A novel format (Fig. 2) was designe

A novel format (Fig. 2) was designed for RIGS kit, so that it enables the detection of TBSV on a single strip. Thecolloidal-gold-conjugated solution of antisera raised against TBSV was mixed in equal quantities and applied on 26 × 1.7 cm conjugate pads (Standard 14) and dried under dry air for 10 - 15 min. TBSV IgG–ovalbumin conjugate was diluted in 0.02 M sodium phosphate buffer, (pH8.0) containing 1% sucrose to a final concentration of 2 mg/mL and applied as a 0.5 mm thick, 26 cm line, centrally at 1.25 cm from the top and bottom ends on one side of a 2.5 × 26 cm nitrocellulose plastic backed membrane strip, using a locally fabricated airbrush device (Innovative Biosciences, India). Nitrocellulose membrane was cut into sections (2.5 cm × 26 cm). Test line was coated with TBSV-IgG conjugate, which was applied to each membrane in 1 g/L TBSV using TLC conjugate sampler (Sambrook
et al., 1989). The distance between the test line and control line was 6 mm. The test strips were dried at 37oC for 30 min. TBSV IgG–ovalbumin conjugate was diluted in 0.02 M sodium phosphate buffer (pH8.0) containing 1% sucrose to a final concentration of 3 μg/mL and applied as a 1mm thick, 26 cm line, at 0.5 cm from the top end of the membrane. The membrane was dried at 50oC under a dry wind blower for 10 - 15 min and blocked with PBS containing 2% ovalbumin and 1.5% sucrose. The membrane was dried at 50oC under a dry

wind blower for 10-15 min and washed twice with 0.01 M, sodium phosphate buffer, pH7.2 before drying it for 10 - 15 min at 50oC. A polyethylene plastic sheet (26 × 8 cm) of 0.2 mm thickness was coated with acrylic adhesive on one side and the 2.5 cm wide membrane was placed centrally at a spacing of 1.5 cm from the top and 4cm from the bottom end of the sheet. The conjugate coated glass-fiber pad was placed on the lower end of the membrane, so as to overlap 2mm on it. A filter pad was placed to overlap 2 mm on the lower end of the conjugate release pad to act as sample pad and another pad (CF4) was placed to overlap 2 mm on the upper end of the membrane to act as absorbent pad. The assembly was cold-laminated using an 8 cm wide transparent adhesive tape. The laminated 26 × 8 cm assembly was cut into lateral- flow strips of 8 × 0.4 cm. The strips were stored in an airtight plastic bottle containing a desiccant pack. Extraction of TBSV-infected tomato Tomato leaf tissues infected by TBSV were extracted with 5 mL of 0.5X PBS (pH7.4) solution using tissue grinder (Agdia, USA). Then the crude sap was precipitated briefly and the supernatant was used for specificity of RIGS kit.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รูปแบบนวนิยาย (Fig. 2) ถูกออกแบบมาสำหรับชุด RIGS ให้ทำการตรวจพบ TBSV บนแถบเดียว โซลูชั่น Thecolloidal-ทองกลวงของ antisera ขึ้นกับ TBSV ผสมในปริมาณที่เท่ากัน และใช้กับ 26 × 1.7 ซม. conjugate แผ่น (14 มาตรฐาน) และแห้งภายใต้อากาศแห้งสำหรับผสมใน 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์, (pH8.0) มี 1% ซูโครสจะเข้มข้นสุดท้ายของ 2 mg/mL และใช้เป็น 0.5 mm หนา 10-15 นาที TBSV IgG – ovalbumin ค่าสังยุค , 26 ซม.