Thus, we generated multiplex PCR pr

Thus, we generated multiplex PCR products with VMC1g3.2,
VMC8g9andVMC9h4.2primers in individuals Pecs-06-1/601, Pecs-
06-1/090, Pecs-06-1/006, and Pecs-06-1/036, which represented
Run1−/Ren1−, Run1+/Ren1+, Run1+/Ren1−, and Run1−/Ren1+
genotypes, respectively. We then fractionated the PCR products
in 1.2% agarose and 4% high-resolution MetaPhor® agarose gels.
While the 1.2% routine agarose is suitable for separating the resistant
genotypes from the sensitive ones only with VMC1g3.2, we
could reliably detect the various allele sizes with VMC8g9 and
VMC9h4.2 in 4% MetaPhor® agarose gel (Fig. 4a). The exact allele
sizes were already known as they had been previously determined
with the ALF Express apparatus (Fig. 1). The individual inheriting
the allele linked to the Run1 PM resistance gene (size: 160 bp) of
the BC4 parent shows Run1+ genotype, the individual inheriting the
allele linked to the Ren1 PM resistance gene (size: 286 bp) of Kishmish
vatkana shows Ren1+ genotype, while the individual carrying
both resistance genes shows Run1+/Ren1+ genotype. This method
is suitable for separating the resistant individuals also through
agarose-based electrophoresis. Fig. 4b demonstrates these results
in a barcode format.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดังนั้น เราสร้างผลิตภัณฑ์ที่ multiplex PCR มี VMC1g3.2VMC8g9andVMC9h4.2primers ในบุคคล Pecs-06-1/601, Pecs-06-1/090, Pecs-06-1/006 และ Pecs-06-1/036 ซึ่งแสดงถึงRun1−/Ren1−, Run1 + /mts Ren1 + Run1 + /mts Ren1− และ Run1− / Ren1 +ศึกษาจีโนไทป์ ตามลำดับ เราได้แบ่งผลิตภัณฑ์ PCR แล้วใน 1.2% agarose และ 4% ความละเอียดสูงเทียบ® agarose เจในขณะที่ 1.2% agarose ประจำเหมาะสำหรับแยกทนการศึกษาจีโนไทป์จากคนสำคัญเท่ากับ VMC1g3.2 เราได้พบ allele ขนาดกับ VMC8g9 และVMC9h4.2 ใน 4% เทียบ® agarose เจล (Fig. 4a) Allele แน่นอนขนาดมีแล้วรู้จักจะได้รับก่อนหน้านี้กับ ALF Express เครื่อง (Fig. 1) สืบทอดแต่ละallele เชื่อมโยงกับยีนต้านทาน Run1 PM (ขนาด: 160 bp) ของหลัก BC4 แสดง Run1 + ลักษณะทางพันธุกรรม การสืบทอดแต่ละallele ที่เชื่อมโยงกับยีนต้านทาน Ren1 PM (ขนาด: 286 bp) ของ Kishmishแสดงในขณะที่ถือครองแต่ละ vatkana Ren1 + ลักษณะทางพันธุกรรมยีนต้านทานทั้งสองแสดง Run1 + /mts Ren1 + ลักษณะทางพันธุกรรม วิธีการนี้เหมาะสำหรับแยกบุคคลทนยังผ่านใช้ agarose electrophoresis Fig. 4b แสดงให้เห็นถึงผลลัพธ์เหล่านี้ในรูปแบบบาร์โค้ด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดังนั้นเราจึงสร้างผลิตภัณฑ์ PCR multiplex กับ VMC1g3.2,
