Annexin V-FITC LabelingPhosphatidyl

Annexin V-FITC Labeling

Phosphatidylserine (PS) exposure at the outer plasma mem-
brane leaflet was measured in annexin-binding assay. Washed

erythrocytes were suspended (1 % Hct) in annexin-binding

buffer containing 140 mM NaCl, 2.5 mM CaCl2, and 10 mM

HEPES/NaOH (pH 7.4 at room temperature). Then the cells

were stained with FITC-annexin V (1:20) in the dark for

15 min, diluted with the same buffer to 0.01 % Hct and

subjected for flow cytometry. Flow cytometric analysis was

performed on EPICS XL cytometer (Beckman Coulter Inc.,

Brea, CA) using SYSTEM II (Version 3.0) software for acqui-
sition and analysis. Annexin V fluorescence intensity was mea-
sured in FL-1 channel set on logarithmic scale with 488 nm

excitation wavelength and 530 nm emission wavelength.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Annexin V FITC ฉลากแสง Phosphatidylserine (PS) ที่หน่วยความจำภายนอกพลา-ใบปลิว brane มีวัดในทดสอบรวม annexin ล้างเม็ดเลือดแดงถูกหยุดชั่วคราว (1% Hct) ในรวม annexinบัฟเฟอร์ที่ มีขนาด 140 มม. NaCl, CaCl2 ขนาด 2.5 มม. 10 มม.HEPES/NaOH (pH 7.4 ที่อุณหภูมิห้อง) เซลล์แล้วถูกย้อม ด้วย FITC annexin V (1:20) ในมืดสำหรับ15 นาที กับบัฟเฟอร์เดียว 0.01% Hct และบังคับสำหรับการตรวจวิเคราะห์เซลล์กระแส Cytometric การวิเคราะห์การไหลได้ดำเนินการในบทมหากาพย์ XL cytometer (Beckman Coulter Inc.ระบายอ CA) โดยใช้ซอฟต์แวร์ระบบ II (รุ่น 3.0) สำหรับกาไรจากการซื้อและการวิเคราะห์ Annexin V เรืองแสงเข้มถูก mea-การณ์ใน FL 1 ช่องตั้งค่ามาตราส่วนลอการิทึมกับ 488 nmไฟฟ้าความยาวคลื่นและความปล่อยยาวคลื่น 530 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Annexin V-FITC ฉลากphosphatidylserine (PS) เปิดรับแสงที่ด้านนอกพลาสม่าหน่วยความbrane ใบปลิววัดใน annexin ผูกพันทดสอบ ล้างเม็ดเลือดแดงถูกระงับ (1% Hct) ใน annexin ผูกพันบัฟเฟอร์ที่มี 140 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, ขนาด 2.5 มม CaCl2 และ 10 มิลลิHEPES / NaOH (pH 7.4 ที่อุณหภูมิห้อง) จากนั้นเซลล์ถูกย้อมด้วยสี FITC-annexin V (01:20) ในที่มืดสำหรับ15 นาที, เจือจางด้วยบัฟเฟอร์เดียวกันกับ 0.01% Hct และยัดเยียดสำหรับ cytometry ไหล การวิเคราะห์การไหลของ cytometric ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับมหากาพย์ XL cytometer (Beckman Coulter อิงค์เบรีย, CA) โดยใช้ระบบการ II (เวอร์ชั่น 3.0) ซอฟต์แวร์สำหรับ acqui- sition และการวิเคราะห์ Annexin V เข้มเรืองแสงถูกเด็ดขาดsured ใน FL-1 ชุดช่องโยลอการิทึมกับ 488 นาโนเมตรความยาวคลื่นกระตุ้นและ 530 นาโนเมตรปล่อยก๊าซเรือนกระจกความยาวคลื่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของเซลล์ v-fitc การติดฉลากฟอสฟาไทดิลเซอรีน ( PS ) เปิดรับที่เมมนอก - พลาสมาเบรน แผ่นพับ ใบปลิว คือวัดในการจับของเซลล์แบคทีเรีย ล้างการหยุดชั่วคราว ( 1 % Hct ) ของเซลล์ ผูกพันบัฟเฟอร์ที่มีขนาด 140 มม. ผลิต 2.5 มม. และ 10 มม.ฮีเปส / NaOH ( pH 7.4 ที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นเซลล์ถูกย้อมด้วยสี fitc ของเซลล์ V ( 1 : 20 ) ในที่มืดสำหรับ15 นาที เจือจางด้วยบัฟเฟอร์ 0.01 % และอัตราเดียวกันที่อยู่ ( ที่ไหล การวิเคราะห์ลักษณะการไหลดำเนินการในมหากาพย์ XL ใช้โมโน ( เบคแมน คูลเตอร์ อิงค์เบรีย , แคลิฟอร์เนีย ) โดยใช้ระบบ II ( รุ่น 3.0 ) ซอฟต์แวร์สำหรับคคุย แตร์ -sition และการวิเคราะห์ การไฟฟ้านครหลวง - ความเข้มของเซลล์ 5 เรืองแน่นอนว่าใน fl-1 ช่องตั้งบนมาตราส่วนลอการิทึมกับ nm 488530 nm ความยาวคลื่นกระตุ้นการปล่อยความยาวคลื่น