Three representative isolates of ea

Three representative isolates of each morphogroup were used for pathogenicity testing. Isolates tested were Colletotrichum
Fungal Diversity 91 Group 1 (BML-I6, BML-I15, BPD-I2), Colletotrichum Group 2 (BML-I3, BML-I14, BPD-I4), and Colletotrichum Group 3 (BPD-I12, BPD-I16, BPD-I18)
Single spore cultures of each isolate were grown on potato dextrose agar for 7 days at room temperature (28-30°C). The spores were harvested by adding 10 ml of sterilized distilled water onto the culture, which was then gently swirled to dislodge the conidia. Spore concentration was adjusted to 106conidia/ml using a haemocytometer (Than et al., 2008a).
Coffea arabica berries were supplied by Royal Agricultural Project Coffee, Chiang Mai, Thailand. Non-infected berries were disinfected with 1% sodium hypochlorite for 5 minutes, and washed three times with distilled water. The berries were blotted dry with a sterilized tissue paper and inoculated by using wound/drop and non-wound/drop inoculation method (Lin et al., 2002; Than et al., 2008a). The wound/drop inoculation method involved pin pricking the coffee berry wall to a 1 mm depth and then placing 6 µl of conidia suspension (106conidia/ml) over the wound. Control fruits were inoculated with 6 µl of sterilized distilled water onto the wound. The inoculated fruits were incubated at room temperature in a closed sterile container. This experiment was arranged by using Completely Randomized Design (CRD), with three replicates per isolate. Three green and three red berries were tested per isolate. Lesion area was evaluated by measuring length, width and area of the typical anthracnose lesion developed on the berries, from 1 to 15 days after inoculation (DAI). Percentage of infected area in fruits was obtained from the lesion area divided by fruit area and multiplied by one hundred (Than et al., 2008a). After 15 days conidia from diseased berries were aseptically transferred onto potato dextrose agar and incubated at room temperature. The resultant cultures were checked for morphological characters to confirm Koch’s postulates. All infected berries were disposed of following sterilization
Data of the anthracnose lesion area were analyzed with Duncan‘s Multiple Range Test (DMRT) by using SPSS software version 16.0 (SPSS Inc., Chicago, USA) (Kirkpatrick and Feeney, 2006).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สามตัวแทนที่แยกได้ของแต่ละ morphogroup ใช้สำหรับการทดสอบ pathogenicity อยู่ แยกทดสอบถูก Colletotrichum กลุ่มหลากหลายเชื้อรา 91 1 (BML-I6, BML-I15, BPD I2), Colletotrichum กลุ่ม 2 (BML I3, BML I14, BPD I4), และ Colletotrichum กลุ่ม 3 (BPD I12, BPD-I16, BPD I18)วัฒนธรรมสปอร์เดี่ยวของแต่ละ isolate ที่ปลูกบนวุ้นมันฝรั่งเดกซ์โทรส 7 วันที่อุณหภูมิห้อง (28-30° C) สปอร์ถูกเก็บเกี่ยว โดยเพิ่ม 10 ml