3. Results and discussion Anthropog

3. Results and discussion
Anthropogenic activities have led to metal pollution in the water bodies as it threatened some of the aquatic Fatimah Hashim et al. / Procedia Environmental Sciences 30 ( 2015 ) 15 – 20 17 organism and this includes the free-living amoebae. Decreasing population of amoebae due to the presence of heavy metal will leads to imbalance of the natural ecosystem as amoebae act as predator for bacteria. The presence of heavy metal in the aquatic environments makes them a suitable toxicant to be evaluated for their effects towards amoebae. To date, there are only a few reports on cytotoxic and genotoxic effects of heavy metal on amoebae like cadmium, mercury, lead and zinc on these free-living amoebae [7]. However, there are no study focusing the effect of Mn on Acanthamoeba. Therefore, it is important to evaluate the effect of Mn towards Acanthamoeba as it would indicate the presence of exceed level of Mn in aquatic environment. 3.1 Determination of Mn Fifty percent inhibition concentration (IC50) on Acanthamoeba sp. In this study, Acanthamoeba sp. were exposed to various concentrations of Mn i.e 0, 30, 60, 90, 120, 150 and 180 ppm for 24 hours at 30qC in a 96-well plate to determine the cytotoxicity of the metal. The MTT assay was carried out to assess the viability of Acanthamoeba sp. Fig.1 shows the graph of viability of cell against different concentrations of Mn. Based on the graph, the IC50 value obtained was 24 ppm and Acanthamoeba sp. showed the reduction in viability upon exposure to increasing in Mn concentration. Fig 1. Percentage of viability of Acanthamoeba sp. cells assessed by MTT assay exposure to Mn for 24 hours. IC50 value obtained was 24 ppm IC50 value was obtained by using MTT assay with a slight modification on its protocol. After the cells were treated with Mn at varying concentrations for 24 hours at 30o C in a 96-well plate, the medium in the plate was discarded. The plate was washed with PBS solution 3 times before loading the MTT solution. This is to ensure that the glucose content in the medium was completely removed. Presence of glucose in the medium will reduce the efficiency of MTT reaction. MTT specific activity are reduced by cells that are extensively metabolized D-glucose [11]. Cytotoxicity of Mn on Acanthamoeba sp. was determined based on the percentage of viable Acanthamoeba sp. after exposure to Mn for 24 hours at 30o C. In general, the viability of Acanthamoeba sp. decreased with increasing concentrations