1. For a 1l10 dilution , pipette 10

1. For a 1l10 dilution , pipette 100 L of unknown protein solution into clean cuvette ; add 900 L distilled water and invert to mix. For a 1/20 dilution, add 50 l of unknown protein solution + 950 L distilled water. For a 1/100 dilution, add 10 L of unknown protein solution + 990 L distilled water. Using these three dilutions, continue with the following instructions:
2. Add 1 mL of protein Dye Solution to the 1 mL of diluted protein. Make a Blank by mixing 1 mL of Protein Dye Solution with 1 mL of distilled water. At this point you should have blank and 3 Solutions of unknown protein concentration.
3. Determine the A620 of all three unknown protein solution.
4. If any of the absorbance fall off of the range of your protine standard curve, then the absorbance reading is invalid. If all of your absorbance fall off the range of your protein standard curve then you should repeat the measurement using the greater dilution of unknown protine solution.
5. If the absorbance reading is in the linear range of the curve, and above the lowest detectable amount, record this value and use it to determine the protein concentration of that fraction.
6. Using the BSA standard curve, determine the protein concentration of each fraction in
7. When finished, rinse all tubes thoroughly in warm running tap water and then submerse them ia pan of water for later washing.
8. Cuvettes should be carefully rinsed with warm running tab water and the inside surfaces of the Cuvettes should be gently rubbed with wet cotton swabs to remove any adherent Coomassie stain. The Cuvettes should be rinsed one final time in RO water and turned upside down to dry on a piece of absorbent material or paper towel.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. สำหรับเจือจางเป็น 1l 10 ประหยัดพื้นที่ L 100 ของโปรตีนที่รู้จักลงใน cuvette สะอาด เพิ่ม 900 L กลั่นน้ำ และกลับไปผสม สำหรับเจือจางเป็น 1/20 เพิ่มโปรตีนไม่รู้จักแก้ปัญหา + 950 L กลั่นน้ำ 50 ลิตร สำหรับเจือจางเป็น 1/100 เพิ่มโปรตีนไม่รู้จักแก้ปัญหา + L 990 กลั่นน้ำ 10 ลิตร ใช้ dilutions เหล่านี้สาม ต่อกับคำแนะนำต่อไปนี้:2. เพิ่ม 1 มล.โปรตีนโซลูชันย้อม mL 1 โปรตีนแตกออก ทำให้ช่องว่าง โดยผสม 1 mL ของโปรตีนย้อมด้วย 1 mL ของน้ำกลั่น จุดนี้ คุณควรมีแก้ว่าง และ 3 ความเข้มข้นของโปรตีนที่ไม่รู้จัก3. กำหนด A620 ของโปรตีนสามไม่ทราบทั้งหมด4. ถ้ามี absorbance ที่ตกออกจากช่วงของสรีระมาตรฐาน protine อ่าน absorbance ไม่ถูกต้อง ถ้าทั้งหมดของคุณ absorbance ร่วงช่วงสรีระมาตรฐานโปรตีน คุณควรซ้ำวัดใช้เจือจางมากกว่าของ protine ไม่รู้จัก5. ถ้าอ่าน absorbance ในช่วงเชิงเส้นโค้ง ความต่ำสุดตรวจยอดเงิน บันทึกค่านี้ และใช้เพื่อกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนของเศษส่วนที่6. ใช้โค้งมาตรฐานบีเอสเอ กำหนดความเข้มข้นของโปรตีนของทุกฝ่ายใน 7. เมื่อเสร็จแล้ว ล้างท่อทุกอย่างในน้ำประปาทำความอบอุ่นแล้ว submerse ให้ ia ปานน้ำสำหรับซักผ้าในภายหลัง8. cuvettes ควรจะรอบคอบ rinsed น้ำอุ่นทำงานแท็บ และภายในพื้นผิวของ Cuvettes ควรจะเบา ๆ rubbed กับเปียกฝ้าย swabs เอาคราบใด ๆ Coomassie นฤมล Cuvettes ควรหนึ่ง rinsed ครั้งสุดท้ายในน้ำ RO และคว่ำให้แห้งบนกระดาษหรือวัสดุดูดซับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. เพื่อเจือจาง 1l10, ปิเปต 100 L ของการแก้ปัญหาที่ไม่รู้จักโปรตีนเข้าไปใน cuvette สะอาด เพิ่ม 900 ลิตรน้ำกลั่นและการผสมกลับ สำหรับการลดสัดส่วน 1/20 เพิ่ม 50 ลิตรของการแก้ปัญหาที่ไม่รู้จักโปรตีน + 950 ลิตรน้ำกลั่น สำหรับ 1/100 ลดสัดส่วนเพิ่ม 10 ลิตรของการแก้ปัญหาที่ไม่รู้จักโปรตีน + 990 ลิตรน้ำกลั่น ใช้ทั้งสามเจือจางดำเนินการกับคำแนะนำต่อไปนี้:
2 เพิ่ม 1 มิลลิลิตรของโปรตีนโซลูชั่นย้อมไป 1 มิลลิลิตรของโปรตีนเจือจาง ทำให้ที่ว่างเปล่าโดยการผสม 1 มิลลิลิตรของโปรตีนโซลูชั่นย้อม 1 มิลลิลิตรของน้ำกลั่น ณ จุดนี้คุณควรจะมีที่ว่างเปล่าและ 3 โซลูชั่นของความเข้มข้นของโปรตีนที่ไม่รู้จัก.