ของน้ำกลั่นฆ่าเชื้อบนวัฒนธรรม ซึ่งถูกแล้วค่อย ๆ ตแม่เพื่อขับไล่การ conidia ความเข้มข้นของสปอร์ถูกปรับเป็น 106conidia/ml ใช้ haemocytometer (กว่า et al. 2008a)กาแฟอาราบิก้าเบอร์รี่ได้มาจาก กาแฟโครงการเกษตรหลวง เชียงใหม่ ไทย ไม่ใช่การติดเชื้อถูกฆ่าเชื้อ ด้วย 1% โซเดียมไฮเปอร์คลอไรด์ 5 นาที และล้าง 3 ครั้ง ด้วยน้ำกลั่น ผลเบอร์รี่ blotted แห้ง ด้วยเยื่อกระดาษผ่านการฆ่าเชื้อ และ inoculated โดยใช้แผลส่งและกักบริเวณปลอดแผลส่งวิธี (Lin et al. 2002 กว่า et al. 2008a) แผลส่งดันวิธีเกี่ยวข้อง pin สะกิดให้ลึก 1 มม.ผนังเบอร์รี่กาแฟแล้ว วาง 6 µl ระงับ conidia (106conidia/ml) ผ่านแผล ผลไม้ที่ควบคุมได้ inoculated กับ µl 6 ของน้ำกลั่นฆ่าเชื้อบนแผล ผลไม้ inoculated ได้รับการกกที่อุณหภูมิห้องในภาชนะปลอดเชื้อปิด ทดลองนี้จัด โดยใช้อย่างสมบูรณ์แบบสุ่มออก (CRD), เหมือนกับสามต่อโปรตีน สามสีเขียวและเบอร์รี่สีแดงสามรับการทดสอบต่อโปรตีน บริเวณรอยโรคถูกประเมิน โดยการวัดความยาว ความกว้าง และพื้นที่ของรอยโรค anthracnose ทั่วไปที่พัฒนาบนผลเบอร์รี่ จาก 1-15 วันหลังจากกักบริเวณ (DAI) เปอร์เซ็นต์ของพื้นที่ติดเชื้อในผลไม้มาจากบริเวณรอยโรคแบ่งออกตามพื้นที่ผลไม้ และคูณ ด้วยหนึ่งร้อย (กว่า et al. 2008a) หลังจาก 15 วัน conidia จากเบอร์รี่เป็นโรค aseptically โอนลงบนวุ้นมันฝรั่งเดกซ์โทรส และที่อุณหภูมิห้องได้รับการกก วัฒนธรรมผลลัพธ์ถูกตรวจสอบสำหรับอักขระสัณฐานเพื่อยืนยันสมมติฐานของคอค เบอร์รี่ทั้งหมดที่ติดเชื้อถูกกำจัดฆ่าเชื้อต่อไปนี้ข้อมูลของบริเวณรอยโรค anthracnose ถูกวิเคราะห์ด้วยของ Duncan หลายช่วงทดสอบ (DMRT) โดยใช้ SPSS ซอฟต์แวร์เวอร์ชั่น 16.0 (SPSS Inc. ชิคาโก สหรัฐอเมริกา) (ฉบับและ Feeney, 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สามสายพันธุ์ที่เป็นตัวแทนของแต่ละ morphogroup ถูกนำมาใช้สำหรับการทดสอบการเกิดโรค แยกการทดสอบเป็น Colletotrichum
เชื้อราความหลากหลาย 91 กลุ่มที่ 1 (BML-I6, BML-I15, บาร์เรลต่อวัน-i2) Colletotrichum กลุ่มที่ 2 (BML-I3, BML-I14, บาร์เรลต่อวัน-I4) และ Colletotrichum กลุ่มที่ 3 (บาร์เรลต่อวัน-I12, บาร์เรลต่อวัน -I16, บาร์เรลต่อวัน-I18)
เดี่ยวสปอร์วัฒนธรรมของแต่ละแยกได้ถูกปลูกใน potato dextrose agar เป็นเวลา 7 วันที่อุณหภูมิห้อง (28-30 ° C) สปอร์เก็บเกี่ยวโดยการเพิ่ม 10 มล. น้ำกลั่นฆ่าเชื้อเข้าสู่วัฒนธรรมซึ่งได้รับแล้วหมุนวนเบา ๆ เพื่อขับไล่ conidia ความเข้มข้นของสปอร์ได้รับการปรับให้ 106conidia / ml โดยใช้สไลด์นับเม็ดเลือด (กว่า et al., 2008a).
กาแฟอาราบิก้าเบอร์รี่ถูกจัดทำโดยโครงการกาแฟเกษตรหลวง, เชียงใหม่, ประเทศไทย ผลเบอร์รี่แบบไม่ติดเชื้อได้รับการฆ่าเชื้อด้วยโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 1% เป็นเวลา 5 นาทีและล้างสามครั้งด้วยน้ำกลั่น ผลเบอร์รี่ถูกลบเลือนแห้งด้วยกระดาษทิชชูฆ่าเชื้อและเชื้อโดยใช้แผล / ลดลงและไม่มีแผล / วางวิธีการฉีดวัคซีน (หลิน, et al., 2002;. กว่า, et al, 2008a) แผล / ลดลงวิธีการฉีดวัคซีนที่เกี่ยวข้องกับพิตำผนัง Berry กาแฟถึงระดับความลึก 1 มมแล้ววาง 6 ไมโครลิตรของสปอร์ (Suspension 106conidia / ml) กว่าแผล ผลไม้ควบคุมถูกเชื้อ 6 ไมโครลิตรน้ำกลั่นฆ่าเชื้อลงบนแผล ผลไม้ที่ถูกบ่มเชื้อที่อุณหภูมิห้องในภาชนะที่ปิดการฆ่าเชื้อ การทดลองนี้ได้รับการจัดโดยใช้แบบ Completely Randomized Design (CRD) มีสามซ้ำต่อแยก สีเขียวสามและสามเบอร์รี่สีแดงได้มีการทดสอบต่อแยก บริเวณแผลถูกประเมินโดยการวัดความยาวความกว้างและพื้นที่ของแผลแอนแทรกโนทั่วไปการพัฒนาบนผลเบอร์รี่, 1-15 วันหลังจากการฉีดวัคซีน (DAI) ร้อยละของบริเวณที่ติดเชื้อในผลไม้ที่ได้รับจากบริเวณแผลแบ่งตามพื้นที่และผลไม้คูณด้วยหนึ่งร้อย (กว่า et al., 2008a) หลังจากวันที่ 15 สปอร์จากผลเบอร์รี่ที่เป็นโรคถูกถ่ายโอนไปยังปลอดเชื้อ potato dextrose agar และบ่มที่อุณหภูมิห้อง วัฒนธรรมผลลัพธ์ที่ถูกตรวจสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยาเพื่อยืนยันสมมติฐานของคอค ผลเบอร์รี่ที่ติดเชื้อทั้งหมดถูกทิ้งของการฆ่าเชื้อต่อไป
ข้อมูลของพื้นที่รอยโรคแอนแทรกโนถูกนำมาวิเคราะห์กับช่วงทดสอบหลายดันแคน (DMRT) โดยใช้โปรแกรม SPSS ซอฟต์แวร์รุ่น 16.0 (SPSS อิงค์, ชิคาโก, สหรัฐอเมริกา) (Kirkpatrick และฟีนีย์, 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามเป็นตัวแทนจากแต่ละ morphogroup ถูกใช้สำหรับการทดสอบการ . แยกเป็นชนิดทดสอบความหลากหลายของเชื้อราในกลุ่มที่ 1 ( 91 bml-i6 bml-i15 , , , bpd-i2 ) กลุ่มที่ 2 ( bml-i3 bml-i14 , จีวร , จีวร , bpd-i4 ) และกลุ่มที่ 3 ( bpd-i12 bpd-i16 bpd-i18 , , )วัฒนธรรมของแต่ละแยกสปอร์เดี่ยวที่ปลูกในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ที่อุณหภูมิห้อง 7 วัน ( 28-30 องศา C ) สปอร์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการเพิ่ม 10 มล. น้ำกลั่นฆ่าเชื้อบนวัฒนธรรม ซึ่งก็ค่อยๆ ฟุ้งปลดโคนิเดีย . สมาธิ คือการปรับ 106conidia สปอร์ / มิลลิลิตร ใช้ haemocytometer ( กว่า et al . , 2008a )คอฟเฟียอาราบิก้าได้จัดโดยโครงการเกษตรหลวงผลเบอร์รี่กาแฟ , เชียงใหม่ , ประเทศไทย ไม่ติดเชื้อเบอร์รี่ถูกฆ่าเชื้อด้วย 1% โซเดียม ไฮโปคลอไรท์ประมาณ 5 นาที และล้างด้วยน้ำกลั่น 3 ครั้ง . ผลเบอร์รี่มีเปื้อนแห้งด้วยกระดาษและเนื้อเยื่อพืชโดยการฆ่าเชื้อแผล / วางและไม่วางแผล / วิธีการฉีดวัคซีน ( หลิน et al . , 2002 ; กว่า et al . , 2008a ) แผล / ปล่อยเชื้อวิธีเกี่ยวข้องกับพิน pricking คอฟฟี่เบอร์รี่กำแพงลึก 1 mm แล้ววาง 6 µ L ของโคนิระงับ ( 106conidia / ml ) กว่าแผล ผลไม้ควบคุมเชื้อกับ 6 µ l ฆ่าเชื้อน้ำกลั่นลงบนแผล การปลูกผลไม้ บ่มที่อุณหภูมิห้องในภาชนะปิดสนิทปราศจากเชื้อ . การทดลองนี้ถูกจัดขึ้นโดยการใช้ Completely Randomized Design ( CRD ) 3 ซ้ำต่อไอโซเลท สามสามเบอร์รี่สีแดงสีเขียวและทดสอบต่อไอโซเลท บริเวณแผลที่ประเมินโดยการวัดความยาว , ความกว้างและพื้นที่ของแผลโรคทั่วไปที่พัฒนาบนเบอร์รี่ จาก 1 ถึง 15 วัน หลังจากปลูกเชื้อ ( ได ) ร้อยละของพื้นที่ที่ติดเชื้อในผลไม้ได้จากรอยโรคบริเวณแบ่งพื้นที่ผลไม้และคูณด้วยหนึ่งร้อยกว่า et al . , 2008a ) หลังจาก 15 วันเดียจากผลเบอร์รี่ที่ถูกโอนไปยัง aseptically Portals บ่มที่อุณหภูมิห้อง วัฒนธรรมดังกล่าวได้ตรวจสอบลักษณะตัวอักษรเพื่อยืนยันสมมติฐานของคอค . ผลเบอร์รี่ที่ติดเชื้อทั้งหมดถูกทิ้งตาม ฆ่าเชื้อข้อมูล ของโรคแอนแทรคโนสของพื้นที่มาวิเคราะห์ด้วย Duncan " s Multiple Range Test ( วัตถุดิบในผลิตภัณฑ์อาหารว่าง ) โดยใช้โปรแกรม SPSS รุ่นซอฟต์แวร์ 16.0 ( SPSS Inc ชิคาโก สหรัฐอเมริกา ) ( Kirkpatrick และ ฟรีนีย์ , 2006 )