2.5. Morphological analysis of Hoec

2.5. Morphological analysis of Hoechst and annexinV/propidium
iodide staining
The apoptotic effect of segetoside I was analyzed via Hoeschst
staining. Briefly, HepG2 cells (2 × 104) were seeded in 6-well plates
for 24 h. Following segetoside Itreatments (0, 0.82, 8.2, 82.0 M)for
different times (24, 48 and 72 h) with 5-FU (0, 9.23, 92.3, 923 M)
as positive control drug, the cells were stained with Hoechst 33342
solution (5 g/mL in 0.1% sodium citrate). The nuclear morphology
of the cells was examined using an inverted fluorescence
microscopy (Nikon TI-U, Japan). Similarly, segetoside I or 5-FU
induced apoptosis in HepG2 cells was also evaluated using annexin
V-propidium iodide double-staining and observed accordingly at
72 h incubation. Fluorescent dyes containing annexin V and propidium
iodide in equal volumes were added to well-washed cell
pellet in phosphate buffer saline (PBS) after centrifugation. Freshly
stained cell suspension was then observed under fluorescence
microscope.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. สัณฐานวิเคราะห์ Hoechst และ annexinV/propidiumไอโอไดด์ย้อมสีผล apoptotic ของฉันถูกวิเคราะห์ผ่าน Hoeschst segetosideย้อมสี สั้น ๆ เซลล์ HepG2 (2 × 104) ถูกเตรียมในดี 6 แผ่นใน 24 ชม ต่อไปนี้ segetoside Itreatments (0, 0.82, 8.2, 82.0 M) สำหรับต่างเวลา (24, 48 และ 72 ชม.) กับ 5-FU (0, 9.23, 92.3, 923 เมตร)เป็นบวกควบคุมยาเสพติด เซลล์ถูกย้อม ด้วย Hoechst 33342โซลูชัน (5 กรัม/มิลลิลิตรใน 0.1% โซเดียมซิเตรต) สัณฐานวิทยานิวเคลียร์ของเซลล์ถูกตรวจสอบโดยใช้การเรืองแสงที่คว่ำกล้องจุลทรรศน์ (Nikon TI-U ญี่ปุ่น) ในทำนองเดียวกัน segetoside ฉันหรือ 5-FUเกิดตายในเซลล์ HepG2 ถูกประเมินด้วยการใช้ annexinไอโอไดด์ V propidium สองย้อมสี และสังเกตตามที่กกไข่ 72 ชม สีย้อมฟลูออเรสเซนต์ที่ประกอบด้วย annexin V และ propidiumล้างดีเซลล์เพิ่มไอโอไดด์ในปริมาณเท่ากันเม็ดในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (PBS) หลังจากการหมุนเหวี่ยง สดใหม่ระงับย้อมเซลล์แล้วพบว่า ภายใต้สภาพการเรืองแสงกล้องจุลทรรศน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวิเคราะห์ทางสัณฐานวิทยาของ Hoechst และ annexinV / propidium
ไอโอไดด์การย้อมสี
ผลที่เกิด apoptosis ของ segetoside ฉันได้รับการวิเคราะห์ผ่าน Hoeschst
การย้อมสี สั้น ๆ , เซลล์ HepG2 (2 × 104) เมล็ดในแผ่น 6 กัน
เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ต่อไปนี้ Itreatments segetoside (0, 0.82, 8.2, 82.0 M) สำหรับ
เวลาที่ต่างกัน (24, 48 และ 72 ชั่วโมง) กับ 5-FU (0, 9.23, 92.3, 923 M)
เป็นยาควบคุมบวกเซลล์ที่ถูกย้อมด้วยสี Hoechst 33342
วิธีการแก้ปัญหา (5 g / ml โซเดียมซิเตรท 0.1%) สัณฐานนิวเคลียร์
ของเซลล์ที่ถูกตรวจสอบโดยใช้การเรืองแสง Inverted
กล้องจุลทรรศน์ (Nikon TI-U, ญี่ปุ่น) ในทำนองเดียวกัน segetoside ฉันหรือ 5 FU
เกิด apoptosis ในเซลล์ HepG2 ก็ยังประเมินโดยใช้ annexin
V-propidium ไอโอไดด์ดับเบิลการย้อมสีและสังเกตตามที่
72 ชั่วโมงบ่ม สีย้อมที่มีฟลูออเร annexin V และ propidium
ไอโอไดด์ในปริมาณที่เท่ากันถูกเพิ่มเข้าไปในเซลล์ที่ล้างสะอาด
เม็ดฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) หลังจากการหมุนเหวี่ยง สด
เซลล์แขวนลอยย้อมสีก็สังเกตเห็นแล้วภายใต้การเรืองแสง
กล้องจุลทรรศน์