บรรทัด ศูนย์กลาง 1.25 cm จากปลายบนและล่างบนด้านหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. nitrocellulose สำรองเยื่อพลาสติกแถบ ใช้อุปกรณ์ประกอบเครื่องแอร์บรัช (เวลาออกนวัตกรรม อินเดีย) เมมเบรน nitrocellulose ถูกตัดเป็นส่วน (2.5 cm × 26 เซนติเมตร) รายการทดสอบที่เคลือบ ด้วย TBSV IgG ค่าสังยุค ซึ่งถูกใช้กับเมมเบรนแต่ละใน 1 บัญชี TBSV โดยใช้ TLC (Sambrook conjugate แซมเพลอร์ร้อยเอ็ด al., 1989) 6 มม.ระยะห่างระหว่างการทดสอบและควบคุมบรรทัดได้ แถบทดสอบได้แห้งที่ 37oC สำหรับค่าสังยุค TBSV IgG – ovalbumin 30 นาทียกเว้นใน 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH8.0) ที่ประกอบด้วยซูโครส 1% ให้ความเข้มข้นสุดท้ายของ μg 3 mL และใช้เป็น 1mm หนา 26 ซม.เส้น ที่ 0.5 ซม.จากเมมเบรนสุด เยื่อที่แห้งที่ 50oC ภายใต้อากาศแห้งลมสำหรับ 10-15 นาที และถูกบล็อค ด้วย PBS ที่ประกอบด้วยซูโครส ovalbumin และ 1.5% 2% เมมเบรนได้แห้งที่ 50oC ภายใต้ความแห้ง ลมพัดลมระบายอากาศสำหรับ 10-15 นาที และล้าง ด้วย 0.01 M สอง pH7.2 ก่อนการอบแห้งสำหรับ 10-15 นาทีที่ 50oC โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พลาสติกพลาสติกแผ่น (26 × 8 เซนติเมตร) ของความหนา 0.2 มม.ถูกเคลือบ ด้วยกาวอะคริลิด้านหนึ่ง และซม. 2.5 กว้างเมมเบรนถูกวางไว้กลางที่ระยะห่างของ 1.5 ซม. จากด้านบน และ 4 ซม.จากปลายด้านล่างของแผ่น แผ่นเคลือบ conjugate ใยแก้วที่อยู่ในส่วนล่างของเมมเบรน เพื่อซ้อน 2 มม.ใน แผ่นกรองถูกวางทับ 2 มม.ในส่วนล่างของแผ่นรุ่น conjugate ทำหน้าที่เป็นแผ่นตัวอย่าง และอีกแผ่น (CF4) ถูกวางทับ 2 มม.ในส่วนบนของเมมเบรนทำหน้าที่เป็นแผ่นดูดซับ แอสเซมบลีที่ถูกเย็นเคลือบเทป 8 ซ.ม.กว้างโปร่งใสยึดติดโดยใช้ แอสเซมบลีเคลือบ 26 × 8 เซนติเมตรถูกตัดเป็นแถบด้านข้างไหลของ 8 × 0.4 ซม. แถบถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกแบบสุญญากาศประกอบด้วยแพคความชื้น การแยกเนื้อเยื่อใบมะเขือเทศมะเขือเทศ TBSV ติดเชื้อ TBSV ถูกสกัด ด้วย 5 mL ของ 0.5 X โซลูชัน PBS (pH7.4) โดยใช้เครื่องบดเนื้อเยื่อ (Agdia สหรัฐอเมริกา) แล้วซับน้ำมันถูกตะกอนสั้น ๆ และ supernatant ที่ใช้สำหรับ specificity RIGS ชุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รูปแบบนวนิยาย (รูปที่. 2) ได้รับการออกแบบสำหรับชุดแท่นขุดเจาะเพื่อที่จะช่วยให้การตรวจสอบของ TBSV บนแถบเดียว วิธีการแก้ปัญหา Thecolloidal ทองผันของ antisera ขึ้นกับ TBSV ผสมในปริมาณที่เท่ากันและนำไปใช้ในวันที่ 26 × 1.7 ซม. แผ่นคอนจูเกต (Standard 14) และแห้งภายใต้อากาศแห้ง 10-15 นาที TBSV ผัน IgG-ovalbumin ถูกเจือจางใน 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH8.0) ที่มีน้ำตาลซูโครส 1% ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและนำไปใช้เป็น 0.5 มมหนา 26 ซม. เส้นส่วนกลางที่ 1.25 ซม. จาก บนและด้านล่างจะสิ้นสุดลงในอีกด้านหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. พลาสติก nitrocellulose แถบเมมเบรนได้รับการสนับสนุนโดยใช้อุปกรณ์ที่ประดิษฐ์ในประเทศพู่กัน (ชีววิทยาศาสตร์นวัตกรรมอินเดีย) เมมเบรน nitrocellulose ถูกตัดออกเป็นส่วน ๆ (2.5 ซม. × 26 ซม.) สายการทดสอบได้รับการเคลือบด้วยคอนจูเกต TBSV-IgG ซึ่งถูกนำไปใช้กับเมมเบรนในแต่ละ 1 กรัม / ลิตร TBSV ใช้ตัวอย่างผัน TLC (Sambrook
