Whole muscle protein extraction, ge

Whole muscle protein extraction, gel sample preparation and Western blotting for desmin degradation were performed as describedby. Polyacrylamide electrophoresis gels (12.5%) were loaded with 40 μg of the extracted protein sample per well, and transferred to a polyvinylidene fluoride membrane (Immobilon-P, 0.45 μm pore size, Sigma, St. Louis, MO,USA). The membranes were incubated with a primary antibody (monoclonal anti-desmin antibody, D1033; Sigma, St. Louis, MO, USA) and a secondary antibody (goat anti-mouse linked to horse radish peroxidase, No. 170-6516, Bio-Rad Laboratories, Auckland, New Zealand). The qualitative analysis for protein bands were performed using a chemiluminescent detection kit (Pierce ECR Western Blotting Substrate, LF144464A, Meridian Rd., Rockford, IL 61101, USA) and photographed using G-Box: Chem HR 16 (Syngene, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทั้งกล้ามเนื้อโปรตีนสกัด เตรียมตัวอย่างเจ และ blotting วิธีตะวันตกสำหรับย่อยสลาย desmin ได้ดำเนินการเป็น describedby Polyacrylamide gels electrophoresis (12.5%) ถูกโหลด ด้วย μg 40 ของตัวอย่างแยกโปรตีนต่อดี และโอนย้ายไปเยื่อการฟลูออไรด์ polyvinylidene (Immobilon P ขนาดรูขุมขน μm 0.45 ซิก St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) สารมี incubated กับแอนติบอดีหลัก (anti-desmin โมโนแอนติบอดี D1033 ซิกมา St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) และแอนติบอดีรอง (แพะป้องกันเมาส์กับม้าหัวผักกาด peroxidase หมายเลข 170-6516, Bio Rad ห้องปฏิบัติการ โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์) วิเคราะห์คุณภาพของแถบโปรตีนที่ดำเนินการโดยใช้ชุดตรวจ chemiluminescent (เพียร์ซ ECR เวส blotting วิธีพื้นผิว LF144464A เมอริเดียนถนน ร็อคฟอร์ด IL 61101 สหรัฐอเมริกา) และถ่ายภาพโดยใช้กล่อง G: เคมี 16 ชั่วโมง (Syngene สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดโปรตีนของกล้ามเนื้อทั้งเตรียมตัวเจลและเวสเทิร์ blotting สำหรับการย่อยสลาย desmin ได้ดำเนินการเป็น describedby เจลอะคริเลตอิ (12.5%​​) ได้รับการเต็มไปด้วย 40 ไมโครกรัมของกลุ่มตัวอย่างโปรตีนสกัดต่อกันและโอนไปยังเมมเบรนฟลูออไร Polyvinylidene (Immobilon-P, 0.45 ไมโครเมตรขนาดรูขุมขน, Sigma, St. Louis, MO, USA) เยื่อถูกบ่มกับแอนติบอดีหลัก (โมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อต้าน desmin, D1033; ซิกเซนต์หลุยส์ MO, USA) และแอนติบอดีรอง (แพะต่อต้านเมาส์ที่เชื่อมโยงกับ peroxidase หัวไชเท้าม้าเลขที่ 170-6516, Bio- ราดห้องปฏิบัติการ, โอ๊คแลนด์นิวซีแลนด์) การวิเคราะห์เชิงคุณภาพสำหรับวงดนตรีที่โปรตีนได้ดำเนินการโดยใช้ชุดตรวจจับ chemiluminescent (เพียร์ซ ECR ตะวันตกซับพื้นผิว, LF144464A, เมริเดียนถฟอร์ด, IL 61101, USA.) และถ่ายภาพโดยใช้ G-Box: เคมีทรัพยากรบุคคล 16 (Syngene สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กล้ามเนื้อการสกัดโปรตีนทั้งหมด ตัวอย่างการเตรียมเจลและ Western blotting เพื่อการย่อยสลาย desmin มีการปฏิบัติ describedby . โพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีส ( 12.5% ) ถูกโหลด ด้วยμ 40 กรัมของโปรตีนสกัดตัวอย่างต่อได้ดี และโอนไปยังีนฟลูออไรด์เมมเบรน ( immobilon-p 0.45 μ M รูขุมขนขนาด , Sigma , St . Louis , MO , USA )เยื่อถูกบ่มกับแอนติบอดี ( monoclonal แอนติบอดีต่อต้านการ desmin , d1033 ; Sigma , St . Louis , MO , USA ) และระดับแอนติบอดี ( แพะป้องกันเมาส์เชื่อมโยงทั้งมะรุมไม่ 170-6516 ชีวภาพราดห้องปฏิบัติการ , โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์ ) การวิเคราะห์เชิงคุณภาพเพื่อแถบโปรตีนโดยใช้ชุดตรวจสอบ chemiluminescent ( ECR Western blotting เจาะพื้นผิว ,lf144464a , เที่ยงๆ : Rockford , IL 61101 , USA ) และถ่ายภาพโดยใช้ g-box : ฝ่าย HR 16 ( syngene , USA )