Confocal Laser Scanning Microscopy

Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM) is an optical imaging technique based on laser beam scanning over the specimen. The confocal principle makes possible to produce an image of exclusively the focal plane. This is due to a pinhole positioned in front of the detection system which rejects all light that originates from the outside of the detection volume defined by the focal plane (Fig. 1). Contrary to it, in ordinary microscope, the light that comes from place other than focusing position is overlapped with image forming light at focusing position and whole image Tums blurry.
The image is reconstructed point-by-point in the CLSM as the laser beam, focused to a very small spot, scans point-by-point over the specimen in X-Y directions. Thanks to the optical sectioning behavior, unique for the confocal light microscope, 3-dimensionally resolved images of the specimen surface or the internal structure of semi-transparent specimen under investigation are produced. The optical slicing is possible due to the confocal principle because part where light was repelled is truly darkened in the image and particular plane scans are
This is done by computational technique gathering images of recorded focal planes obtained by scanning the specimen in a direction of light axe. The contrast mechanisms conventionally used are based on reflection (ordinary Fresnel reflection as well as generation of scattered light due to local variations of the refractive index) and fluorescence. The first mechanism is used in materials science; the latter one is widely used in biological applications.
The CLSM is relatively new nondestructive method, fast and easy to operate. It over bridges the gap existing between traditional optical microscopy (OM)and scanning electron microscopy (SEM). The reason is high resolution and contrast and no special requirement for sample treatment and size. The scanning is carried out at room temperature under atmospheric pressure.
The method obtained the primacy in the field of biology where possibilities of morphology study are successfully improved thanks to the fluorescent dyes and selective markers. The observed objects are usually small (proteins, various cell part, tissues) therefore it is possible to scan the whole volume of sample and create its spatial image. But nowadays, the CLSM is more and more uses also in materials science. It is successfully used for investigation of topography and morphology of polymers, ceramics, wood, fibers, bones or teeth; it is used for investigation of changes of polymers or composites due to an applied mechanical stress, and so on.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

confocal กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน (clsm) เป็นเทคนิคการถ่ายภาพแสงอยู่บนพื้นฐานของเลเซอร์สแกนลำแสงกว่าตัวอย่าง หลักการ confocal ทำให้เป็นไปได้ในการผลิตภาพของเฉพาะระนาบโฟกัส นี้เกิดจากการรูเข็มอยู่ในตำแหน่งด้านหน้าของระบบตรวจจับซึ่งเสียแสงที่มาจากด้านนอกของปริมาณการตรวจสอบที่กำหนดโดยระนาบโฟกัส (รูปที่ 1)ตรงกันข้ามกับมันในกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาแสงท​​ี่มาจากสถานที่อื่น ๆ กว่าตำแหน่งที่มุ่งเน้นคือการซ้อนทับกับภาพการสร้างแสงที่ตำแหน่งและ Tums ภาพทั้งหมดเบลอเน้น.
ภาพจะถูกสร้างขึ้นใหม่จุดโดยจุดใน clsm เป็นแสงเลเซอร์ , มุ่งเน้นไปยังจุดที่เล็กมากสแกนจุดโดยจุดกว่าตัวอย่างในทิศทางที่เซ็กซี่ ขอบคุณพฤติกรรม sectioning แสงไม่ซ้ำกันสำหรับกล้องจุลทรรศน์ confocal ภาพการแก้ไข 3 มิติของพื้นผิวของชิ้นงานหรือโครงสร้างภายในของชิ้นงานกึ่งโปร่งใสภายใต้การตรวจสอบมีการผลิต หั่นแสงเป็นไปได้เนื่องจากหลักการ confocal เพราะเป็นส่วนหนึ่งที่ถูกไฟมันไส้เป็นมืดอย่างแท้จริงในภาพและโดยเฉพาะอย่างยิ่งได้รับการสแกนเครื่องบิน
นี้จะกระทำโดยการคำนวณการรวบรวมเทคนิคภาพของเครื่องบินที่ได้รับการบันทึกโฟกัสโดยการสแกนชิ้นงานในทิศทางของขวานแสง กลไกความคมชัดที่ใช้ตามอัตภาพจะขึ้นอยู่กับการสะท้อน (สะท้อนเฟรสสามัญเช่นเดียวกับรุ่นของแสงที่กระจัดกระจายเนื่องจากการเปลี่ยนแปลงในท้องถิ่นของดัชนีหักเห) และการเรืองแสง กลไกแรกจะใช้ในวัสดุศาสตร์;หลังหนึ่งมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการใช้งานทางชีวภาพ.
