Ion exchange chromatography is a pr

Ion exchange chromatography is a process for separating proteins and other molecules in a solution based on differences in net
charge. Negatively charged molecules bind to positively charged solid supports and positively charged molecules bind to
negatively charged supports. To ensure that a protein has a particular net charge, dissolve it in a buffer that is either above or
below its isoelectric point (pI). For example, a protein with a pI of 5 will have a net negative charge if it is in a buffer at pH 7.
In this case, the protein could bind to a positively charged solid support like diethylaminoethanol (DEAE) or Pierce® Strong
Anion Exchange Columns (see the Related Products Section). Conversely, a protein with a pI of 7 will have a positive charge
in a buffer at pH 5 and can bind to a negatively charged solid support such as the Pierce Strong Cation Exchange Columns.
Whether using a cation or anion column, sodium chloride can elute the bound protein. In an anion application, the counter ion
is chloride because the chloride anion is exchanged for the target, which is then released. In a cation application, the counter
ion is sodium because the sodium cation is exchanged for the target. The strength of the electrostatic interaction between a
target and a solid support is a function of the difference in the target pI and the buffer that contains the target. Therefore, a
protein with a pI of 5 will bind more tightly to the anion exchange column if the protein is in a buffer at pH 8 rather than at
pH 7. A protein with a pI of 7 will bind more tightly to the cation column if its buffer is pH 3 rather than pH 4. The greater the
electrostatic charge is, the more concentrated the sodium chloride must be to elute the target.
An alternative to eluting by increasing the salt concentration is to appropriately alter the pH of the buffer. For instance, a
protein with a pI of 5 bound to an anion column at pH 7 will elute by decreasing the pH to below 5. Likewise, a protein with a
pI of 7 bound to a cation column at pH 5 will elute by increasing the pH above 7. Ion exchangers, whether they be salts or
buffering agents, differ in their effectiveness for particular applications. An salt is considered a strong ion exchanger if it
remains almost fully ionized over a wide pH range, and it is considered a weak ion exchanger if it is ionized over a narrow
pH range.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แลกเปลี่ยนไอออน chromatography มีขั้นตอนการแยกโปรตีนและโมเลกุลอื่น ๆ ในการแก้ปัญหาตามความแตกต่างในสุทธิค่าธรรมเนียมการ โมเลกุลส่งชำระผูกกับสนับสนุนคิดค่าธรรมเนียมบวกของแข็ง และโมเลกุลบวกคิดค่าธรรมเนียมผูกกับสนับสนุนส่งชำระ เพื่อให้แน่ใจว่า โปรตีนที่มีเฉพาะค่าสุทธิ ละลายในบัฟเฟอร์ที่อยู่ข้างต้น หรือด้านล่างของ isoelectric ชี้ (ปี่) ตัวอย่าง โปรตีนกับปี่ที่ 5 จะมีประจุสุทธิเป็นค่าลบถ้าเป็นในบัฟเฟอร์ที่ pH 7ในกรณีนี้ โปรตีนสามารถผูกกับการสนับสนุนแข็งคิดค่าธรรมเนียมบวกเช่น diethylaminoethanol (DEAE) หรือแข็ง®เพียร์ซAnion Exchange คอลัมน์ (ดูส่วนผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้อง) ในทางกลับกัน โปรตีนกับปี่ที่ 7 จะมีประจุเป็นบวกในบัฟเฟอร์ที่ pH 5 และสามารถผูกกับการสนับสนุนแข็งคิดค่าธรรมเนียมในเชิงลบเช่นคอลัมน์เพียร์ซแข็ง Cation Exchangeว่าใช้คอลัมน์ cation หรือ anion โซเดียมคลอไรด์สามารถ elute โปรตีนถูกผูกไว้ ในโปรแกรมประยุกต์ anion ไอออนเคาน์เตอร์เป็นคลอไรด์ เพราะ anion คลอไรด์มีการแลกเปลี่ยนสำหรับเป้าหมาย ซึ่งถูกนำออกใช้แล้ว ในโปรแกรมประยุกต์ cation ตัวนับไอออนคือ โซเดียมเนื่องจากการแลกเปลี่ยนโซเดียม cation เป็นเป้าหมาย ความแรงของการโต้ตอบงานระหว่างการเป้าหมายและการสนับสนุนที่แข็งแกร่งเป็นฟังก์ชันของความแตกต่างของปี่เป้าหมายและบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยเป้าหมาย ดังนั้น การโปรตีนกับปี่ที่ 5 จะผูกแน่นมากขึ้นกับคอลัมน์ anion แลกเปลี่ยนว่าโปรตีนในบัฟเฟอร์ ที่ pH 8 แทนที่pH 7 โปรตีนกับปี่ที่ 7 จะผูกแน่นมากขึ้นกับคอลัมน์ cation ถ้าบัฟเฟอร์ที่มี pH 3 แทนค่า pH 4 ยิ่งเป็นค่าสถิต การเข้มข้นมากโซเดียมคลอไรด์ต้อง elute เป้าหมายทางเลือก eluting โดยการเพิ่มความเข้มข้นเกลือจะเปลี่ยน pH ของบัฟเฟอร์อย่างเหมาะสม ตัวอย่าง การโปรตีนกับปี่ที่ 5 ที่ถูกผูกไว้กับคอลัมน์ที่มี anion ที่ pH 7 จะ elute โดยการลด pH ต่ำกว่า 5 โปรตีนในทำนองเดียวกัน มีการปี่กับคอลัมน์ cation ที่ pH 5 7 จะ elute โดยการเพิ่ม pH ข้าง 7 แลกเปลี่ยนไอออน ไม่ว่าจะเป็นเกลือ หรือตัวแทนบัฟเฟอร์ แตกต่างในประสิทธิภาพสำหรับการใช้งานเฉพาะ เกลือถือว่าเป็นการแลกเปลี่ยนไอออนที่แข็งแรงถ้ามันเหลืออยู่เกือบเต็ม ionized กว่าช่วง pH กว้าง และว่าการแลกเปลี่ยนไอออนอ่อนแอถ้าเป็น ionized ผ่านแคบช่วงการวัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคแลกเปลี่ยนไอออนเป็นกระบวนการสำหรับการแยกโปรตีนและโมเลกุลอื่น ๆ ในการแก้ปัญหาบนพื้นฐานของความแตกต่างในสุทธิ
ค่าใช้จ่าย โมเลกุลที่มีประจุลบผูกกับประจุบวกสนับสนุนที่มั่นคงและโมเลกุลประจุบวกผูกกับ
ประจุลบสนับสนุน เพื่อให้แน่ใจว่าเป็นโปรตีนที่มีค่าใช้จ่ายสุทธิโดยเฉพาะอย่างยิ่งละลายในบัฟเฟอร์ที่ด้านบนหรือ
ด้านล่างของจุด Isoelectric (PI) ตัวอย่างเช่นโปรตีน pI 5 จะมีประจุลบสุทธิถ้ามันอยู่ในบัฟเฟอร์ที่ pH 7.
ในกรณีนี้โปรตีนสามารถผูกกับการสนับสนุนที่แข็งแกร่งประจุบวกเช่น diethylaminoethanol (ดีอีเออี) หรือPierce®แข็งแกร่ง
ประจุลบ คอลัมน์แลกเปลี่ยน (ดูมาตราผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้อง) ตรงกันข้ามกับโปรตีน pI 7 จะมีประจุบวก
ในบัฟเฟอร์ที่ pH 5 และสามารถผูกกับประจุลบการสนับสนุนที่เป็นของแข็งเช่นเพียร์ซที่แข็งแกร่งประจุบวกคอลัมน์แลกเปลี่ยน.
ไม่ว่าจะใช้ไอออนบวกหรือคอลัมน์ไอออนโซเดียมคลอไรด์สามารถ elute โปรตีนที่ถูกผูกไว้ ในแอพลิเคชันแอนไอออนไอออนเคาน์เตอร์
เป็นเพราะคลอไรด์ไอออนคลอไรด์มีการแลกเปลี่ยนสำหรับเป้าหมายซึ่งถูกปล่อยออกมาแล้ว ในการประยุกต์ใช้ไอออนบวกเคาน์เตอร์
ไอออนโซเดียมโซเดียมไอออนบวกเพราะมีการแลกเปลี่ยนสำหรับเป้าหมาย ความแข็งแรงของการทำงานร่วมกันไฟฟ้าสถิตระหว่าง
เป้าหมายและการสนับสนุนที่แข็งแกร่งเป็นหน้าที่ของความแตกต่างใน pI เป้าหมายและบัฟเฟอร์ที่มีเป้าหมาย ดังนั้น
โปรตีน pI 5 จะผูกแน่นคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนถ้าโปรตีนที่อยู่ในบัฟเฟอร์ที่ pH 8 มากกว่า
ค่า pH 7. โปรตีน pI ของ 7 จะผูกแน่นคอลัมน์ไอออนบวกถ้า บัฟเฟอร์ของมันคือพีเอช 3 มากกว่าค่าความเป็นกรดมากขึ้น 4.
ประจุไฟฟ้ามีความเข้มข้นมากขึ้นโซเดียมคลอไรด์จะต้องชะเป้าหมาย.
