Quantitative Analysis. The carotenoids were exhaustively
extracted with cold acetone in a blender, transferred to
diethyl ether/petroleum ether, saponified overnight at room
temperature with 10% KOH in methanol under a N2 atmosphere,
washed free of alkali, concentrated in a rotary evaporator
(T < 35 °C), and adjusted to a known volume (50 or 100
mL). An appropriate aliquot (3-9 mL) of this extract was
taken and, after addition of Sudan I, evaporated under N2 and
dissolved in 1 mL of hexane.
The carotenoids were analyzed quantitatively by use of
internal calibration with Sudan I as internal standard. The
curves were constructed with a minimum of four concentration
levels, each in triplicate, the concentrations bracketing those
of the mango samples. With the aid of the software Energraphic,
the curves were traced and the straight line equations
and their coefficients of correlation (ranging from 0.9762 to
1.0000) were obtained.
Precision of the HPLC method was verified for the principal
carotenoids, â-carotene and violaxanthin, in triplicate analyses.
Coefficients of variation of 3 and 10%, respectively, were
obtained, which are comparable to those reported in the
literature for HPLC analysis of carotenoids (Stewart, 1977;
Bushway and Wilson, 1982; Hsieh and Karel, 1983).
â-Carotene, â-cryptoxanthin, and zeaxanthin standards
were kindly provided by Hoffmann-La Roche (Basel, Switzerland).
Since the standards were not used immediately after
the vials were opened, purification on MgO/HyfloSupercel (1:
1) or alumina columns was carried out immediately before the
construction of the standard curves. all-trans-Violaxanthin,
9-cis-violaxanthin, and luteoxanthin were accumulated through
several HPLC runs. 9′-cis-Neoxanthin was extracted from kale
and isolated by MgO/HyfloSupercel (1:2) and alumina open
column chromatography prior to use. Because standards were
not available, and the compounds were present at very low
concentration in the sample, the calibration curves of the
corresponding all-trans carotenoids were used for the cis
isomer of â-cryptoxanthin and 13-cis-violaxanthin. cis-Neoxanthin
was used for all-trans-neoxanthin.
การวิเคราะห์เชิงปริมาณ. นอยด์ถูกละเอียดถี่ถ้วนสกัดด้วยอะซีโตนเย็นในเครื่องปั่นย้ายไปอีเทอร์/ ปิโตรเลียมอีเทอร์, กราฟค้างคืนที่ห้องอุณหภูมิKOH 10% ในเมทานอลภายใต้บรรยากาศ N2, ล้างฟรีด่างเข้มข้นในเครื่องระเหยแบบหมุน(T <35 ° C) และปรับให้มีปริมาณที่รู้จักกัน (50 หรือ 100 มิลลิลิตร) aliquot ที่เหมาะสม (3-9 มิลลิลิตร) ของสารสกัดนี้ได้รับการดำเนินการและหลังจากที่นอกเหนือจากซูดานผมระเหยภายใต้N2 และละลายใน1 มิลลิลิตรของเฮกเซน. carotenoids นำมาวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยการใช้การสอบเทียบภายในกับซูดานผมเป็นมาตรฐานภายใน เส้นโค้งที่ถูกสร้างด้วยอย่างน้อยสี่ความเข้มข้นของระดับในแต่ละเพิ่มขึ้นสามเท่าความเข้มข้นคร่อมผู้ตัวอย่างมะม่วง ด้วยความช่วยเหลือของ Energraphic ซอฟต์แวร์เส้นโค้งถูกสะกดรอยตามและสมการเส้นตรงและค่าสัมประสิทธิ์ของพวกเขาจากความสัมพันธ์(ตั้งแต่ 0.9762 ที่จะ1.0000) ที่ได้รับ. แม่นยำของวิธี HPLC ได้ถูกตรวจสอบสำหรับเงินต้นcarotenoids, âแคโรทีนและ violaxanthin, . เพิ่มขึ้นสามเท่าในการวิเคราะห์ค่าสัมประสิทธิ์ของการเปลี่ยนแปลง3 และ 10% ตามลำดับที่ได้รับซึ่งเทียบได้กับรายงานในวรรณกรรมสำหรับการวิเคราะห์HPLC ของนอยด์ (สจ๊วต 1977; Bushway และวิลสัน, 1982; Hsieh และคาเรล, 1983) âแคโรทีน, A-cryptoxanthin และมาตรฐานซีแซนทีนได้ให้ความกรุณาโดยHoffmann-La Roche (บาเซิลวิตเซอร์แลนด์). ตั้งแต่มาตรฐานที่ไม่ได้ใช้งานได้ทันทีหลังจากที่ขวดถูกเปิดบริสุทธิ์ใน MgO / HyfloSupercel (1: 1) หรืออลูมิเนียม คอลัมน์ได้ดำเนินการทันทีก่อนการก่อสร้างของเส้นโค้งมาตรฐาน ทุกทรานส์ Violaxanthin, 9 ถูกต้อง-violaxanthin และ luteoxanthin สะสมผ่านวิ่งHPLC หลาย 9'-CIS-Neoxanthin ถูกสกัดจากผักคะน้าและแยกโดยMgO / HyfloSupercel (1: 2) และอลูมินาเปิดคอลัมน์ก่อนที่จะใช้ เพราะมาตรฐานก็ไม่สามารถใช้ได้และสารประกอบที่ถูกนำเสนอในที่ต่ำมากความเข้มข้นในตัวอย่างโค้งของการสอบเทียบที่เกี่ยวข้องทั้งหมดcarotenoids ทรานส์ที่ใช้ในถูกต้องisomer ของâ-cryptoxanthin และ 13-CIS-violaxanthin ถูกต้อง-Neoxanthin ใช้สำหรับทุกทรานส์ neoxanthin
การแปล กรุณารอสักครู่..