The 2009 H1N1 pandemic H1N1 influen

The 2009 H1N1 pandemic H1N1 influenza (flu) A
(pdmH1N1) was first reported in Mexico and California
[1]. As the virus spread globally, it became evident that
the infection was of moderate severity with a broad clin-ical spectrum of symptoms [2]. Early data from Mexico
suggested that pdmH1N1 may cause severe respiratory
illness in otherwise healthy young and middle-aged
people [3]. It is now estimated that in the United States
pdmH1N1 caused higher rates of hospitalizations and
deaths in children and adults 18–64 years of age than
the flu of the previous season, but lower rates of clinical
events in adults over 65 years of age [4]. This finding
supports the notion that previous exposures to H1N1 in
older individuals provides higher cross-protective immune
responses than in younger individuals [5]. In the autumn
of 2009, pdmH1N1 vaccines (pdm vaccines) were available
across the globe, it was estimated that pdmH1N1 vac-cination prevented 4,000–10,000 hospitalizations and
200–500deathsinthe US [6].
There are several unanswered questions concerning
H1N1 flu infection and vaccination. Firstly, the impact
of previous immune responses induced by flu vaccina-tions or by flu exposures on the ability to mount new
anti-flu immune responses [7-9]. It is therefore of inter-est to map the adaptive humoral and cellular immune
response prior to vaccination and prior to the onset of
flu symptoms. Secondly, the differential quality and
quantity of humoral and cellular immune responses di-rected against flu targets, induced either by flu vaccin-ation or by flu infection, has not been well defined.
Thirdly, several reports have discussed a‘silent infection’
with H1N1 (in non-vaccinated participants), yet the real
extent of such a silent infection is difficult to determine—
in part due to cross-reacting antibodies (Abs) (from pre-vious exposures or vaccines) [10]. Antibodies, as well as
CD4+ and cytotoxic CD8+ T-cell immune responses,
play a critical role in the host defense against flu [11,12].
Increased cellular reactivity to flu, defined by IFN-γ
production—a key cytokine in the pro-inflammatory re-sponse to flu—in participants who have not experienced
influenza-like (ILI) symptoms, has not been determined
up to now, this may help to identify silent flu infection.
In order to address these questions, we designed a
prospective study of participants living in the Stockholm
area in the context of the LifeGene (LG) project [13] to
map in detail the breadth of the cellular immune re-sponsespriorto the onset of ILI symptoms and prior to
vaccination with the pdm flu vaccine to study i) pre-existing immune responses, ii) the association of ILI
symptoms with vaccination, iii) cellular immune reactiv-ity during the flu season 2009–2010, directed against a
broad panel of flu pathogens. This prospective study was
designed to decipher differences in immune responses
induced by infection with pdmH1N1 and the pdm vac-cine, and this is the first report to describe in an unbiased
fashion humoral and cellular immune responses during
the pdmH1N1 infection in 2009–2010 in Sweden.
Methods
Study participants
2,040 study participants from Stockholm (Sweden) en-tered the baseline step of the ILI study in September 2009,
a part of the LG project [13]. For details see the Additional
file 1: Text Material S1. Serum and heparin blood samples
were drawn at study entry and after the flu season in the
spring of 2010. Prepaid envelopes and nasal swabs were
provided to participants after they had received instruc-tions at the LifeGene study centres before study entry.
Participants contacted the LG centres at the onset of ILI
symptoms, filled out a questionnaire and mailed the (viral)
swab for PCR analysis as described in detail in the supple-mentary data sets. If swabs tested positive for flu or cor-onavirus RNA, a home visit was payed during which an
additional nasal swab and a blood sample from the index
study participant and the household members was ob-tained. (The mean time between the first swab and the
home visit was 2.5 weeks). The study was approved by the
Ethics committee Stockholm south review board (DN
2009/1183-31) and each study participant provided in-formed consent. Swedish residents were offered the pdm
vaccine Pandemrix (GSK) containing A/ H1N1/California/
7/2009 (with AS03 adjuvant, i.e. DL-α-tocopherol, squa-lene and polysorbate).
Functional T-cell assay - whole-blood antigen stimulation
assay
FortyμL of heparinised blood was diluted 1:5 in RPMI
1640 with L-glutamine (2 mM), penicillin (100 IU/mL)
and streptomycin (10 mg/mL), and processed as described
in detail in the supplementary data section (Additional
file 1). The whole-blood antigen (WBA) stimulation assay
measures the‘net’ IFN-γproduction elaborated by CD4+
and CD8+ T-cells in whole blood and reflects the activity
of memory T-cell responses. We tested several flu antigens
from previous monovalent flu vaccines, composed of
haemagglutinin (HA) and neuraminidase (N) from flu A
or B strains, for the capacity to elicit IFN-γresponses in
T-cells: A/H1N1/Brisbane/59/2007, A/H1N1/Solomon
Islands/3/2006, A/H3N2/Uruguay/716/2007, A/H3N2/
Wisconsin/67/2005, B/Malaysia/2506/2004, B/Florida/
4/2006, or A/H5N1/Vietnam/1203/2004, all provided
by Baxter Innovations GmbH (Vienna, Austria). They
were used at a final concentration of 2.5μg/mL HA. We
also tested the flu matrix antigens M1 and M2 present as
peptides, and used at a final concentration of 1μg/mL. As
control, we used the CFP-10 antigen fromMycobacterium
tuberculosis. We could not include the A/H1N1/California/
Magalhaeset al. BMC Infectious Diseases2014,14:319 Page 2 of 12
http://www.biomedcentral.com/1471-2334/14/319
7/2009 antigens in the cellular assays, since the test plates
had to be prepared in advance due to quality control issues
to ensure batch-to-batch consistency; the pdmH1N1 anti-gen preparation was not yet available in the summer of
2009 and the assay worked only with freshly obtained
heparinised blood. In contrast to the cellular assay, Ab titres
could be tested retrospectively.