clsm เป็นวิธีการทำลายที่ค่อนข้างใหม่ที่ใช้งานง่ายและรวดเร็ว มันไปเชื่อมโยงช่องว่างที่มีอยู่ระหว่างการใช้กล้องจุลทรรศน์แสงแบบดั้งเดิม (อ้อม) และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM) เหตุผลก็คือค​​วามละเอียดสูงและความคมชัดและไม่มีความต้องการพิเศษสำหรับการรักษาตัวอย่างและขนาดการสแกนจะดำเนินการที่อุณหภูมิห้องภายใต้ความดันบรรยากาศ.
วิธีการที่ได้รับความเป็นอันดับหนึ่งในด้านชีววิทยาที่เป็นไปได้ของการศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาจะขอบคุณที่เรืองแสงสีและเครื่องหมายเลือกการปรับปรุงที่ประสบความสำเร็จ วัตถุที่สังเกตมักจะมีขนาดเล็ก (โปรตีนที่เป็นส่วนหนึ่งของเซลล์ต่างๆเนื้อเยื่อ) ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่จะสแกนไดรฟ์ทั้งหมดของตัวอย่างและสร้างภาพอวกาศ แต่ในปัจจุบัน clsm คือการใช้มากขึ้นและยังอยู่ในวัสดุศาสตร์ มันจะถูกใช้สำหรับการประสบความสำเร็จในการสอบสวนของภูมิประเทศและสัณฐานวิทยาของพอลิเมอ, เซรามิก, ไม้, เส้นใยกระดูกหรือฟันจะใช้สำหรับการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงของโพลีเมอหรือวัสดุผสมเนื่องจากความเครียดเชิงกลใช้และอื่น ๆ .

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Confocal เลเซอร์สแกน Microscopy (CLSM) เป็นเทคนิคการถ่ายภาพแสงตามแสงเลเซอร์สแกนผ่านตัวอย่าง หลัก confocal ทำให้สามารถผลิตรูปเฉพาะระนาบโฟกัส นี่คือเนื่องจากรูเข็มที่ตำแหน่งหน้าระบบตรวจจับที่ปฏิเสธแสงทั้งหมดที่เกิดจากภายนอกของไดรฟ์ข้อมูลการตรวจสอบที่กำหนด โดยระนาบโฟกัส (Fig. 1) ซ้อนขัดกับมัน ในกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา แสงที่มาจากที่อื่นที่ไม่ใช่เน้นตำแหน่งคือกันกับภาพที่สว่างที่เน้นตำแหน่งและรูปภาพทั้งหมด Tums มัว
ภาพพร้อมสร้างขึ้นใหม่จุดโดยใน CLSM เป็นแสงเลเซอร์ เน้นให้จุดเล็ก ๆ สแกนจุดโดยจุดเหนือสิ่งส่งตรวจในทิศทาง X-Y ขอบคุณ sectioning ลักษณะแสง การ เฉพาะสำหรับกล้องจุลทรรศน์ confocal แสง 3 มิติแก้ไขรูปภาพของการผลิตพื้นผิวหรือโครงสร้างภายในของกึ่งโปร่งใสภายใต้การตรวจสอบ แบ่งแสงเป็นไปได้เนื่องจากหลัก confocal เพราะส่วนที่แสงเป็น repelled อย่างแท้จริงได้มืดมัวไปในภาพ และจะสแกนเฉพาะเครื่องบิน
