Determination of effect of TSCE-W o

Determination of effect of TSCE-W on generation of lipid peroxidation in CCD-1064Sk cells —

The assay was evaluated by using thiobarbituric acid
reactive substances assay according to the slightly
modified method of Chirdchupunseree and
Pramyothin25.
The cells were seeded at a density of 1× 105 cells/mL in a 6-well plate for 24 h. After themedium was removed, the cells were added with
TSCE-W at various concentrations for 24 h.
The cells were washed twice with 1 mL of cold PBS and then
lysed on ice with 300  of 2% SDS for 30 min.
Cell lysate was transferred into a glass tube and adjusted to
1 mL with 2% SDS. A volume of 3 mL of the reaction
mixture contained 950  of the cell lysate, 50 of
4% BHT, 1 mL of 10% phosphotungstic acid, and
1 mL of 0.7% TBA. The mixture was mixed and
heated at 100  for 1 h, cooled and added 4 mL of
n-butanol, centrifuged at 3600 rpm for 10 min. The
supernatant was measured by using a spectrofluorometer
with an excitation wavelength at 515 nm and an
emission wavelength at 553 nm.
MDA level was calculated from a standard curve of TEP.
The results were expressed as nmol MDA/mg protein.
Protein content was determined by Bradford method26.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดลักษณะพิเศษของ TSCE W บนรุ่น peroxidation ของไขมันในเซลล์ CCD 1064Sk —

วิเคราะห์ถูกประเมิน โดยใช้กรด thiobarbituric
assay สารปฏิกิริยาตามเล็กน้อย
ปรับเปลี่ยนวิธีการ Chirdchupunseree และ
Pramyothin25.
เซลล์ถูก seeded ที่ความหนาแน่นของ 1 × 105 เซลล์/มล.ในจาน 6-ดีสำหรับ 24 ชม หลังจากที่ themedium ถูกเอาออก เซลล์เพิ่มด้วย
W TSCE ที่ความเข้มข้นต่าง ๆ สำหรับ 24 h.
เซลล์ถูกล้างสองครั้ง ด้วย 1 mL ของ PBS ที่เย็นแล้ว
lysed บนน้ำแข็งด้วย 300 ของ SDS 2% ใน 30 นาที
เป็นหลอดแก้ว และปรับเซลล์ lysate
mL 1 กับ 2% SDS ปริมาตรของ 3 mL ของปฏิกิริยา
ผสมอยู่ 950 ของเซลล์ lysate, 50 of
4% บาท 1 มิลลิลิตรของกรด phosphotungstic 10% และ
1 mL ของ TBA 0.7% มีผสมส่วนผสม และ
ร้อนที่ 100 สำหรับ 1 h ระบายความร้อนด้วย และเพิ่ม 4 mL ของ
n-บิวทานอ centrifuged ที่ 3600 rpm สำหรับ 10 นาที
Supernatant ถูกวัด โดยใช้การ spectrofluorometer
ด้วยความยาวคลื่นในการกระตุ้นการที่ 515 nm และ
ปล่อยก๊าซความยาวคลื่นที่ 553 nm
ระดับ MDA ถูกคำนวณจากเส้นโค้งมาตรฐานของ TEP
ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น nmol MDA/mg โปรตีน
โปรตีนถูกกำหนด โดย method26 แบรดฟอร์ด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ผลของ tsce-w ในรุ่นของ lipid peroxidation ใน ccd-1064sk เซลล์ -

( จะถูกประเมินโดยใช้ปฏิกิริยาเท่ากับกรด
สาร ( ตามวิธีของ chirdchupunseree ดัดแปลงเล็กน้อย


และ pramyothin25 . เซลล์มีเมล็ดในอัตราความหนาแน่น 1 × 105 เซลล์ / มล. ใน 6-well จานเป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลัง ผู้อ่านจะถูกลบออก , เซลล์เพิ่มด้วย
tsce-w ที่ความเข้มข้นต่างๆเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
เซลล์ก็ล้างสองครั้ง 1 มิลลิลิตรของ PBS หนาวแล้ว
lysed บนน้ำแข็งด้วย 300  2 % SDS 30 นาที
lysate โอนเข้ามือถือหลอดแก้วและปรับเปลี่ยน
1 ml มี 2 % SDS . ปริมาณ 3 ml ของปฏิกิริยา
ส่วนผสมที่มีอยู่ 950 ของเซลล์ lysate 50 ของ
4 % บาท 1 มล. 10 % ฟอสโฟทังสติกแอซิดและ
1 มิลลิลิตร 0.7% TBA .ผสมส่วนผสมที่ผสมและอุณหภูมิ 100 
1 H , เย็นและเพิ่ม 4 ml
n-butanol ไฟฟ้า , ที่ 3600 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที
น่านวัดโดยใช้ spectrofluorometer
กับความตื่นเต้นที่ความยาวคลื่น 515 nm และความยาวคลื่นที่ปล่อย
553 nm . ระดับ
( คำนวณจากเส้นโค้งมาตรฐานของเทพ . ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น ?

( ต่อมิลลิกรัมโปรตีนโปรตีนถูกกำหนดโดยแบรดฟอร์ด method26 .