Swab processing and PCR analysis
If study participants experienced symptoms of ILI, they
performed a nasal swab to be tested for 22 viral targets
(Additional file 1: Table S1) as described [14]. Swab pro-cessing and PCR are described in detail in the supplemen-tary data section (Additional file 1: Text Material S1). This
step was taken to link ILI symptoms with the detection of
defined viral pathogens. In addition, if the PCR tested
positive for H1N1, a nurse visited the participant 14 days
(on average) after onset of symptoms in order to obtain a
blood sample, which allowed study of the humoral and
cellular immune response early after infection. This was
also performed for participants infected with coronavirus
as a control group.
Ab determination - single radial haemolysis test
Sera, collected at study entry and after the flu season in
the spring of 2010, and during a home visit in case of a
positive H1N1 or coronavirus PCR (detected from a nasal
swab), were stored at −80°C until testing. Single radial
haemolysis (SRH) test against A/H1N1/California/07/2009
was performed at the Department of Physiopathology, Ex-perimental Medicine and Public Health of the University
of Siena according to procedures described in detail else-where [15]. Diameters of the haemolysis area for each
serum tested were measured. Sera with areas of haemoly-sis equal to or higher than 4 mm
2
but lower than 25 mm
2
were considered to indicate seropositivity but not protec-tion; haemolysis areas equal to or higher than 25 mm
2
were considered to indicate seroprotection.
Statistical analysis
Statistical analysis was performed on (i) the IFN-γconcen-trations as a cellular response to flu and non-flu antigens,
(ii) the PCR-based virus detection, (iii) the SRH Ab data,
and (iv) the questionnaire data including symptoms re-ported in a web-based questionnaire by the study partici-pants during and after the flu season. Data were analysed
using SAS 9.2 software (SAS Institute). Descriptive statis-tics were used and Spearman analysis for independence
was performed to verify integrity of data. Significance ana-lysis was performed using the Pearson χ
2
-test, Student’s
t-test, and the Wilcoxon-Mann–Whitney two-sample
rank-sum test. Multivariate operations, including opera-tions on stratified variable dependencies and cluster
analysis (using the VARCLUS procedure), were used in
the analysis based on the combined dataset constitu-ents, i.e. IFN-γ, PCR, antigen-specific Abs, symptoms,
and vaccination. For each analysis, the nature of the
statistical test used is indicated in the corresponding
figure legend and table

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2009 H1N1 ระบาด H1N1 ไข้หวัดใหญ่ (ไข้หวัด) A(pdmH1N1) มีรายงานครั้งแรกในเม็กซิโกและรัฐแคลิฟอร์เนีย[1] เป็นไวรัสแพร่กระจายทั่วโลก มันกลายเป็นชัดที่เชื้อมีความรุนแรงปานกลางกับรุ้ง clin ical กว้างอาการ [2] ข้อมูลช่วงจากเม็กซิโกแนะนำ pdmH1N1 ที่อาจเกิดรุนแรงหายใจเจ็บป่วยสุขภาพเด็ก และวัยกลางคนคน [3] ตอนนี้คาดว่าในสหรัฐอเมริกาpdmH1N1 ทำให้ราคาสูงของ hospitalizations และเสียชีวิตในเด็กและผู้ใหญ่อายุมากกว่า 18-64 ปีไข้หวัดใหญ่ฤดูกาลก่อนหน้า แต่ราคาต่ำกว่าของทางคลินิกเหตุการณ์ในผู้ใหญ่กว่า 65 ปี [4] ค้นหานี้สนับสนุนแนวคิดที่ถ่ายก่อนหน้านี้กับ H1N1 ในบุคคลรุ่นเก่าให้ราคาสูงขนป้องกันภูมิคุ้มกันตอบสนองมากกว่าในแต่ละวัย [5] ในฤดูใบไม้ร่วงปี 