The 3 mL standard reaction mixture, prepared
in a cuvette, contained 2.35 mLof 0.05 mol L1 acetate buffer,pH5.2,
0.3 mL inhibition stock solution (or acetate buffer for the control),
0.3 mL of 20 mmol L1 chlorogenic acid solution prepared in the
same acetate buffer, and 0.05 mL PPO extract. The reference cuvette
contained only the chlorogenic acid solution and acetate buffer. The
changes in absorbance at 420 nm and 25 C for 2 min were
measured using a Shimadzu PharmaSpec UV-1700 UVevis spectrophotometer
(Shimadzu Scientific Instruments, Inc., Columbia,
MD, USA). The enzyme activity was determined based on the initial
reaction rates. The inhibition of PPO activity was expressed as
percent inhibition which was calculated by the formula:
3
มิลลิลิตรผสมปฏิกิริยามาตรฐานที่จัดทำในcuvette ที่มี mLof 2.35 0.05 mol L 1 บัฟเฟอร์อะซิเตท, pH5.2,
0.3 มิลลิลิตรยับยั้งการแก้ปัญหาหุ้น (หรืออะซิเตตบัฟเฟอร์สำหรับควบคุม)
0.3 มิลลิลิตร 20 มิลลิโมล L 1 chlorogenic
เตรียมสารละลายกรดในบัฟเฟอร์acetate เดียวกันและ 0.05 มลสารสกัดจาก PPO cuvette
อ้างอิงมีเพียงสารละลายกรดchlorogenic และบัฟเฟอร์อะซิเตท
การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 420 นาโนเมตรและ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2
นาทีถูกวัดโดยใช้PharmaSpec Shimadzu UV-1700 spectrophotometer UVevis
(Shimadzu เครื่องมือวิทยาศาสตร์, Inc, โคลัมเบีย,
MD, USA)
กิจกรรมของเอนไซม์ที่ได้รับการพิจารณาจากการเริ่มต้นที่อัตราการเกิดปฏิกิริยา ยับยั้งการ PPO
กิจกรรมที่ได้รับการแสดงเป็นยับยั้งที่ร้อยละที่คำนวณได้จากสูตร:
การแปล กรุณารอสักครู่..
3 ml มาตรฐานปฏิกิริยาที่ผสมเตรียมไว้
ในคิวเวตต์ที่มีอยู่ 2.35 mlof 0.05 mol / 1 อะซิเตทบัฟเฟอร์ ph5.2 0.3 มล. ยับยั้งหุ้นโซลูชั่น
, ( หรืออาซีเตตบัฟเฟอร์สำหรับการควบคุม ) , 0.3 มล.
20 mmol l 1 chlorogenic acid เตรียมสารละลายบัฟเฟอร์ใน
, เดียวกัน , และ 0.05 มิลลิลิตร PPO สารสกัด การอ้างอิงพิทยาพล
ที่มีอยู่เพียง chlorogenic กรดสารละลายเตตบัฟเฟอร์
การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 420 nm และ 25 C 2 นาที
วัดโดยใช้เครื่อง Shimadzu pharmaspec uv-1700 uvevis
( Shimadzu เครื่องมือวิทยาศาสตร์ , Inc , โคลัมเบีย ,
MD , USA ) กิจกรรมของเอนไซม์ถูกกำหนดตามอัตราปฏิกิริยาแรก
การยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์ PPO ได้แสดงเป็น
เปอร์เซนต์ซึ่งถูกคำนวณโดยสูตร :
การแปล กรุณารอสักครู่..