สิ่งนี้ทำ โดยเทคนิคคอมพิวเตอร์ที่รวบรวมรูปภาพของเครื่องบินโฟกัสที่บันทึกไว้ได้ โดยสแกนตัวอย่างในทิศทางของขวานไฟ กลไกความคมชัดดีใช้ได้ตามสะท้อน (Fresnel สะท้อนธรรมดาเป็นรุ่นกระจายแสงจากภายในรูปแบบของดรรชนีหักเห) และ fluorescence กลไกแรกคือใช้ในวัสดุศาสตร์ หลังหนึ่งถูกใช้ในชีวภาพประยุกต์
CLSM เป็นค่อนข้างทำลาย รวดเร็ว และง่ายขึ้น จะผ่านสะพานมีช่องว่างอยู่ระหว่าง microscopy แสงแบบดั้งเดิม (ออม) และการสแกน microscopy อิเล็กตรอน (SEM) เหตุผลคือ ความละเอียดสูง และความคมชัด และข้อกำหนดพิเศษสำหรับการรักษาตัวอย่างและขนาด การสแกนจะทำที่อุณหภูมิห้องภายใต้ความดันบรรยากาศ
primacy ในฟิลด์ของชีววิทยาที่ศึกษาสัณฐานวิทยาของจะสำเร็จปรับปรุงสีเรืองแสงและใช้เครื่องหมายการได้รับวิธีการ วัตถุที่สังเกตมีขนาดเล็กมักจะ (โปรตีน ส่วนเซลล์ต่าง ๆ เนื้อเยื่อ) จึงได้ไปสแกนไดรฟ์ข้อมูลทั้งหมดของตัวอย่าง และสร้างรูปของปริภูมิ แต่ในปัจจุบัน CLSM ถูกใช้มาก ขึ้นนอกจากนี้ในวัสดุศาสตร์ สำเร็จได้ใช้สำหรับการตรวจสอบภูมิประเทศและสัณฐานวิทยาของโพลิเมอร์ เซรามิค ไม้ เส้นใย กระดูก หรือ ฟัน ใช้สำหรับตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงของโพลิเมอร์หรือวัสดุผสมเนื่องจากมีความเครียดใช้เครื่องจักรกล และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสแกนเลเซอร์ confocal การตรวจวิเคราะห์สารเคมี( clsm )คือเทคนิคการถ่าย ภาพ แบบออปติกที่ใช้สำหรับลำแสงเลเซอร์สแกนในตัวอย่างนี้ confocal หลักการที่ทำให้เป็นไปได้ที่จะให้ ภาพ ที่มีเฉพาะเครื่องบินโฟกัส โรงแรมแห่งนี้คือเนื่องจากการ pinhole ที่ตั้งอยู่ด้านหน้าของระบบการตรวจจับการที่ปฏิเสธสัญญาณไฟแสดงทั้งหมดที่เกิดจากด้านนอกของระดับเสียงการตรวจจับที่กำหนดไว้โดยเครื่องบินโฟกัส(รูปที่ 1 )ขัดให้มัน,ในหุ้นสามัญกล้องจุลทรรศน์,ที่เบาๆที่มาจากที่อื่นมากกว่าการเน้นตำแหน่งเป็นตันหยงด้วย ภาพ ประกอบเป็นเบาๆที่เน้นทั้งตำแหน่งและ ภาพ ความคมชัด tums .
