After determination of oxygen consu

After determination of oxygen consumption and ammonia excretion rates, fish were euthanised by an overdose of 3-aminobenzoic acid ethylester (MS222; 1 g l− 1), equilibrated to the pH of each salinity by the addition of NaHCO3 and intense bubbling. Fish were then quickly rinsed in water of the appropriate salinity, water excess was gently removed by a paper tissue, and a blood sample was taken by caudal amputation. The blood was collected in a pre-cooled heparinised syringe (~ 16 units ml blood−1; lithium salt, Sigma), transferred to a 100 μl tube and centrifuged at 12,000 g for 5 min at 4 °C. Plasma osmolality was then measured in a vapour pressure osmometer (Wescor 5520; Wescor Inc., South Logan, UT, USA). While the blood sample was in the centrifuge, whole gill baskets were excised, placed in a 1.5 ml microcentrifuge tube, snap frozen in liquid N2 and stored (~ 1 month) at − 80 °C for later NKA activity determination.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากการกำหนดปริมาณการใช้ออกซิเจนและอัตราการขับถ่ายแอมโมเนีย ปลามี euthanised โดยการใช้ยาเกินขนาดของ 3 aminobenzoic กรด ethylester (MS222; l− 1 g 1), equilibrated การวัดค่า pH ความเค็มแต่ละ โดยการเพิ่ม NaHCO3 และมีฟองอากาศรุนแรง ปลามี แล้วล้างในน้ำความเค็มที่เหมาะสมได้อย่างรวดเร็ว น้ำส่วนเกินเบา ๆ ออกไปเยื่อกระดาษ และถ่ายเป็นเลือด โดยครีบเหมือนน้อง รวบรวมเลือดในเข็มฉีดยา heparinised เย็นล่วงหน้า (~ 16 หน่วย ml blood−1 เกลือลิเทียม Sigma), โอนท่อ 100 μl และเหวี่ยงที่ 12,000 g 5 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส พลาสม่า osmolality ถูกแล้ววัด osmometer ความดันไอ (Wescor 5520 Wescor Inc. โลแกนใต้ UT สหรัฐอเมริกา) ในขณะที่ตัวอย่างเลือดในเครื่องหมุนเหวี่ยง เหงือกทั้งตะกร้าสรรพสามิต วางท่อไมโคร 1.5 ml ถ่าย N2 เหลวแช่ และเก็บ (~ 1 เดือน) ที่− 80 ° C การวัดกิจกรรมของ NKA ภายหลัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากการใช้ออกซิเจนและแอมโมเนียขับถ่ายอัตราปลา euthanised โดยยาเกินขนาดของ 3-aminobenzoic ethylester กรด (MS222 1 gl- 1), equilibrated ค่าพีเอชของแต่ละความเค็มโดยนอกเหนือจาก NaHCO3 และเดือดรุนแรง ปลานั้นก็ล้างได้อย่างรวดเร็วในน้ำของความเค็มที่เหมาะสมเกินกว่าน้ำจะถูกลบออกเบา ๆ จากเนื้อเยื่อกระดาษและตัวอย่างเลือดที่ถูกยึดครองโดยการตัดหาง เลือดมีการรวบรวมก่อนระบายความร้อนด้วยเข็มฉีดยาสาร heparinised (~ 16 หน่วยมล. เลือด 1; ลิเธียมเกลือซิกม่า) โอนไปยังหลอด 100 ไมโครลิตรและหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 กรัมเป็นเวลา 5 นาทีที่ 4 ° C พลาสม่า osmolality วัดแล้วใน Osmometer ความดันไอ (Wescor 5520; Wescor อิงค์, เซาโลแกน, UT, USA) ในขณะที่ตัวอย่างเลือดที่อยู่ในเครื่องหมุนเหวี่ยง, กระเช้าเหงือกทั้งถูกตัดวางไว้ในหลอดไมโคร 1.5 มล. จังแช่แข็งในของเหลว N2 และเก็บไว้ (~ 1 เดือน) ที่ - 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลาภายหลังการกำหนดกิจกรรม NKA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากการกำหนดปริมาณการใช้ออกซิเจน และแอมโมเนียราคาปลาถูก euthanised โดยยาเกินขนาดของ 3-aminobenzoic กรด ethylester ( ms222 1 G L − 1 ) equilibrated ทำให้ค่าพีเอชของแต่ละความเค็มโดยการเติมโซเดียมไบคาร์บอเนตเข้มข้นฟอง . ปลารีบล้างในน้ำความเค็มที่เหมาะสมน้ำส่วนเกินออกด้วยกระดาษทิชชู เบา และตัวอย่างเลือดถูกหาง ตัดขา เลือดที่ถูกรวบรวมไว้ในก่อนเย็น heparinised เข็ม ( ~ 16 หน่วย ml เลือด− 1 ; เกลือลิเธียม , Sigma ) โอนไป 100 μผมหลอดไฟฟ้าที่ 12000 G สำหรับ 5 นาทีที่ 4 ° C ค่าออสในพลาสมาก็วัดความดันออสโมมิเตอร์ ( wescor 5520 ; wescor อิงค์ ทางใต้ของโลแกน ยูทาห์สหรัฐอเมริกา ) ในขณะที่ตัวอย่างเลือดในเหงือกทั้งหมดถูกตัดเครื่อง ตะกร้าวางไว้ใน 1.5 ml หลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ ถ่ายเหลว และเก็บแช่แข็งในไนโตรเจน ( ~ 1 เดือน 80 ° C ) ที่ บริษัท เวสเทิร์น ภายหลังกิจกรรม nka ความมุ่งมั่น