2552, pdmH1N1 รู้ (รู้ pdm) มีทั่วโลก มันได้ประมาณ 4000 – 10000 hospitalizations ทำที่ pdmH1N1 vac-cination และ200 – 500deathsinthe สหรัฐอเมริกา [6]มีหลายคำถามที่ยังไม่ได้ตอบเกี่ยวกับติดเชื้อไข้หวัด H1N1 และฉีดวัคซีน ประการแรก ผลกระทบของการตอบสนองภูมิคุ้มกันก่อนหน้านี้เกิด โดย vaccina-tions ไข้หวัด หรือไข้หวัดถ่ายความสามารถในการกำหนดใหม่ตอบการภูมิคุ้มกันต้านไข้หวัด [7-9] จึงของอินเตอร์ est ต้องคุ้ม humoral และโทรศัพท์มือถือที่เหมาะสมตอบ ก่อนการฉีดวัคซีน และ ก่อนเริ่มมีอาการของอาการไข้หวัด ประการที่สอง คุณภาพแตกต่าง และปริมาณของ rected di humoral และโทรศัพท์มือถือการตอบสนองภูมิคุ้มกันต่อต้านไข้หวัดเป้าหมาย เกิด โดย vaccin-ation ของไข้หวัด หรือไข้หวัดติด เชื้อ ไม่ได้รับที่กำหนดไว้ประการ รายงานหลายฉบับได้กล่าวถึงการติดเชื้อ a'silent'มี H1N1 (เป็นไม่ฉีดร่วม), แต่จริงขอบเขตของเชื้อเงียบเป็นเรื่องยากที่จะกำหนดโดยส่วนหนึ่งเนื่องจากแอนตี้ cross-reacting (Abs) (จาก vious ก่อนถ่ายหรือรู้) [10] แอนตี้ เป็นCD4 + และ cytotoxic CD8 + T เซลล์ภูมิคุ้มกันตอบสนองเล่นบทบาทสำคัญในการป้องกันโฮสต์กับไข้หวัด [11,12]เพิ่มเซลล์เกิดปฏิกิริยาการไข้หวัด กำหนด โดย IFN-γผลิต – อย่างไร cytokine คีย์ใน re-sponse pro-อักเสบกับไข้หวัดซึ่งในคนที่มีประสบการณ์อาการคล้ายไข้หวัดใหญ่ (คารา) ไม่มีการกำหนดถึงตอนนี้ นี้อาจช่วยระบุติดเชื้อไข้หวัดใหญ่เงียบการคำถามเหล่านี้ เรามาเป็นศึกษาอนาคตของผู้เรียนที่อาศัยอยู่ในสตอกโฮล์มพื้นที่ในบริบทของโครงการ LifeGene (แอลจี) [13] เพื่อแผนที่รายละเอียดขอบเซลภูมิคุ้มกันอีกครั้ง-sponsespriorto เริ่มมีอาการหรืออาการ และก่อนวัคซีนกับวัคซีนไข้หวัด pdm เรียนฉัน) ตอบสนองภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ก่อน ii) หรือสมาคมอาการ มีวัคซีน iii) เซลภูมิคุ้มกัน reactiv-ity ในช่วงไข้หวัดใหญ่ฤดูกาล 2009 – 2010 ตรงกับแผงกว้างของโรคไข้หวัด มีผู้สนใจศึกษาออกแบบมาเพื่อถอดรหัสความแตกต่างในการตอบสนองภูมิคุ้มกันเกิดจากการติดเชื้อ pdmH1N1 กับ pdm vac-cine และนี้คือรายงานเพื่ออธิบายในการคนแรกแฟชั่น humoral และมือถือตอบสนองภูมิคุ้มกันในระหว่างติดเชื้อ pdmH1N1 ในปี 2009-2010 ในสวีเดนวิธีการผู้เข้าร่วมศึกษา2,040 ศึกษาผู้เข้าร่วมจากสตอกโฮล์ม (สวีเดน) น้ำ-tered ขั้นตอนพื้นฐานของการศึกษาหรือในเดือน 2009 กันยายนเป็นส่วนหนึ่งของโครงการแอลจี [13] สำหรับรายละเอียดดูเพิ่มเติมไฟล์ 1: S1 วัสดุข้อความ ตัวอย่างเลือดซีรั่มและเฮพารินได้ออกรายการศึกษา และหลัง จากฤดูไข้หวัดใหญ่ในการฤดูใบไม้ผลิ 2010 ซองจดหมายล่วงหน้าและ swabs โพรงจมูกให้กับผู้เรียนหลังจากที่พวกเขาได้รับ instruc-tions ที่ศูนย์ศึกษา LifeGene ก่อนที่จะศึกษารายการผู้เข้าร่วมติดต่อศูนย์ LG อย่างคาราอาการ กรอกแบบสอบถาม และส่งแบบ (ไวรัส)กวาดสำหรับ PCR วิเคราะห์ในรายละเอียดของชุดข้อมูลนุ่ม mentary ถ้า swabs ตรวจไข้หวัดใหญ่หรือประกอบ-onavirus อาร์เอ็นเอ เยี่ยมชมบ้านประทับซึ่งเป็นกวาดโพรงจมูกเพิ่มเติมและตัวอย่างเลือดจากดัชนีผู้เข้าร่วมศึกษาและสมาชิกในครัวเรือนมี ob tained (เวลาเฉลี่ยระหว่างกวาดแรกและเยี่ยมชมบ้านได้ 2.5 สัปดาห์) การศึกษาได้รับการอนุมัติโดยการจริยธรรมกรรมการสต็อกโฮล์มใต้คณะกรรมการ (DN2009/1183 - 31) และแต่ละผู้เข้าร่วมศึกษาให้จัดในความยินยอม ชาวสวีเดนได้เสนอ pdmวัคซีน Pandemrix (GSK) ประกอบด้วย A / H1N1/แคลิฟอร์เนีย /7/2009 กับประเมิน AS03 เช่น DL-α-tocopherol งาน lene และ polysorbate)ทำงาน T เซลล์ทดสอบ - ตรวจหาทั้งเลือดกระตุ้นวิเคราะห์FortyμL heparinised เลือดถูกแตกออก 1:5 ใน RPMI1640 กับ L-glutamine (มม. 2), ยาเพนนิซิลลิน (100 IU/mL)และ streptomycin (10 mg/mL), และประมวลผลตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดในส่วนข้อมูลเสริม (เพิ่มเติมแฟ้ม 1) ทดสอบกระตุ้นเลือดทั้งตรวจหา (WBA)วัด the'net' IFN