pyoverdin , ผสมสารละลายลิแกนด์ชนิด ตามลำดับ ได้ศึกษาอยู่มัธยมศึกษาปีที่สองสูงและสามารถ ic3123 st1 . การแสดงออกของโปรตีนประมาณ 80 / 89 รึเปล่า ) วงดนตรีที่เห็นในพลาสมิดทั้งหมดในขณะที่ที่พ่อแม่สายพันธุ์ล้มเหลวที่จะแสดงเหมือนกัน การทํางานของ สร้าง pakent ( พลาสมิดที่มี pfea ) และ pakfpva ( พลาสมิดกับ fpva ) ถูกตรวจสอบ โดยเปลี่ยนเป็น P . aeruginosa k407 Δ pfea และ P . aeruginosa k437 Δ fpva ตามลำดับ และการตรวจสอบคุณสมบัติเอนไซม์ . การใช้สูตรบวกข้ามเชื้อสายโดย / ที่เกี่ยวข้องและความล้มเหลวที่จะใช้เหมือนกันที่พ่อแม่สายพันธุ์ยืนยันการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้อง ด้านโครงสร้าง และ pakent pakfpva ถูกระดมใน sp . สายพันธุ์ไรโซเบียมและ ic3123 st1 และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการใช้ LED ในพลาสมิดของไซที่เกี่ยวข้องและกระตุ้นการเจริญเติบโตของพลาสมิดในการแสดงตนของแต่ละสายพันธุ์ในชุดการผลิต CO ( การศึกษา ถั่วลิสงและพืชถั่วแระใส่กับ pakent pakfpva สร้างพลาสมิดและไม่เพียง แต่แสดงได้ดี rhizospheric อาณานิคมแต่ยังพบการเจริญเติบโตของพืชดีขึ้น ด้วยความเคารพในการเพิ่มน้ำหนักราก ยิงหนัก จำนวนปมและปริมาณคลอโรฟิลล์ เมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์พ่อแม่ ระหว่างสองโครงสร้าง pakent พบค่อนข้างสูงเพิ่มขึ้นในการตอบสนองการเติบโตเมื่อเทียบกับ pakfpva ซึ่งอาจจะเกิดจากความสัมพันธ์ของ enterobactin ที่สูงสำหรับ fe3 + ( K รึเปล่า = − 1 M ทำไมมันรึเปล่า ) เมื่อเทียบกับ pyoverdine ( K รึเปล่า = − 1 M รึเปล่าต่างหากรึเปล่า )