3 กำหนด A620 ของทั้งสามวิธีการแก้ปัญหาที่ไม่รู้จักโปรตีน.
4 ถ้าใด ๆ ของการดูดกลืนแสงตกออกในช่วงของกราฟมาตรฐาน protine ของคุณแล้วการอ่านการดูดกลืนแสงไม่ถูกต้อง ถ้าทุกการดูดกลืนแสงของคุณตกออกช่วงของโปรตีนกราฟมาตรฐานของคุณแล้วคุณควรทำซ้ำการวัดโดยใช้การลดสัดส่วนที่มากขึ้นของการแก้ปัญหาที่ไม่รู้จัก protine.
5 ถ้าการอ่านการดูดกลืนแสงที่อยู่ในช่วงเชิงเส้นของเส้นโค้งและสูงกว่าจำนวนเงินที่ตรวจพบต่ำสุดที่บันทึกค่านี้และใช้ในการตรวจสอบความเข้มข้นของโปรตีนส่วนที่.
6 ใช้บีเอสเอโค้งมาตรฐานตรวจสอบความเข้มข้นของโปรตีนในแต่ละส่วนที่ 7
เมื่อเสร็จแล้วล้างออกให้สะอาดท่อทั้งหมดในการทำงานน้ำประปาที่อบอุ่นและแล้วพวกเขา submerse กระทะเอียน้ำสำหรับซักผ้าในภายหลัง.
8 cuvettes ควรจะล้างด้วยน้ำอย่างระมัดระวังแท็บการทำงานที่อบอุ่นและพื้นผิวด้านในของ cuvettes ควรจะลูบเบา ๆ ด้วยสำลีก้อนเปียกที่จะลบคราบ Coomassie ใด ๆ สาวก cuvettes ควรจะล้างเป็นครั้งสุดท้ายในน้ำ RO และหันคว่ำให้แห้งบนชิ้นส่วนของวัสดุดูดซับหรือผ้ากระดาษ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . สำหรับ 1l10 เจือจางเปต 100 L ของสารละลายโปรตีนที่ไม่รู้จักในพิทยาพลสะอาด เพิ่ม 900 ผมน้ำกลั่นและกลับ เพื่อผสม สำหรับ 1 / 20 การเพิ่ม 50 ลิตรไม่รู้จักโปรตีนโซลูชั่น 950 ลิตร น้ำกลั่น สำหรับ 1 / 100 ( เพิ่ม 10 ล. ไม่ทราบสารละลายโปรตีน 990 ผมน้ำกลั่น ใช้ทั้งสามวิธีการต่อด้วยคำสั่งต่อไปนี้ :
2เพิ่ม 1 มิลลิลิตรของสารละลายสีย้อมโปรตีน 1 กรัมโปรตีนเจือจาง ทำให้ว่างเปล่า โดยผสม 1 มิลลิลิตรของสารละลายสีโปรตีน 1 มล. น้ำกลั่น ณจุดนี้คุณควรมีที่ว่างและโซลูชั่น 3 ไม่ทราบความเข้มข้นโปรตีน .
3 หา a620 ของทั้งสามไม่รู้จักโปรตีนโซลูชั่น .
4 ถ้าใด ๆของค่าการดูดกลืนแสงร่วงออกจากช่วงของโปรตีนมาตรฐานเส้นโค้งแล้วอ่านค่าไม่ถูกต้อง ถ้าทั้งหมดของการดูดกลืนแสงตกลงมาช่วงโค้งโปรตีนมาตรฐานของคุณแล้วคุณควรจะทำซ้ำการวัดการเจือจางสารละลายโปรตีนที่ไม่รู้จักมากขึ้น .
5 ถ้าอ่านค่าการดูดกลืนแสงในช่วงเชิงเส้นของเส้นโค้งและสูงกว่าปริมาณที่ตรวจพบต่ำสุดบันทึกค่าและใช้มันเพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของสารละลายโปรตีนที่เศษส่วน .
6 การใช้มาตรฐาน ( โค้ง ตรวจสอบระดับโปรตีนของแต่ละส่วนใน
7 เมื่อเสร็จแล้ว ล้างท่อทั้งหมดอย่างละเอียดในอบอุ่น วิ่งน้ำแล้วจุ่มพวกเขา IA กระทะน้ำไว้ล้าง .
8คิวเวทท์ ควรล้างด้วยน้ำอุ่น ๆใช้แท็บและพื้นผิวด้านในของคิวเวททควรจะค่อย ๆลูบกับ swabs ฝ้ายเปียกเอาพลพรรคเหล่านี้น่าจะเป็นคราบ . ส่วนคิวเวททควรจะล้างครั้งสุดท้ายใน RO แล้วคว่ำให้แห้งบนแผ่นวัสดุดูดซับหรือผ้าขนหนูกระดาษ .