Sampling, RNA extraction and revers

Sampling, RNA extraction and reverse transcription
Immediately after the behavioral observations (approximately 75 min postinjection),
injected fish were deeply anesthetized and killed by spinal section. Whole
brains were excised, placed in RNA later (Applied Biosystems Canada, Streetsville,
Ontario) and stored at −20° C until further use. Brain regions were subsequently
dissected and total RNA was extracted using a RNAqueous-Micro kit (Ambion Inc.,
Austin, TX) according to the manufacturer's protocol. Final RNA concentrations were
determined by optical density reading at 260 nm using a NanoDrop ND-1000
spectrophotometer (NanoDrop Technologies Inc., Wilmington, USA). The quality of
RNA samples was assessed by measuring the ratio of sample absorbance at 260 and
280 nm. Only RNA samples with a ratio between 1.8 and 2.1 were used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างการสกัดอาร์เอ็นเอและการถอดรหัสย้อนกลับ
ทันทีหลังจากที่การสังเกตพฤติกรรม (ประมาณ 75 นาที postinjection)
ปลาฉีดดมยาสลบได้อย่างลึกซึ้งและถูกฆ่าโดยส่วนกระดูกสันหลัง
ทั้งสมองถูกพอวางไว้ในอาร์เอ็นเอภายหลัง (ใช้ศาสตร์ในแคนาดา Streetsville
ontario) และเก็บไว้ที่ -20 องศาเซลเซียสจนใช้งานต่อไป บริเวณสมองที่มีต่อมา
ชำแหละและ RNA รวมถูกสกัดโดยใช้ชุด rnaqueous ไมโคร (ambion inc.,
ออสติน) ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต RNA ความเข้มข้นสุดท้ายถูก
กำหนดโดยการอ่านความหนาแน่นของแสงที่ 260 นาโนเมตรโดยใช้ nanodrop ครั้ง-1000
Spectrophotometer (เทคโนโลยี nanodrop inc., วิลมิง usa) คุณภาพของ
ตัวอย่าง RNA ได้รับการประเมินโดยการวัดอัตราส่วนของตัวอย่างการดูดกลืนแสงที่ 260 และ
280 นาโนเมตร เพียงตัวอย่าง RNA มีอัตราส่วนระหว่าง 1.8 และ 2.1 ถูกนำมาใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สุ่มตัวอย่าง สกัดอาร์เอ็นเอ และ transcription ย้อน
ทันทีหลังจากการสังเกตพฤติกรรม (ประมาณ 75 นาที postinjection),
ปลาฉีดลึก anesthetized และฆ่า โดยส่วนสันหลัง ทั้งหมด
สมองถูก excised อยู่ในอาร์เอ็นเอในภายหลัง (Biosystems ใช้แคนาดา Streetsville,
ออนตาริโอ) และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนกระทั่งใช้ต่อไป สมองภูมิภาคได้มา
อาร์เอ็นเอ dissected และทั้งหมดถูกสกัดโดยใช้ชุดไมโคร RNAqueous (Ambion Inc.,
ออสติน เท็กซัส) ตามโพรโทคอลของบริษัทผู้ผลิต มีความเข้มข้นสุดท้ายของอาร์เอ็นเอ
ตามความหนาแน่นออปติคอลอ่านที่ 260 nm ใช้ 1000-ND ที่ NanoDrop
เครื่องทดสอบกรดด่าง (NanoDrop เทคโนโลยี อิงค์ วิลมิ สหรัฐอเมริกา) คุณภาพของ
ตัวอย่างอาร์เอ็นเอถูกประเมิน โดยวัดอัตราส่วนของตัวอย่าง absorbance ที่ 260 และ
280 nm ใช้เฉพาะอาร์เอ็นเอตัวอย่าง ด้วยอัตราส่วนระหว่าง 1.8 และ 2.1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสุ่มตัวอย่างเลือดและการถอดสคริปต์ rna ย้อนกลับ
ซึ่งจะช่วยได้ทันทีหลังจากการสังเกตการณ์พฤติกรรม(ประมาณ 75 นาที postinjection )
แบบฉีดขึ้นรูปปลาอยู่ anesthetized ลึกและถูกฆ่าตายโดยมาตรากระดูกสันหลัง
ซึ่งจะช่วยทั้งสมองเป็น excised วางไว้ใน rna ใน ภายหลัง (ใช้ biosystems แคนาดา streetsville
, Ontario )และจัดเก็บไว้ที่ 20 °จนใช้งานได้อีก เขตพื้นที่สมองได้ ภายหลัง
ตามมาตรฐานrna dissected และสกัดการใช้ RN aqueous-micro ชุด( ambion , Inc .
ออสติน, TX )ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต สุดท้าย rna ความเข้มข้นมี
ถูกกำหนดโดยความหนาแน่นออปติคอลไดรฟ์อ่านหนังสือที่ 260 nm โดยใช้ nanodrop . - 1000
ตรวจสอบ( nanodrop Technologies , Inc ., Wilmington ,สหรัฐอเมริกา) คุณภาพ ของตัวอย่าง
rna ได้ประเมินโดยการวัดสัดส่วนของ absorbance ตัวอย่างที่ 260 และ
280 นิวตันเมตร เฉพาะตัวอย่าง rna พร้อมด้วยอัตราระหว่าง 1.8 และ 2.1 ได้ถูกนำมาใช้