ที่ ภาพ เป็นจุดก่อสร้างขึ้นใหม่เมื่อพ.ศ.โดยจุดที่ clsm เป็นลำแสงเลเซอร์ที่ให้ความสำคัญกับขนาดเล็กมากเป็นจุดที่,การสแกนแบบจุดโดยจุดที่มนุษย์ใน X - Y ทิศทาง. ทั้งนี้ต้องขอขอบคุณการทำงานการแบ่งหัวข้อออปติคอลไดรฟ์ออกกล้องจุลทรรศน์ที่เป็นเอกลักษณ์เฉพาะเพื่อแสง confocal ที่ ภาพ 3 - มีมติของพื้นผิวมิติจึงช่วยควบคุมตำแหน่งให้เหมาะสมตัวอย่างหรือโครงสร้าง ภายใน ของตัวอย่างแบบกึ่งโปร่งใส ภายใต้ การตรวจสอบเป็นการผลิต ใบมีดหั่นสไลด์ออปติคอลไดรฟ์ออกมีความเป็นไปได้เนื่องจากเป็นไปตามหลักการการ confocal เพราะส่วนหนึ่งซึ่งมีแสงก็ไม่เป็นเงามืดใน ภาพ อย่างแท้จริงและการสแกนที่เครื่องบินจะตอบแทน
ซึ่งทำได้โดยการเก็บรวบรวม ภาพ เทคนิคของเครื่องบินนวัตกรรมโฟกัสที่บันทึกไว้ได้โดยการสแกนตัวอย่างในทิศทางของขวานเบาๆ กลไกความเปรียบต่างที่โดยธรรมเนียมปฏิบัติใช้ได้ขึ้นอยู่กับผลสะท้อน( next generation สะท้อนและ Fresnel แบบมีร่องเพื่อให้สามัญของแสงกระจายตัวอยู่เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงในท้องถิ่นของดัชนีชี้หัก)และคุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซ กลไกการเป็นครั้งแรกที่มีการใช้วัสดุในด้านวิทยาศาสตร์หนึ่งหลังที่มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในแอปพลิเคชันทางชีววิทยา.
clsm คือวิธีการ nondestructive ค่อนข้างใหม่ได้อย่างรวดเร็วและง่ายต่อการใช้งาน มันเหนือสะพานช่องว่างที่มีอยู่ระหว่างการตรวจวิเคราะห์สารเคมีออปติคอลไดรฟ์แบบดั้งเดิม( OM )และการตรวจวิเคราะห์สารเคมีอิเลคตรอนการสแกน(ความหมายอย่างไรต่อ) เหตุผลที่มีความละเอียดสูงและความเปรียบต่างและไม่มีความต้องการพิเศษสำหรับการบำบัดและลิ้มลองขนาดการสแกนที่มีการดำเนินการที่ อุณหภูมิ ห้อง ภายใต้ แรงกดดันที่มีบรรยากาศที่.
วิธีที่ได้รับความสำคัญที่อยู่ในฟิลด์ที่ชีววิทยาซึ่งความเป็นไปได้ของการศึกษารูปร่างลักษณะของหินได้รับการปรับปรุงเสร็จสมบูรณ์แล้วทั้งนี้ต้องขอขอบคุณสารสีย้อมแสงฟลูออเรสเซนต์ที่มีทางเลือกและการหลบหลีกตัวประกบ วัตถุที่กำหนดมีตามปกติจะเป็นส่วนหนึ่งขนาดเล็ก(โปรตีนเซลล์ต่างๆกระดาษทิชชู่)ดังนั้นจึงมีความเป็นไปได้ในการสแกนหาระดับเสียงทั้งหมดของตัวอย่างและสร้าง ภาพ บางส่วนของพื้นที่ แต่ในปัจจุบัน clsm จะใช้มากขึ้นและมากขึ้นอีกด้วยในทางวิทยาศาสตร์,เอกสาร เป็นความสำเร็จใช้สำหรับการสืบสวนสอบสวนของรูปร่างลักษณะของหินและ สภาพ ภูมิประเทศ ของโพลิเมอร์เซรามิกไม้เส้นใยฟันหรือกระดูกเป็นที่ใช้ในการสืบสวนสอบสวนของการเปลี่ยนแปลงของ composites หรือเม็ดพลาสติกเนื่องจากมีความตึงเครียดทางกลไกที่นำไปใช้และใน.