of Mn (Fig. 1). This shows that the growth of the cells was affected once exposed to Mn. The concentration of Mn that inhibit 50% of the cell population was 24 ppm. The lower IC50 of Mn shows that it has higher toxicity to Acanthamoeba sp. compared to Zn which showed an IC50 of 39 ppm [7]. This shows that Mn have higher toxicity compares to Zn since the IC50 of Mn was lower than Zn. Based on the periodic table of element, Mn have a less stable electron configuration which is [Ar]4s2 3d5 compares to Zn with electronic configuration of [Ar]4s2 3d10. This is supported by Martin-Gonzalez et al. [12] by stating that toxicity of heavy metals decrease with increased stability of electron configuration. In addition, heavy metals have high attraction to negatively-charged group of protein and thiol group [13]. Any alteration that occurs in these proteins will lead to dysfunction of certain enzymes in which may affect certain metabolic reactions in the cell. This phenomenon may have also occurred in Acanthamoeba sp.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนา กิจกรรมที่มาของมนุษย์ได้นำไปสู่มลพิษโลหะในแหล่งน้ำมันถูกคุกคามของ et al. น้ำของฟาฏิมะฮ์ฮาชิม / 30 วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม Procedia (2015) 15 – 20 17 สิ่งมีชีวิตและนี้มี free-living amoebae การลดประชากรของ amoebae เนื่องจากโลหะหนักจะนำไปสู่ความไม่สมดุลของระบบนิเวศธรรมชาติเป็น amoebae ทำหน้าที่เป็นนักล่าสำหรับแบคทีเรีย ของโลหะหนักในสภาพแวดล้อมทางน้ำทำให้พวกเขา toxicant ที่เหมาะสมเพื่อสามารถประเมินผลของพวกเขาต่อ amoebae วันที่ มี อยู่เพียงไม่กี่รายงานเกี่ยวกับ cytotoxic และ genotoxic ผลกระทบของโลหะหนักเช่นแคดเมียม ปรอท amoebae นำ และสังกะสีบน amoebae free-living เหล่านี้ [7] อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาไม่เน้นผลของ Mn Acanthamoeba ดังนั้น จึงเป็นสิ่งสำคัญในการประเมินผลของ Mn ต่อ Acanthamoeba มันจะแสดงสถานะของเกินระดับของ Mn ในน้ำ 3.1 การกำหนดของ Mn ยับยั้งห้าสิบเปอร์เซ็นต์ความเข้มข้น (IC50) บน Acanthamoeba sp ในการศึกษานี้ Acanthamoeba sp.ได้สัมผัสกับความเข้มข้นต่าง ๆ ของ Mn อาทิ 0, 30, 60, 90, 120, 150 และ 180 ppm ตลอด 24 ชั่วโมงที่ 30qC ในจานดี 96 กำหนด cytotoxicity ของโลหะ วิเคราะห์ MTT ได้ดำเนินการเพื่อประเมินศักยภาพของ Acanthamoeba sp.ภาพแสดงกราฟชีวิตของเซลล์เทียบกับความเข้มข้นของ Mn ตามที่บนกราฟต่าง ๆ ค่า IC50 ได้ถูก 24 ppm และ Acanthamoeba sp.ที่พบว่าการลดในชีวิตเมื่อเปิดรับแสงเพื่อเพิ่มความเข้มข้นของ Mn ฟิก 1 เปอร์เซ็นต์ของชีวิตของ Acanthamoeba sp.