VMC8g9andVMC9h4.2primers ในบุคคลที่เพซ-06-1 / 601 Pecs-
06-1 / 090, เพซ-06-1 / 006 และเพซ-06-1 / 036, ซึ่งเป็นตัวแทน
Run1- / Ren1-, Run1 + / Ren1 + Run1 + / Ren1- และ Run1- / Ren1 +
ยีนตามลำดับ จากนั้นเราจะ fractionated ผลิตภัณฑ์ PCR
ใน 1.2% agarose และ 4% มีความละเอียดสูงMetaPhor®เจล agarose.
ในขณะที่ 1.2% ประจำ agarose
เหมาะสำหรับการแยกทนยีนจากคนที่มีความสำคัญเฉพาะกับVMC1g3.2
เราได้อย่างน่าเชื่อถือสามารถตรวจสอบต่างๆขนาดที่มีอัลลีล VMC8g9 และ
VMC9h4.2 ใน 4% MetaPhor®เจล agarose (รูป. 4a) อัลลีลที่แน่นอนขนาดเป็นที่รู้จักกันอยู่แล้วขณะที่พวกเขาได้รับการพิจารณาก่อนหน้านี้ที่มีอุปกรณ์อาล์ฟเอ็กซ์เพรส(รูปที่ 1). แต่ละสืบทอดอัลลีลที่เชื่อมโยงกับ Run1 PM ยีนต้านทาน (ขนาด 160 bp) ของผู้ปกครองBC4 แสดงจีโนไทป์ Run1 + บุคคลสืบทอดที่อัลลีลที่เชื่อมโยงกับRen1 PM ยีนต้านทาน (ขนาด: 286 bp) ของ Kishmish vatkana แสดงจีโนไทป์ Ren1 + ในขณะที่การดำเนินการของแต่ละบุคคลยีนต้านทานทั้งแสดงให้เห็นRun1 + / + Ren1 จีโนไทป์ วิธีนี้เหมาะสำหรับการแยกบุคคลที่ทนยังผ่านอิagarose ตาม มะเดื่อ. 4b แสดงให้เห็นถึงผลลัพธ์เหล่านี้ในรูปแบบบาร์โค้ด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดังนั้นเราจึงได้สร้างผลิตภัณฑ์ เทคนิค multoplex PCR กับ vmc1g3.2
, vmc8g9andvmc9h4.2primers ในบุคคล pecs-06-1 / 601 , เพซ -
06-1 / 090 pecs-06-1 / , 006 , และ pecs-06-1 / 036 ซึ่งแทน
run1 / ren1 −− , ren1 run1 run1 / , / ren1 −−และ run1 / ren1
สายพันธุ์ ตามลำดับ เราพบผลิตภัณฑ์ PCR
ใน 1.2 % และ 4 % , ความละเอียดสูง , การ®เจล .
ตอนที่ 12% ตามปกติ ( เหมาะสำหรับแยกชนิดทน
จากคนที่อ่อนไหวกับ vmc1g3.2 เรา
อาจเชื่อถือตรวจสอบขนาดต่าง ๆและกลุ่มที่มี vmc8g9
vmc9h4.2 4 % การ®เจล ( รูปที่ 4 ) ขนาดกลุ่มที่ได้รู้จัก
อย่างที่พวกเขาเคยเป็น ก่อนหน้านี้ ตัดสินใจ
กับอัลฟ์ แสดงเครื่องมือ ( รูปที่ 1 ) บุคคลสืบทอด
กลุ่มที่เชื่อมโยงกับยีนต้านทาน run1 PM ( ขนาด : 160 BP )
bc4 run1 genotype ผู้ปกครองแสดง บุคคลสืบทอด
อัลลีลที่เชื่อมโยงกับ ren1 PM ต้านทานยีน ( ขนาด : 286 bp ) ของ kishmish
vatkana แสดง ren1 พันธุกรรม ในขณะที่แสดงให้เห็นแต่ละคนแบก
ทั้งยีนต้านทาน run1 / ren1 พันธุกรรม . วิธีนี้เหมาะสำหรับการแยกบุคคล

ทนยังผ่าน( ตัวอย่างตาม รูปที่ 4B แสดงผลลัพธ์ในรูปแบบบาร์โค้ด

เหล่านี้ .