γproduction elaborated โดย CD4 +และ CD8 + T-เซลล์ทั้งหมดเลือด และสะท้อนให้เห็นถึงกิจกรรมหน่วยความจำ T เซลล์ตอบสนอง เราทดสอบไข้หวัด antigens หลายจากก่อนหน้านี้ไข้หวัด monovalent รู้ ประกอบด้วยhaemagglutinin (ฮา) และ neuraminidase (N) จากไข้หวัดใหญ่ Aหรือสาย พันธุ์ B กำลังการผลิตเพื่อให้ได้รับ IFN-γresponses ในเซลล์ T: A/H1N1/บริสเบน/59/2007, A/H1N1/โซโลมอนเกาะ/3/2549, A/H3N2/อุรุกวัย/716/2007 เป็น H3N2 /B/ฟลอริดา, B/มาเลเซีย/2506/2004, วิสคอนซิน/67/2005 /4/2006 หรือ A/H5N1/เวียดนาม/1203/2004 ทั้งหมดให้โดย Baxter นวัตกรรม GmbH (เวียนนา ออสเตรีย) พวกเขาใช้ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.5μg / mL ฮา เรานอกจากนี้ยัง ทดสอบ antigens M1 และ M2 ปัจจุบันเป็นเมตริกซ์ไข้หวัดเปปไทด์ และใช้ในความเข้มข้นสุดท้ายของ 1μg/mL เป็นควบคุม เราใช้ fromMycobacterium ตรวจหา CFP-10วัณโรค เราไม่สามารถรวม A/H1N1/แคลิฟอร์เนีย /Magalhaeset al. BMC ติดเชื้อ Diseases2014, 14:319 2 หน้า 12http://www.biomedcentral.com/1471-2334/14/3197/2009 antigens ใน assays โทรศัพท์มือถือ ตั้งแต่แผ่นทดสอบมีการเตรียมล่วงหน้าเนื่องจากปัญหาการควบคุมคุณภาพเพื่อให้สอดคล้องกันชุดงานชุดงาน เตรียมป้องกัน gen pdmH1N1 มีไม่ได้ในฤดูร้อนของ2009 และทดสอบการทำงานเท่ากับได้รับสดเลือด heparinised ตรงข้ามการทดสอบโทรศัพท์มือถือ Ab titresอาจจะทดสอบย้อนหลังได้กวาดประมวลผลและวิเคราะห์ PCRถ้าศึกษาอาการมีประสบการณ์ร่วมหรือ พวกเขาดำเนินการกวาดโพรงจมูกจะทดสอบสำหรับเป้าหมาย 22 ไวรัส(เพิ่มเติมไฟล์ 1: ตาราง S1) เป็นอธิบาย [14] อธิบายในรายละเอียดในส่วนของข้อมูล supplemen หมุนกวาด pro-cessing และ PCR (เพิ่มเติมไฟล์ 1: S1 วัสดุข้อความ) นี้ขั้นตอนที่ถูกนำไปเชื่อมโยงหรืออาการ มีการตรวจพบกำหนดโรคไวรัส นอกจากนี้ ถ้า PCR ที่ทดสอบค่าบวกสำหรับ H1N1 พยาบาลเข้าเรียน 14 วัน(โดยเฉลี่ย) หลังจากเริ่มมีอาการอาการเพื่อรับการตัวอย่างเลือด ซึ่งได้ศึกษาการ humoral และการตอบสนองภูมิคุ้มกันมือถือช่วงหลังจากการติดเชื้อ นี้นอกจากนี้ยัง ดำเนินการสำหรับคนที่ติดเชื้อ coronavirusเป็นกลุ่มควบคุมกำหนด Ab - ทดสอบ haemolysis รัศมีเดียวจะ รวบรวมรายการการศึกษา และหลัง จากฤดูไข้หวัดใหญ่ในฤดูใบไม้ผลิ 2010 และ ระหว่างบ้านไปในกรณีของการH1N1 หรือ coronavirus PCR (ตรวจพบจากนาสิกเป็นบวกกวาด), ถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C จนกว่าจะทดสอบ รัศมีเดียวhaemolysis (SRH) ทดสอบกับ A/H1N1/แคลิฟอร์เนีย/07/2009ทำที่แผนก Physiopathology, perimental อดีตแพทย์ และสาธารณสุขของมหาวิทยาลัยซีเอนาตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ในรายละเอียดอื่น [15] ปัจจุบันพื้นที่ haemolysis สำหรับแต่ละซีรั่มทดสอบที่วัด จะ มี haemoly sis เท่ากับ หรือสูงกว่า 4 มม.2แต่ต่ำกว่า 25 มม.2ได้ถือส่อ seropositivity แต่ไม่โพรเทคสเตรชัน พื้นที่ haemolysis เท่ากับ หรือสูงกว่า 25 มม.2ได้พิจารณาเพื่อบ่งชี้ seroprotectionวิเคราะห์ทางสถิติทำการวิเคราะห์ทางสถิติตาม (i) IFN-γconcen-trations เป็นการตอบสนองมือถือกับไข้หวัดและไข้หวัดใหญ่ไม่ใช่ antigens(ii) การตรวจพบไวรัสผล, (iii) SRH Ab ข้อมูลและ (iv) ข้อมูลแบบสอบถามรวมทั้งอาการการส่งในแบบสอบถามบนเว็บ โดยศึกษา partici-กางเกงระหว่าง และ หลังฤดูไข้หวัดใหญ่ ข้อมูลมี analysedใช้ซอฟต์แวร์ SAS 9.2 (SAS สถาบัน) ใช้ statis tics อธิบาย และวิเคราะห์ Spearman เอกราชที่ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความถูกต้องของข้อมูล ทำสำคัญอนา lysis ใช้ Pearson χ2-ทดสอบ นักเรียนt-ทดสอบ และ Wilcoxon-มานน์ – วิทนีย์สองตัวอย่างอันดับผลการทดสอบ ตัวแปรพหุการดำเนินงาน รวมทั้งโอเปร่า-tions บน stratified อ้างอิงตัวแปรและคลัสเตอร์การวิเคราะห์ (ใช้กระบวนการ VARCLUS), ใช้ในการวิเคราะห์โดยใช้การรวมชุดข้อมูล constitu-ents เช่น IFN-γ PCR ตรวจหาเฉพาะ Abs อาการและฉีดวัคซีน สำหรับแต่ละการวิเคราะห์ ลักษณะของการแสดงสถิติทดสอบที่ใช้ในให้สอดคล้องกับรูปคำอธิบายแผนภูมิและตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2009 H1N1 H1N1 ระบาดไข้หวัดใหญ่ (ไข้หวัด)