เซลล์ประเมินตาม MTT assay Mn 24 ชั่วโมง ได้ค่า IC50 ได้ 24 ppm ค่า IC50 กล่าว โดย MTT assay มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อยในการโพรโทคอล หลังจากที่เซลล์ได้รับ Mn ที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน 24 ชั่วโมงที่ 30o C จานดี 96 ปานกลางในจานถูกละทิ้ง จานไม่ล้าง ด้วย PBS โซลูชัน 3 ครั้งก่อนโหลดโซลูชัน MTT ทั้งนี้เพื่อให้แน่ใจว่า เนื้อหากลูโคสในสื่อได้ถูกเอาออกอย่างสมบูรณ์ ของน้ำตาลกลูโคสในการจะลดประสิทธิภาพของปฏิกิริยา MTT กิจกรรม MTT จะลดลงตามเซลล์ที่มีอย่างกว้างขวาง metabolized D-กลูโคส [11] กำหนด cytotoxicity ของ Mn ใน Acanthamoeba sp.ตามเปอร์เซ็นต์ของ Acanthamoeba sp.ที่ทำงานได้หลังจากสัมผัสกับ Mn ที่ 30o C. 24 ชั่วโมง ทั่วไป ชีวิตของ Acanthamoeba sp.ลดลง ด้วยการเพิ่มความเข้มข้นของ Mn (Fig. 1) แสดงการเจริญเติบโตของเซลล์ได้รับผลครั้งเดียวสัมผัสกับ Mn ความเข้มข้นของ Mn ที่ขัดขวาง 50% ของประชากรเซลล์ 24 หน้าต่อนาที IC50 Mn ต่ำแสดงว่า มีความเป็นพิษสูงถึง Acanthamoeba sp.ที่เทียบกับ Zn ซึ่งแสดงให้เห็น IC50 39 หน้า/นาที [7] นี้แสดงว่า Mn มีเปรียบเทียบความเป็นพิษสูงกับ Zn ตั้งแต่ IC50 Mn มีต่ำกว่า Zn Mn ตามตารางธาตุขององค์ประกอบ มีน้อยการจัดเรียงอิเล็กตรอนมีเสถียรภาพซึ่งเป็น 4s2 [Ar] 3d 5 เปรียบเทียบกับ Zn กับโครงแบบอิเล็กทรอนิกส์ของ 4s2 [Ar] 3d 10 นี้จะได้รับการสนับสนุนโดย Gonzalez มาร์ตินเอ็ด al. [12] โดยระบุว่า ความเป็นพิษของโลหะหนักลดมีเสถียรภาพเพิ่มขึ้นของการจัดเรียงอิเล็กตรอน นอกจากนี้ โลหะหนักได้น่าสนใจสูงคิดในเชิงลบกลุ่มของโปรตีนและกลุ่ม thiol [13] แก้ไขใด ๆ ที่เกิดขึ้นในโปรตีนเหล่านี้จะนำไปสู่ความผิดปกติของเอนไซม์บางอย่างที่อาจส่งผลกระทบต่อบางปฏิกิริยาเผาผลาญในเซลล์ ปรากฏการณ์นี้อาจยังเกิดขึ้นใน Acanthamoeba sp

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.
ผลการอภิปรายและกิจกรรมAnthropogenic ได้นำไปสู่มลพิษโลหะในร่างกายของน้ำในขณะที่มันขู่ว่าบางส่วนของน้ำ Fatimah ฮิมอัลเอต / Procedia วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม 30 (2015) 15-20 17 และชีวิตนี้รวมถึงอะมีบาที่อาศัยอยู่ฟรี การลดจำนวนประชากรของอะมีบาเนื่องจากการปรากฏตัวของโลหะหนักที่จะนำไปสู่ความไม่สมดุลของระบบนิเวศธรรมชาติว่าเป็นการกระทำอะมีบาเป็นนักล่าสำหรับแบคทีเรีย การปรากฏตัวของโลหะหนักในสภาพแวดล้อมที่น้ำทำให้พวกเขาเป็นสารพิษที่เหมาะสมที่จะได้รับการประเมินผลกระทบที่มีต่ออะมีบา ในวันที่มีเพียงไม่กี่รายงานพิษและผลกระทบ genotoxic ของโลหะหนักเช่นแคดเมียมอะมีบาปรอทตะกั่วและสังกะสีในอะมีบาเหล่านี้อาศัยอยู่ฟรี [7] แต่มีการศึกษามุ่งเน้นไปที่ผลกระทบของ Mn ใน Acanthamoeba ไม่มี ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญในการประเมินผลของแมงกานีสที่มีต่อ Acanthamoeba มันจะบ่งบอกถึงการปรากฏตัวของระดับเกินของแมงกานีสในน้ํา 3.1 การกำหนด Mn ห้าสิบเปอร์เซ็นต์ความเข้มข้นของการยับยั้ง (IC50) บน Acanthamoeba SP ในการศึกษานี้ Acanthamoeba SP ได้สัมผัสกับความเข้มข้นต่างๆของ Mn คือ 0, 30, 60, 90, 120, 