ทางเลือกในการเคลือบโดยการเพิ่มความเข้มข้นของเกลือคือการเปลี่ยนแปลงค่า pH ที่เหมาะสมของบัฟเฟอร์ ยกตัวอย่างเช่น
โปรตีน pI 5 ผูกไว้กับคอลัมน์ไอออนที่ pH 7 จะชะโดยการลดค่า pH ต่ำกว่า 5 ในทำนองเดียวกันโปรตีนที่มี
pI 7 ผูกไว้กับคอลัมน์ไอออนบวกที่ pH 5 จะชะโดยการเพิ่ม ค่า pH ดังกล่าวข้างต้น 7. แลกเปลี่ยนไอออนไม่ว่าจะเป็นเกลือหรือ
ตัวแทนบัฟเฟอร์แตกต่างในประสิทธิภาพของพวกเขาโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการใช้งาน เกลือถือเป็นเครื่องแลกเปลี่ยนไอออนที่แข็งแกร่งถ้ามัน
ยังคงอยู่เกือบจะแตกตัวเป็นไอออนได้อย่างเต็มที่ในช่วงค่า pH กว้างและก็ถือว่าเป็นเครื่องแลกเปลี่ยนไอออนที่อ่อนแอหากมีการแตกตัวเป็นไอออนในช่วงแคบ ๆ
ช่วงพีเอช

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทร้องเป็นกระบวนการแยกโปรตีนและโมเลกุลอื่นๆ ในการแก้ปัญหาบนพื้นฐานของความแตกต่างในสุทธิ
ค่า ซึ่งมีประจุลบ โมเลกุลมีประจุบวก สนับสนุนให้แข็งและมีประจุบวก ประจุลบ โมเลกุล มัด

สนับสนุน เพื่อให้แน่ใจว่า โปรตีนมีเฉพาะประจุสุทธิ ละลายในบัฟเฟอร์ที่ด้านบนหรือ
ด้านล่างของจุดไอโซอิเล็กทริก ( PI ) ตัวอย่างเช่น โปรตีนที่มีปี่ 5 จะมีประจุลบสุทธิ หากอยู่ในบัฟเฟอร์ pH 7 .
ในกรณีนี้ โปรตีนจับกับประจุบวกสนับสนุนอย่างแข็ง diethylaminoethanol ( DEAE ) หรือแทง®คอลัมน์แลกเปลี่ยนแอนไอออนแข็งแรง
( ดูผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้องส่วน ) ในทางกลับกัน โปรตีนกับพี 7 จะมี
ประจุบวกในบัฟเฟอร์พีเอช 5 และสามารถจับกับประจุลบที่แข็งสนับสนุนเช่นแทงคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนบวกที่แข็งแรง ไม่ว่าใช้คอลัมน์หรือ
ประจุไอออนโซเดียมคลอไรด์สามารถ elute ผูกพันโปรตีน มีประจุลบในโปรแกรมเคาน์เตอร์ไอออนคลอไรด์ไอออนคลอไรด์
เป็นเพราะแลกเปลี่ยนเป้าหมาย , ซึ่งถูกปล่อยออกแล้ว . ในการโปรแกรมเคาน์เตอร์
โซเดียมโซเดียมไอออน เนื่องจากการแลกเปลี่ยนเป้าหมาย ความแข็งแรงของแรงดึงดูดทางไฟฟ้าระหว่าง
เป้าหมายและการสนับสนุนที่แข็งแกร่งเป็นฟังก์ชันของความแตกต่างในปี่เป้าหมายและบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยเป้าหมาย ดังนั้น โปรตีนกับ PI
5 จะผูกให้แน่นหนามากขึ้น ในคอลัมน์แลกเปลี่ยนแอนไอออนถ้าโปรตีนในบัฟเฟอร์ pH 8 มากกว่า
pH 7โปรตีนกับปี่ 7 จะผูกให้แน่นหนามากขึ้นไปในคอลัมน์ถ้าบัฟเฟอร์ pH pH เป็น 3 มากกว่า 4 มากขึ้น
ประจุไฟฟ้า ยิ่งความเข้มข้นเกลือโซเดียมคลอไรด์จะต้อง elute เป้าหมาย .
แทน โดยเพิ่มความเข้มข้นของเกลือคือ hexane เหมาะสมการเปลี่ยนแปลง pH ของบัฟเฟอร์
สำหรับอินสแตนซ์โปรตีนกับปี่ 5 ต้องมีประจุลบคอลัมน์ที่ pH 7 จะ elute โดยลด pH ต่ำกว่า 5 อนึ่ง โปรตีนกับ
pi 7 ผูกพันกับประจุบวกของคอลัมน์ที่ pH 5 จะ elute โดยการเพิ่ม pH สูงกว่า 7 แลกเปลี่ยนไอออน ไม่ว่าจะเป็นเกลือ
บัฟเฟอร์หรือตัวแทนที่แตกต่างกันในประสิทธิภาพของพวกเขาสำหรับการใช้งานที่เฉพาะเจาะจง การแลกเปลี่ยนไอออนเกลือถือว่าแรง ถ้ามัน
เหลือเกือบเต็มประจุผ่าน pH ในช่วงกว้าง และมันถือเป็นการแลกเปลี่ยนไอออนที่อ่อนแอ ถ้าเป็นประจุในช่วง pH แคบๆ