(pdmH1N1) มีรายงานครั้งแรกในเม็กซิโกและแคลิฟอร์เนีย
[1] เป็นไวรัสที่แพร่กระจายไปทั่วโลกมันก็เห็นได้ชัดว่า
การติดเชื้อเป็นความรุนแรงในระดับปานกลางกับสเปกตรัม Clin-iCal ในวงกว้างของอาการ [2] ข้อมูลจากเม็กซิโกในช่วงต้น
ชี้ให้เห็นว่า pdmH1N1 อาจก่อให้เกิดระบบทางเดินหายใจอย่างรุนแรง
การเจ็บป่วยในแข็งแรงหนุ่มสาวและวัยกลาง
คน [3] ตอนนี้มันเป็นที่คาดกันว่าในประเทศสหรัฐอเมริกา
pdmH1N1 เกิดจากราคาที่สูงขึ้นของการรักษาในโรงพยาบาลและ
เสียชีวิตในเด็กและผู้ใหญ่ 18-64 ปีกว่า
ไข้หวัดของฤดูกาลที่ผ่านมา แต่อัตราการลดลงของคลินิก
เหตุการณ์ในผู้ใหญ่กว่าอายุ 65 ปี [4 ] การค้นพบนี้
สนับสนุนความคิดที่ว่าความเสี่ยงก่อนที่ H1N1 ใน
ผู้ที่มีอายุมากกว่ามีภูมิคุ้มกันสูงขึ้นข้ามป้องกัน
การตอบสนองกว่าในบุคคลที่อายุน้อยกว่า [5] ในฤดูใบไม้ร่วง
ของปี 2009 วัคซีน pdmH1N1 (วัคซีน PDM) ที่มีอยู่
ทั่วโลกมันเป็นที่คาดว่า pdmH1N1 Vac-cination ป้องกัน 4,000-10,000 รักษาในโรงพยาบาลและ
200-500deathsinthe สหรัฐ [6].
มีหลายคำถามที่ยังไม่เกี่ยวกับการที่มี
การติดเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ H1N1 และ การฉีดวัคซีน ประการแรกผลกระทบ
ของการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันที่ก่อนหน้านี้ที่เกิดจากไข้หวัด vaccina tions หรือโดยความเสี่ยงไข้หวัดความสามารถในการติดตั้งใหม่
ป้องกันไข้หวัดการตอบสนองภูมิคุ้มกัน [7-9] ดังนั้นจึงเป็นเรื่องของอินเตอร์คือเพื่อแมร่างกายปรับตัวและภูมิคุ้มกันของเซลล์
ตอบสนองก่อนที่จะมีการฉีดวัคซีนและก่อนที่จะเริ่มมีอาการของ
อาการคล้ายไข้หวัดใหญ่ ประการที่สองที่มีคุณภาพแตกต่างและ
ปริมาณของการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายและโทรศัพท์มือถือ di-rected กับเป้าหมายไข้หวัดเหนี่ยวนำทั้งโดยไข้หวัด ation-Vaccin หรือจากการติดเชื้อไข้หวัดยังไม่ได้รับการกำหนดไว้อย่างดี.
ประการที่สามรายงานหลายได้กล่าวถึงการติดเชื้อ a'silent '
กับ H1N1 (ในผู้เข้าร่วมที่ไม่ได้รับการฉีดวัคซีน) แต่จริง
ขอบเขตของการติดเชื้อดังกล่าวเงียบเป็นเรื่องยากที่จะ determine-
ในส่วนหนึ่งเนื่องจากแอนติบอดีข้ามปฏิกิริยา (ABS) (จากความเสี่ยงก่อน vious หรือวัคซีน) [10] แอนติบอดีเช่นเดียวกับ
CD4 + และ cytotoxic CD8 + T-cell การตอบสนองภูมิคุ้มกันของร่างกาย
มีบทบาทสำคัญในการป้องกันโฮสต์ป้องกันไข้หวัด [11,12].
เพิ่มปฏิกิริยามือถือเพื่อไข้หวัดกำหนดโดย IFN-γ
การผลิตไซโตไคน์ที่สำคัญในอาชีพ -inflammatory การตอบอีกครั้งเพื่อไข้หวัดใหญ่ในผู้เข้าร่วมที่ไม่ได้มีประสบการณ์
คล้ายไข้หวัดใหญ่ (ILI) อาการยังไม่ได้รับการพิจารณา
ถึงตอนนี้นี้อาจช่วยในการระบุการติดเชื้อไข้หวัดเงียบ.
เพื่อที่จะตอบคำถามเหล่านี้เราได้รับการออกแบบ
ในอนาคต การศึกษาของผู้เข้าร่วมที่อาศัยอยู่ในกรุงสตอกโฮล์ม
พื้นที่ในบริบทของ LifeGene (LG) โครงการ [13]
แผนที่ในรายละเอียดความกว้างของภูมิคุ้มกันของเซลล์ใหม่ sponsespriorto เริ่มมีอาการของอาการ ILI และก่อนที่จะ
ฉีดวัคซีนกับวัคซีนไข้หวัดใหญ่ PDM เพื่อการศึกษา i) ที่มีอยู่ก่อนการตอบสนองภูมิคุ้มกัน ii) สมาคม ILI
อาการด้วยการฉีดวัคซีน, iii) ภูมิคุ้มกันของเซลล์ reactiv-ity ในช่วงฤดูไข้หวัด 2009-2010 กำกับกับ
แผงกว้างของเชื้อโรคไข้หวัด การศึกษาในอนาคตนี้ได้รับการ
ออกแบบมาเพื่อถอดรหัสความแตกต่างในการตอบสนองภูมิคุ้มกัน
ที่เกิดจากการติดเชื้อและ pdmH1N1 PDM Vac-ภาพยนตร์และนี่คือรายงานครั้งแรกที่จะอธิบายในเป็นกลาง
humoral แฟชั่นและการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันของเซลล์ในระหว่าง
การติดเชื้อใน pdmH1N1 2009-2010 ในสวีเดน .
