A PCR-RFLP method was used to identify five species of raw and processed groupers belonging to the
genus, Epinephelus viz. E. areolatus, E. bleekeri, E. faveatus, E. longispinis and E. undulosus. DNA extracted
from all the species using phenol-chloroform method amplified the mt 16S rRNA gene, unique for the
genus, Epinephelus, using GenF and EpiR primers at 300 bp. This fragment did not amplify the DNA of
even closely related grouper genus, Cephalopholis, making the method more specific the grouper genus,
Epinephelus. The specificity was further ascertained by performing the internal control that targeted 18S
rRNA, which was eukaryotic specific. Digestion of PCR products with three selected restriction enzymes
viz. SduI, BciVI, and Sau3AI followed by PAGE yielded species specific patterns that enabled identification
of three grouper species viz. E. bleekeri, E. faveatus and E. longispinis, while the other two species viz. E.
areolatus and E. undulosus gave similar pattern in the gel, although minor variations in the molecular
sizes of digested products were noticed. Chilled, frozen and cooked groupers also gave similar PCR-RFLP
pattern to that of raw groupers making this method suitable even for processed products.
A PCR-RFLP method was used to identify five species of raw and processed groupers belonging to thegenus, Epinephelus viz. E. areolatus, E. bleekeri, E. faveatus, E. longispinis and E. undulosus. DNA extractedfrom all the species using phenol-chloroform method amplified the mt 16S rRNA gene, unique for thegenus, Epinephelus, using GenF and EpiR primers at 300 bp. This fragment did not amplify the DNA ofeven closely related grouper genus, Cephalopholis, making the method more specific the grouper genus,Epinephelus. The specificity was further ascertained by performing the internal control that targeted 18SrRNA, which was eukaryotic specific. Digestion of PCR products with three selected restriction enzymesviz. SduI, BciVI, and Sau3AI followed by PAGE yielded species specific patterns that enabled identificationof three grouper species viz. E. bleekeri, E. faveatus and E. longispinis, while the other two species viz. E.areolatus and E. undulosus gave similar pattern in the gel, although minor variations in the molecularsizes of digested products were noticed. Chilled, frozen and cooked groupers also gave similar PCR-RFLPpattern to that of raw groupers making this method suitable even for processed products.
การแปล กรุณารอสักครู่..

เป็นวิธีการที่ใช้ระบุว่า 5 ชนิดของวัตถุดิบและแปรรูปปลากะรังเป็นของ
สกุล วิศวกรชาวสวีเดน , ได้แก่ E . areolatus e . บลีกเกอร์ ย เช่น faveatus e . longispinis และ E . undulosus . ดีเอ็นเอที่สกัด
จากทั้งหมดชนิด โดยใช้วิธีฟีนอล ( ขยาย ) เบส 16S rRNA ยีนที่ไม่ซ้ำกันสำหรับ
สกุล วิศวกรชาวสวีเดน , ใช้ , และวิธีที่ genf epir 300 BP .ส่วนนี้ไม่ได้ขยาย DNA ของ
แม้ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด cephalopholis สกุล , ปลาเก๋า , วิธีการเพิ่มเติมเฉพาะปลาเก๋าสกุล
สกุลปลาหมอทะเล , . ความจำเพาะต่อการตรวจสอบโดยการควบคุมภายในที่เป้าหมาย 18S rRNA eukaryotic
ที่เฉพาะเจาะจง การย่อยอาหารของผลิตภัณฑ์ PCR กับสามเลือกเอนไซม์
viz . sdui bcivi , ,แล้วตามด้วยหน้าคอมและรูปแบบเฉพาะเจาะจงที่สามารถระบุชนิดของปลากะรัง
3 ชนิด ได้แก่ เช่น บลีกเกอร์ ย เช่น faveatus และ E . longispinis ส่วนอีกสองชนิด คือ E .
areolatus และ E . undulosus ให้รูปแบบคล้ายเจล แม้ว่ารูปแบบรายย่อยในขนาดโมเลกุลย่อย
ของผลิตภัณฑ์ว่า แช่เย็นแช่แข็งและปลากะรังสุกยังให้รูปแบบว่า
คล้ายกับที่ของปลากะรัง ทำวิธีนี้เหมาะแม้วัตถุดิบสำหรับผลิตภัณฑ์แปรรูป
การแปล กรุณารอสักครู่..
