Using IHC, the parasite was detected in only one experimentally
infected animal. In approximate calculation from the qPCR
results, the number of parasites per 1 g of tissue sample of
amygdala was about 110 parasites on average. Assuming a specific
gravity of brain 1, calculated simply, 1 g of tissue sample could
provide 2,500 pieces of 1-cm2 tissue sections when sliced 4 m
thick. This means that at least 23 sections are needed to find one
parasite even when the parasites are distributed evenly in tissue. In
general, the parasites would be sparsely distributed in the tissue as
colonies of tachyzoites or cysts. Therefore, detection of the parasite
by histopathological and immunohistochemical techniques is
difficult with low sensitivity. In contrast, qPCR is highly sensitive
and specific, especially in tissues with low levels of parasites.
In the present study, the importance of sampling and analyzing
brain tissue was confirmed in cattle experimentally infected with
N. caninum. Our results show that the amygdala, hippocampus,
and hypothalamus samples are most appropriate for qPCR assays.
Additionally, sections from the corpus striatum and diencephalon
were most useful in histopathological analysis. Our findings show
that these areas are most useful for evaluating the extent of N.
caninum infection, investigating the pathogenesis of neosporosis,
and evaluating antiparasitic drugs and vaccines against such organisms.
Although the Nc-1 isolate has a lower ability for cystformation, this isolate has been used in many studies of the pathogenesis
of neosporosis and can induce fetal death in experimentally
infected cattle (20–22). On the other hand, cystogenic isolates,
such as Nc-Liv, may show some differences in brain parasite
burdens and pathological changes. Thus, in future work, comparative
study of different isolates of N. caninum will be important to
understand the pathogenesis.
ใช้ IHC ปรสิตที่พบในหนึ่งเดียวสมมติฐานติดสัตว์ ในการคำนวณโดยประมาณจาก qPCR การผล จำนวนปรสิตต่อ 1 กรัมของเนื้อเยื่อตัวอย่างอะมิกดะลามีปรสิตประมาณ 110 เฉลี่ย สมมติว่าการคำนวณแรงโน้มถ่วงของสมอง 1 เพียง ตัวอย่างเนื้อเยื่อ 1 กรัมสามารถให้ 1 cm2 2,500 ชิ้นส่วนเนื้อเยื่อเมื่อหั่น 4 เมตรหนา หมายความ ว่า ส่วนน้อย 23 ที่จำเป็นในการค้นปรสิตเมื่อปรสิตจะกระจายอย่างสม่ำเสมอในเนื้อเยื่อ ในทั่วไป ปรสิตจะกระจายในเนื้อเยื่อเป็นเบาบางอาณานิคมของ tachyzoites หรือซีสต์ ดังนั้น ตรวจหาปรสิตโดย histopathological และเป็นเทคนิคที่น่ายาก มีความไวต่ำ คมชัด qPCR จะมีความไวสูงเฉพาะ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเนื้อเยื่อกับปรสิตในระดับต่ำและการศึกษา ความสำคัญของการสุ่มตัวอย่างและวิเคราะห์เนื้อเยื่อสมองได้รับการยืนยันในสมมติฐานติดวัวN. caninum ผลลัพธ์ที่ได้แสดงว่าอะมิกดะลา ฮิพโพแคมปัสและตัวอย่างของ hypothalamus เหมาะสมที่สุดสำหรับ qPCR assaysนอกจากนี้ ส่วนจาก corpus striatum diencephalonมีประโยชน์มากในการวิเคราะห์ histopathological แสดงผลการศึกษาว่า พื้นที่เหล่านี้มีประโยชน์สำหรับการประเมินขอบเขตของ N.ติดเชื้อ caninum ตรวจพยาธิกำเนิด neosporosisและประเมิน antiparasitic ยาและวัคซีนกับสิ่งมีชีวิตดังกล่าวAlthough the Nc-1 isolate has a lower ability for cystformation, this isolate has been used in many studies of the pathogenesisof neosporosis and can induce fetal death in experimentallyinfected cattle (20–22). On the other hand, cystogenic isolates,such as Nc-Liv, may show some differences in brain parasiteburdens and pathological changes. Thus, in future work, comparativestudy of different isolates of N. caninum will be important tounderstand the pathogenesis.
การแปล กรุณารอสักครู่..