วิธีการ
เข้าร่วมการศึกษา
2,040 เข้าร่วมการศึกษาจากสตอกโฮล์ม (สวีเดน) en-อกขั้นตอนพื้นฐานของการศึกษา ILI ในเดือนกันยายนปี 2009
ส่วนหนึ่งของโครงการแอลจีได้ [13] สำหรับรายละเอียดดูเพิ่มเติม
ไฟล์ที่ 1: ข้อความวัสดุ S1 เซรั่มและตัวอย่างเลือดเฮ
ถูกดึงที่เข้าร่วมการศึกษาและหลังฤดูไข้หวัดใหญ่ใน
ฤดูใบไม้ผลิของปี 2010 ซองเติมเงินและแผ่นจมูกถูก
ให้กับผู้เข้าร่วมหลังจากที่พวกเขาได้รับตามคำสั่งข้อที่ศูนย์การศึกษา LifeGene ก่อนที่จะเข้าร่วมการศึกษา.
ผู้เข้าร่วมรับการติดต่อ LG ศูนย์ที่การโจมตีของ ILI
อาการกรอกแบบสอบถามและส่งทางไปรษณีย์ (ไวรัส)
ไม้กวาดสำหรับการวิเคราะห์ PCR ตามที่อธิบายในรายละเอียดในชุดข้อมูลนุ่ม-mentary หากแผ่นทดสอบบวกสำหรับไข้หวัดหรือคร-onavirus RNA, เยี่ยมบ้านถูก payed ในระหว่างที่
เช็ดล้างจมูกเพิ่มเติมและตัวอย่างเลือดจากดัชนี
ผู้เข้าร่วมการศึกษาและสมาชิกในครัวเรือนที่ถูก OB-tained (เวลาเฉลี่ยระหว่างไม้กวาดแรกและ
เยี่ยมบ้านเป็น 2.5 สัปดาห์) การศึกษาได้รับการอนุมัติจาก
คณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยในสตอกโฮล์มใต้คณะกรรมการตรวจสอบ (DN
2009 / 1183-1131) และผู้เข้าร่วมการศึกษาแต่ละให้ความยินยอมในการที่เกิดขึ้น ที่อาศัยอยู่ในสวีเดนถูกนำเสนอ PDM
วัคซีน Pandemrix (GSK) ที่มี A / H1N1 / แคลิฟอร์เนีย /
7/2009 (พร้อมเสริม AS03 คือ DL-α-โทโคฟีรอ SQUA-Lene และ Polysorbate).
ฟังก์ชั่นการทดสอบ T-cell - แอนติเจนทั้งเลือด กระตุ้น
การทดสอบ
FortyμLเลือดสาร heparinised ถูกเจือจาง 1: 5 ใน RPMI
1640 ที่มี L-glutamine (2 มิลลิเมตร) ยาปฏิชีวนะ (100 IU / mL)
และ streptomycin (10 mg / ml) และการประมวลผลตามที่อธิบาย
ในรายละเอียดในส่วนข้อมูลเพิ่มเติม (เพิ่มเติม
แฟ้ม 1) แอนติเจนทั้งเลือด (WBA) ทดสอบการกระตุ้น
มาตรการ the'net 'IFN-γproductionเนื้อหาโดย CD4 +
และ CD8 + T เซลล์ในเลือดและสะท้อนให้เห็นถึงกิจกรรม
ของการตอบสนอง T-cell หน่วยความจำ เราได้ทดสอบแอนติเจนไข้หวัดหลาย
จากวัคซีนไข้หวัดใหญ่ monovalent ก่อนหน้านี้ประกอบด้วย
haemagglutinin (HA) และ neuraminidase (N) จากไข้หวัด
หรือพันธุ์ B สำหรับความสามารถที่จะล้วงเอาγresponses IFN-ใน
เสื้อเซลล์: A / H1N1 / บริสเบน / 59 / 2007 / H1N1 / Solomon
Islands / 3/2006 / H3N2 / อุรุกวัย / 716/2007, A / H3N2 /
วิสคอนซิน / 67/2005, B / มาเลเซีย / 2506/2004, B / ฟลอริดา /
4/2006 หรือ A / H5N1 / เวียดนาม / 1203/2004 ทั้งหมดให้
โดยแบ็กซ์เตอร์นวัตกรรม GmbH (เวียนนา, ออสเตรีย) พวกเขา
ถูกนำมาใช้ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ2.5μg / mL HA เรา
ยังผ่านการทดสอบแอนติเจนเมทริกซ์ไข้หวัด M1 และ M2 ปัจจุบันเป็น
เปปไทด์และใช้ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ1μg / มิลลิลิตร ในขณะที่
การควบคุมเราใช้แอนติเจน CFP-10 fromMycobacterium
วัณโรค เราไม่อาจรวมถึง A / H1N1 / แคลิฟอร์เนีย /
Magalhaeset อัล บีเอ็มซีติดเชื้อ Diseases2014,14: 319 หน้า 2 จากทั้งหมด 12
http://www.biomedcentral.com/1471-2334/14/319
7/2009 แอนติเจนในการตรวจเซลล์ตั้งแต่แผ่นทดสอบ
จะต้องมีการเตรียมล่วงหน้าเนื่องจากคุณภาพ ปัญหาการควบคุม
เพื่อให้แน่ใจว่าชุดต่อชุดสอดคล้อง; เตรียม pdmH1N1 ต่อต้าน Gen ก็ยังไม่สามารถใช้ได้ในช่วงฤดูร้อนของ
ปี 2009 และการทดสอบการทำงานเฉพาะกับได้รับสด
เลือดสาร heparinised ในทางตรงกันข้ามกับการทดสอบโทรศัพท์มือถือ, คำบรรยาย Ab
สามารถทดสอบย้อนหลัง.
