L. rhamnosus CTC1679 was previously

L. rhamnosus CTC1679 was previously confirmed to form red colonies
with a white spot on M-RTLV agar plates (results not shown).
In order to monitor the inoculated strain L. rhamnosus CTC1679 in
fuets from both batches, five colonies with a typical morphology
were selected from M-RTLV agar plates at each sampling time,
streaked onto MRS agar (Merck) and confirmed by RAPD-PCR. The
isolated colonies were resuspended in 200 μl of 6% chelating ion exchange
resin Chelex®-100 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA), heated at
100 °C for 10 min to release DNA from the cells and cooled on ice.
The cell lysate was centrifuged at 14,000 ×g for 10 min and 50 μl of
the supernatant containing the DNA was transferred to a new tube
and stored at 4 °C until further use as a PCR template. The random
primer KS (5′-tcgaggtcgacggtatcg) (Rubio et al., 2013b) was used
for RAPD analysis. Amplification products were analysed by the
QIAxcel System (QIAGEN, Hilden, Germany) using a 12-channel
QIAxcel DNA Screening Cartridge (separation performed using
AM320 method). The size of the PCR products was scored with
QIAxcel ScreenGel Software version 1.0.2.0 (QIAGEN).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

L. rhamnosus CTC1679 ได้ยืนยันแบบอาณานิคมแดงก่อนหน้านี้มีจุดสีขาวบน M RTLV agar แผ่น (ไม่แสดงผล)การตรวจสอบต้องใช้ inoculated L. rhamnosus CTC1679 ในfuets จากชุดทั้ง อาณานิคมห้า มีสัณฐานวิทยาทั่วไปเลือกจากแผ่น M RTLV agar ในแต่ละครั้งที่สุ่มตัวอย่างลายบน MRS agar (เมอร์ค) และยืนยัน โดย PCR อาร์เอพีดี ที่อาณานิคมแยกถูก resuspended ใน μl 200% 6 chelating แลกเปลี่ยนไอออนresin Chelex ®-100 (Bio Rad เฮอร์คิวลิส CA, USA), ความร้อนที่100 ° C สำหรับ 10 นาทีไปยังนำดีเอ็นเอจากเซลล์ และระบายความร้อนด้วยบนน้ำแข็งเซลล์ lysate ถูก centrifuged ที่ 14000 × g 10 นาทีและ μl 50 ของsupernatant ที่ประกอบด้วยดีเอ็นเอจะถูกถ่ายโอนไปหลอดใหม่และเก็บไว้ที่ 4 ° C จนกว่าจะใช้เพิ่มเติมเป็นแบบ PCR การสุ่มใช้รองพื้น KS (5′-tcgaggtcgacggtatcg) (Rubio et al., 2013b)สำหรับการวิเคราะห์อาร์เอพีดี ขยายผลิตภัณฑ์ถูก analysed โดยระบบ QIAxcel (QIAGEN, Hilden เยอรมนี) ใช้ 12 ช่องสัญญาณตลับการตรวจดีเอ็นเอ QIAxcel (แยกดำเนินการโดยใช้AM320 วิธี) ขนาดของผลิตภัณฑ์ PCR ได้คะแนนด้วยQIAxcel ScreenGel ซอฟต์แวร์รุ่น 1.0.2.0 (QIAGEN)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

L. rhamnosus CTC1679 ได้รับการยืนยันก่อนหน้านี้ในรูปแบบอาณานิคมสีแดง
มีจุดสีขาวบน M-RTLV แผ่นวุ้น (ผลไม่แสดง).
เพื่อที่จะตรวจสอบสายพันธุ์เชื้อ L. rhamnosus CTC1679 ใน
fuets จากแบตช์ทั้งห้าอาณานิคมที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาทั่วไป
ได้รับการคัดเลือกจาก M-RTLV วุ้นแผ่นในแต่ละช่วงเวลาการสุ่มเก็บตัวอย่าง
ลายลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS (เมอร์) และได้รับการยืนยันโดย RAPD-PCR
อาณานิคมแยกถูก resuspended ใน 200 ไมโครลิตร 6% แลกเปลี่ยนไอออนคีเลท
เรซินChelex®-100 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA), ความร้อนที่
100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีที่จะปล่อยดีเอ็นเอจากเซลล์และระบายความร้อนบนน้ำแข็ง
เซลล์ที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 14,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและ 50 ไมโครลิตรของ
สารละลายที่มีดีเอ็นเอที่ถูกย้ายไปเป็นหลอดใหม่
และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนกว่าจะใช้งานต่อไปเป็นแม่แบบ PCR สุ่ม
ไพร KS (5'-tcgaggtcgacggtatcg) (รูบิโอ et al., 2013b) ถูกนำมาใช้
สำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ ผลิตภัณฑ์ขยายการวิเคราะห์
ระบบ QIAxcel (QIAGEN, ฮิลเดน, เยอรมนี) ใช้ 12 ช่อง
QIAxcel ตลับดีเอ็นเอคัดกรอง (แยกดำเนินการโดยใช้
วิธีการ AM320) ขนาดของผลิตภัณฑ์พีซีอาร์เป็นฝ่ายที่มี
QIAxcel ScreenGel ซอฟแวร์เวอร์ชั่น 1.0.2.0 (QIAGEN)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฉัน rhamnosus ctc1679 ก่อนหน้านี้ยืนยันรูปแบบอาณานิคมแดง
ที่มีจุดขาว m-rtlv วุ้นแผ่น ( ผลลัพธ์ไม่แสดง ) .
เพื่อตรวจสอบสายพันธุ์เชื้อ L . rhamnosus ctc1679 ใน
fuets จากทั้งชุด 5 อาณานิคมกับ
สัณฐานวิทยาทั่วไปจำนวน m-rtlv แผ่นวุ้นที่แต่ละคนเวลา
ลายบน นาง agar ( Merck ) และยืนยันโดยชื่อเรื่อง .
กาเวียนเป็น resuspended 200 μ L 6 % และแลกเปลี่ยนไอออนเรซิน
chelex ® - 100 ( ไบโอ ราด , Hercules , CA , USA ) อุณหภูมิ 100 องศา C
10 นาทีปล่อยดีเอ็นเอจากเซลล์และเย็นบนน้ำแข็ง
เซลล์ lysate คือระดับที่ 14000 × G สำหรับ 10 นาที และ 50 μ l
น่านที่มีดีเอ็นเอถูกส่งไป
หลอดใหม่และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C จนกว่าจะมีใช้เป็นดีเอ็นเอแม่แบบสุ่ม
primer KS ( 5 ’ - tcgaggtcgacggtatcg ) ( รูบิโอ et al . , 2013b ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ด้วย
. ผลิตภัณฑ์แบบวิเคราะห์โดย
( เพิ่มระบบ qiaxcel Hilden , เยอรมนี ) โดยใช้ดีเอ็นเอ 12 qiaxcel คัดกรองตลับช่อง
( แยกวิเคราะห์โดยใช้วิธี am320
) ขนาดของผลิตภัณฑ์ PCR คือคะแนนด้วย
qiaxcel screengel ซอฟแวร์รุ่น 1.0.2.0 ( เพิ่ม )