150 และ 180 ppm เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 30qC ในแผ่น 96 หลุมเพื่อตรวจสอบความเป็นพิษของโลหะ ผลการวิเคราะห์ MTT ได้ดำเนินการในการประเมินศักยภาพของ Acanthamoeba เอสพี รูปที่ 1 แสดงให้เห็นกราฟของความมีชีวิตของเซลล์กับความเข้มข้นแตกต่างกันของ Mn ขึ้นอยู่กับกราฟค่า IC50 ได้ 24 ppm และ Acanthamoeba SP แสดงให้เห็นว่าการลดลงของการมีชีวิตอยู่กับการสัมผัสกับการเพิ่มความเข้มข้น Mn รูปที่ 1 ร้อยละของความมีชีวิตของ Acanthamoeba SP เซลล์ประเมินโดย MTT การเปิดรับการทดสอบเพื่อ Mn 24 ชั่วโมง ค่า IC50 ที่ได้มา 24 ppm ค่า IC50 ที่ได้รับการทดสอบโดยใช้ MTT ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยบนโปรโตคอลของ หลังจากที่ได้รับการรักษาเซลล์ที่มีแมงกานีสที่ระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน 24 ชั่วโมงที่ 30o C ในแผ่น 96 หลุมกลางในจานที่ถูกทิ้ง จานถูกล้างด้วยสารละลายพีบีเอส 3 ครั้งก่อนที่จะโหลดการแก้ปัญหา MTT นี้เพื่อให้แน่ใจว่าเนื้อหาของน้ำตาลกลูโคสในสื่อจะถูกลบออกอย่างสมบูรณ์ การปรากฏตัวของกลูโคสในกลางจะลดประสิทธิภาพของการเกิดปฏิกิริยา MTT กิจกรรม MTT เฉพาะจะลดลงโดยเซลล์ที่มีการเผาผลาญอย่างกว้างขวาง D-กลูโคส [11] พิษของ Mn ใน Acanthamoeba SP ถูกกำหนดขึ้นอยู่กับร้อยละของ Acanthamoeba เอสพีที่ทำงานได้ หลังจากที่สัมผัสกับ Mn 24 ชั่วโมงที่ 30o องศาเซลเซียสโดยทั่วไปมีชีวิตของ Acanthamoeba เอสพี ลดลงตามการเพิ่มความเข้มข้นของ Mn (รูปที่ 1). นี้แสดงให้เห็นว่าการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ได้รับผลกระทบครั้งเดียวสัมผัสกับ Mn ความเข้มข้นของแมงกานีสที่ยับยั้ง 50% ของประชากรเซลล์ 24 ppm ค่า IC50 ล่างของ Mn แสดงให้เห็นว่ามันมีความเป็นพิษสูงขึ้นเพื่อ Acanthamoeba SP เมื่อเทียบกับธาตุสังกะสีซึ่งแสดงให้เห็น IC50 39 ppm [7] นี้แสดงให้เห็นว่ามีความเป็นพิษแมงกานีสสูงขึ้นเมื่อเทียบกับ Zn ตั้งแต่ IC50 ของ Mn ต่ำกว่าสังกะสี ขึ้นอยู่กับตารางธาตุขององค์ประกอบแมงกานีสมีอิเล็กตรอนที่มีเสถียรภาพน้อยซึ่งเป็นที่ [Ar] 4s2 3d5 เพื่อเปรียบเทียบกับการกำหนดค่า Zn อิเล็กทรอนิกส์ของ [Ar] 4s2 3d10 นี้ได้รับการสนับสนุนโดยมาร์ตินอนซาเลซและอัล [12] โดยระบุความเป็นพิษของโลหะหนักที่ลดลงมีความมั่นคงที่เพิ่มขึ้นของอิเล็กตรอน นอกจากนี้โลหะหนักมีสถานที่ท่องเที่ยวที่สูงไปยังกลุ่มประจุลบของโปรตีนและกลุ่ม thiol [13] การเปลี่ยนแปลงใด ๆ ที่เกิดขึ้นในโปรตีนเหล่านี้จะนำไปสู่ความผิดปกติของเอนไซม์บางอย่างที่อาจส่งผลต่อการเกิดปฏิกิริยาการเผาผลาญอาหารบางอย่างในมือถือ ปรากฏการณ์นี้อาจเกิดขึ้นยังอยู่ใน Acanthamoeba SP

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลและการอภิปราย
มนุษย์กิจกรรมทำให้ได้โลหะมลพิษในน้ำ ตามที่มันขู่บางส่วนของสัตว์น้ำฟาฏิมะฮ์ฮิ et al . วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม / procedia 30 ( 2015 ) 15 – 20 17 ชีวิต และนี้รวมถึงอิสระอะมีบา .