การประมวลผลและการวิเคราะห์ Swab PCR
หากเข้าร่วมการศึกษาประสบการณ์อาการ ILI พวกเขา
ดำเนินการเช็ดล้างจมูกจะผ่านการตรวจ 22 เป้าหมายไวรัส
(แฟ้มเพิ่มเติม 1: ตาราง S1) ตามที่อธิบายไว้ [ 14] ไม้กวาดประมวลโปร PCR และมีการอธิบายในรายละเอียดในส่วนของข้อมูล supplemen-Tary (แฟ้มเพิ่มเติม 1: ข้อความวัสดุ S1) นี้
ขั้นตอนที่ถูกนำไปเชื่อมโยงอาการ ILI มีการตรวจสอบของ
เชื้อโรคไวรัสที่กำหนดไว้ นอกจากนี้หาก PCR ทดสอบ
ในเชิงบวกสำหรับ H1N1, พยาบาลไปเยี่ยมผู้เข้าร่วม 14 วัน
(โดยเฉลี่ย) หลังจากมีอาการเพื่อให้ได้
ตัวอย่างเลือดที่ได้รับอนุญาตการศึกษาของร่างกายและ
การตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันของเซลล์ต้นหลังจากการติดเชื้อ นี้ได้รับการ
ดำเนินการสำหรับผู้เข้าร่วมการติดเชื้อ coronavirus
เป็นกลุ่มควบคุม.
มุ่งมั่น Ab - รัศมีเดียวเม็ดเลือดแตกทดสอบ
เซราเก็บที่เข้าร่วมการศึกษาและหลังฤดูไข้หวัดใหญ่ใน
ฤดูใบไม้ผลิของปี 2010 และในระหว่างการเยี่ยมบ้านในกรณีของการ
บวก H1N1 หรือ coronavirus PCR (ตรวจพบจากจมูก
ไม้กวาด) ถูกเก็บไว้ที่ -80 ° C จนการทดสอบ เดี่ยวรัศมี
เม็ดเลือดแตก (SRH) การทดสอบกับ A / H1N1 / แคลิฟอร์เนีย / 07/2009
ได้รับการดำเนินการที่กรม physiopathology อดีต Perimental แพทย์และสาธารณสุขของมหาวิทยาลัย
ของเซียน่าเป็นไปตามขั้นตอนที่อธิบายในรายละเอียดอื่น-ที่ [15] เส้นผ่าศูนย์กลางของพื้นที่เม็ดเลือดแตกสำหรับแต่ละ
ซีรั่มการทดสอบวัด ซีรั่มที่มีพื้นที่ของ haemoly-SIS เท่ากับหรือสูงกว่า 4 มม
2
แต่ต่ำกว่า 25 มม
2
ได้รับการพิจารณาเพื่อระบุ seropositivity แต่ไม่คุ้มครอง-การ; พื้นที่เม็ดเลือดแตกเท่ากับหรือสูงกว่า 25 มม
2
ได้รับการพิจารณาเพื่อระบุ seroprotection.
การวิเคราะห์ทางสถิติ
การวิเคราะห์สถิติที่ดำเนินการเกี่ยวกับ (i) IFN-γconcen-trations เป็นการตอบสนองมือถือเพื่อไข้หวัดและแอนติเจนที่ไม่ใช่ไข้หวัด,
(ii) PCR- ตามการตรวจหาไวรัส (iii) ข้อมูล SRH AB,
และ (iv) ข้อมูลแบบสอบถามรวมทั้งอาการอีกครั้งในรังเพลิงแบบสอบถามบนเว็บโดยการศึกษา partici กางเกงในระหว่างและหลังฤดูไข้หวัดใหญ่ วิเคราะห์ข้อมูล
โดยใช้ซอฟต์แวร์ SAS 9.2 (SAS Institute) พรรณนาสถิติการ-สำบัดสำนวนถูกนำมาใช้และการวิเคราะห์สเปียร์แมนเป็นอิสระ
ได้รับการดำเนินการเพื่อตรวจสอบความสมบูรณ์ของข้อมูล ความสำคัญ ana-สลายได้รับการดำเนินการโดยใช้เพียร์สันχ
2
-test, นักเรียน
t-test และ Wilcoxon-Mann-Whitney สองตัวอย่าง
การทดสอบอันดับผลรวม การดำเนินงานหลายตัวแปรรวมทั้งโอเปร่า tions บนอ้างอิงตัวแปรแบ่งชั้นและคลัสเตอร์
การวิเคราะห์ (โดยใช้ขั้นตอน VARCLUS) ถูกนำมาใช้ใน
การวิเคราะห์บนพื้นฐานของชุดรวม constitu-บิดาคือ IFN-γ, PCR, Abs แอนติเจนเฉพาะอาการ
และ การฉีดวัคซีน สำหรับการวิเคราะห์แต่ละลักษณะของ
การทดสอบทางสถิติที่ใช้จะแสดงในที่สอดคล้อง
ตำนานรูปและตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2009 H1N1 ระบาด H1N1 ไข้หวัดใหญ่ ( Flu )
( pdmh1n1 ) ถูกรายงานครั้งแรกในเม็กซิโกและแคลิฟอร์เนีย
[ 1 ] เป็นไวรัสที่แพร่กระจายไปทั่วโลก มันเป็นที่เห็นได้ชัดว่า
โรคปานกลางความรุนแรงหลากหลายสำหรับ iCal สเปกตรัมของอาการ [ 2 ] ข้อมูลแรกจากเม็กซิโก
แนะนำว่า pdmh1n1 อาจก่อให้เกิดโรคในระบบทางเดินหายใจรุนแรง
มิฉะนั้นสุขภาพหนุ่มสาวและวัยกลางคน
คน [ 3 ]มันคือประมาณว่าในสหรัฐอเมริกา
pdmh1n1 ทำให้อัตราที่สูงขึ้นของลิ่มเลือดและ
ตายในเด็กและผู้ใหญ่ 18 – 64 ปีของอายุกว่า
ไข้หวัดของฤดูกาลก่อนหน้า แต่ต่ำกว่าอัตราของคลินิก
เหตุการณ์ในผู้ใหญ่อายุเกิน 65 ปี [ 4 ] นี้การค้นหา
สนับสนุนความคิดที่ว่าก่อนหน้านี้ชม H1N1 ใน
บุคคลเก่าให้สูงขึ้นป้องกันภูมิคุ้มกัน
ข้ามการตอบสนองมากกว่าบุคคลที่น้อง [ 5 ] ในฤดูใบไม้ร่วงของปี 2009 pdmh1n1 วัคซีน (
,
) PDM ) ที่มีอยู่ทั่วโลก มันคือประมาณว่า pdmh1n1 Vac cination ป้องกัน 4000 – 10000 ลิ่มเลือดและ
200 – 500deathsinthe เรา [ 6 ] .
มีหลายคำถามที่ยังไม่มีคำตอบเกี่ยวกับการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ H1N1
และการฉีดวัคซีน ประการแรกผลกระทบ
ก่อนหน้าการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันไข้หวัดหรือไข้หวัดใหญ่ vaccina tions exposures ในภูเขาใหม่
ป้องกันไข้หวัดตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน [ 4-5 ] จึง est ระหว่างแผนที่และการปรับ humoral ของเซลล์ภูมิคุ้มกัน
ก่อนให้วัคซีนและก่อนที่จะเริ่มมีอาการของ
อาการไข้หวัด ประการที่สอง เปรียบเทียบคุณภาพและ
ปริมาณของ humoral และเซลล์ภูมิคุ้มกันตอบสนองต่อเป้าหมายไข้หวัดดิ กำกับ ชักนำให้ โดยวัคซีนไข้หวัด หรือติดเชื้อไข้หวัดใหญ่โดย ation , ยังไม่ได้รับหมายดี .
3 หลายรายงานได้กล่าวถึงการติดเชื้อ ' a'silent
กับ H1N1 ( ไม่ฉีดวัคซีนให้ผู้เข้าร่วม ) , ยังจริง
ขอบเขตของเชื้อดังกล่าว ยากที่จะระบุได้เงียบ -
ในส่วนหนึ่งเนื่องจากข้ามปฏิกิริยาแอนติบอดี ( ABS ) ( ก่อนการ vious หรือวัคซีน ) [ 10 ] แอนติบอดีรวมทั้ง
CD4 และเป็นพิษต่อเซลล์ CD8 จากภูมิคุ้มกันตอบสนอง
มีบทบาทสําคัญในโฮสต์ป้องกันไข้หวัดใหญ่ [ 11,12 ] .
) เซลล์ ต่อไข้หวัด , กําหนดโดย อินเตอร์เฟียรอน - γ
production-a คีย์ไซโตไคน์ใน sponse Re pro-inflammatory กับไข้หวัดในผู้เข้าร่วมที่ไม่ได้มีประสบการณ์
ไข้หวัดใหญ่ ( หรือ ) อาการยังไม่ตัดสินใจ
ถึงตอนนี้ นี้อาจช่วยระบุการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่เงียบ
เพื่อที่อยู่ปัญหาเหล่านี้ เราได้ออกแบบ
ศึกษาอนาคตของผู้ที่อาศัยอยู่ในพื้นที่สตอกโฮล์ม
ในบริบทของ lifegene ( LG ) โครงการ [ 13 ]
แผนที่ใน รายละเอียด ความกว้างของ Re ของเซลล์ทางภูมิคุ้มกัน sponsespriorto มีอาการหรือก่อน

และวัคซีนกับ PDM วัคซีนไข้หวัดใหญ่ เพื่อศึกษา 1 ) ตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ 2 ) สมาคมหรือ
อาการด้วยวัคซีน 3 ) ity reactiv ของเซลล์ทางภูมิคุ้มกันในช่วงไข้หวัด 2009 – 2010 , กำกับกับ
แผงกว้างของเชื้อโรคไข้หวัดใหญ่ การศึกษาอนาคตนี้
ออกแบบมาเพื่อถอดรหัสความแตกต่างในการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อด้วย
pdmh1n1 และ PDM Vac ภาพยนตร์ ,และนี่คือรายงานแรกที่อธิบายในที่เป็นกลาง
แฟชั่น humoral และเซลล์ตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในระหว่างการติดเชื้อ
pdmh1n1 ในปี 2552 – 2553 ในสวีเดน


วิธีการศึกษาผู้ศึกษาผู้เข้าร่วม 2040 จากสตอกโฮล์ม ( สวีเดน ) และ tered ขั้นตอนพื้นฐานของพวกเขา การศึกษา ในเดือนกันยายน 2009
เป็นส่วนหนึ่งของโครงการแอลจี [ 13 ] สำหรับรายละเอียดดูเพิ่มเติม
ไฟล์ 1 ข้อความวัสดุ S1 .