et al., 1989) ระยะห่างระหว่างสายการทดสอบและสายควบคุม 6 มม แถบทดสอบแห้งที่ 37oC เป็นเวลา 30 นาที TBSV ผัน IgG-ovalbumin ถูกเจือจางใน 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH8.0) ที่มีน้ำตาลซูโครส 1% ความเข้มข้นสุดท้ายของ 3 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและนำไปใช้เป็น 1mm หนา 26 ซม. เส้นที่ 0.5 ซม. จากปลายด้านบนของ เมมเบรน เมมเบรนแห้งที่ 50oC ภายใต้เป่าลมแห้ง 10-15 นาทีและถูกปิดกั้นด้วยพีบีเอสที่มี ovalbumin 2% และ 1.5% น้ำตาลซูโครส เมมเบรนแห้งที่ 50oC ภายใต้แห้งเป่าลมประมาณ10-15 นาทีและล้างครั้งที่สองกับ 0.01 มฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซเดียม pH7.2 ก่อนอบแห้งสำหรับ 10-15 นาทีที่ 50oC พลาสติกชนิดแผ่นพลาสติก (26 × 8 เซนติเมตร) 0.2 มมความหนาเคลือบด้วยกาวอะคริลิในด้านหนึ่งและ 2.5 ซม. กว้างเมมเบรนที่วางอยู่ใจกลางเมืองที่ระยะห่างของ 1.5 ซม. จากด้านบนและ 4 ซมจากปลายด้านล่างของแผ่นที่ แผ่นใยแก้วเคลือบผันถูกวางลงบนปลายล่างของเมมเบรนเพื่อให้เป็นไปทับซ้อน 2mm กับมัน แผ่นกรองถูกนำมาวางทับซ้อนกัน 2 มิลลิเมตรที่ปลายล่างของแผ่นปล่อยคอนจูเกตจะทำหน้าที่เป็นตัวอย่างแผ่นและแผ่นอื่น (CF4) ถูกนำมาวางทับซ้อนกัน 2 มมปลายบนของเมมเบรนจะทำหน้าที่เป็นแผ่นดูดซับ การชุมนุมเป็นเย็นเคลือบใช้ 8 ซม. กว้างเทปกาวใส ลามิเนต 26 × 8 ซมชุมนุมถูกตัดเป็นเส้นไหล lateral- 8 × 0.4 ซม. แถบถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกสุญญากาศที่มีแพ็คสารดูดความชื้น การสกัดมะเขือเทศ TBSV เชื้อเนื้อเยื่อใบมะเขือเทศติดเชื้อโดย TBSV ถูกสกัดด้วย 5 มิลลิลิตร 0.5 เท่าพีบีเอส (pH7.4) วิธีการแก้ปัญหาโดยใช้เครื่องบดเนื้อเยื่อ (Agdia สหรัฐอเมริกา) แล้วน้ำนมดิบได้รับการตกตะกอนในเวลาสั้น ๆ และสารละลายที่ใช้สำหรับความจำเพาะของชุดแท่นขุดเจาะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปแบบใหม่ ( รูปที่ 2 ) ถูกออกแบบมาสำหรับชุดแท่นขุดเจาะ เพื่อให้มันสามารถตรวจหาของ tbsv บนแถบเดียว thecolloidal ทองและแก้ไขแอนติยกกับ tbsv ผสมในปริมาณที่เท่ากัน และใช้กับ 26 × 1.7 ซม. ) ( มาตรฐาน 14 แผ่น ) และแห้งในอากาศแห้ง 10 - 15 นาที tbsv IgG –โอวัลบูมินผันเจือจางใน 0.02 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( ph8 .0 ) ที่ประกอบด้วย 1% ซูโครสความเข้มข้นสุดท้าย 2 mg / ml และใช้เป็น 0.5 มม. หนา , สายซม. 26 จากส่วนกลางที่ 1.25 ซม. จากด้านบนและด้านล่างปลายข้างหนึ่งของ 2.5 × 26 ซม. แถบพลาสติกแผ่นไนโตร ได้รับการสนับสนุน โดยใช้พื้นที่ประดิษฐ์อุปกรณ์แอร์บรัช ( ชีววิทยาศาสตร์ , อินเดียใหม่ ) . ไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนถูกตัดออกเป็นส่วน ( 2.5 cm × 26 ซม. )แนวข้อสอบถูกเคลือบด้วย tbsv IgG ) ซึ่งจะใช้แต่ละแผ่นใน 1 กรัม / ลิตร tbsv โดยใช้ TLC ) ตัวอย่าง ( sambrook
et al . , 1989 ) ระยะห่างระหว่างบรรทัดการทดสอบและการควบคุมสาย 6 มิลลิเมตร แถบทดสอบที่อุณหภูมิ 37oc เป็นเวลา 30 นาที tbsv IgG –โอวัลบูมินผันเจือจางใน 0.02 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( ph8 .0 ) ที่ประกอบด้วย 1% ซูโครสความเข้มข้นสุดท้าย 3 μ g / ml และใช้เป็น 1mm หนาเส้นซม. 26 , 0.5 ซม. จากด้านบนสุดของเมมเบรน เยื่อแผ่นแห้ง ที่ 50oc ภายใต้เป่าลมแห้ง 10 - 15 นาที และถูกปิดกั้นด้วย PBS ที่มีโอวัลบูมิน 2% และ 1.5% ซูโครส เยื่อแผ่นแห้ง ที่ 50oc ภายใต้บริการ

ลมเป่าประมาณ 10-15 นาทีและล้างสองครั้งกับ 0.01 Mโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ph7.2 ก่อนแห้ง 10 - 15 นาที ที่ 50oc . เป็นแผ่นพลาสติก Polyethylene ( 26 × 8 ซม. ) ความหนา 0.2 มม. ถูกเคลือบด้วยกาวอะคริลิคบนด้านหนึ่งและ 2.5 ซม. กว้างแบบเมมเบรนถูกวางด้วยระยะห่างของ 1.5 ซม. จากด้านบนและ 4 ซม. จากปลายล่างของแผ่น เบสเคลือบไฟเบอร์กลาสแผ่นวางอยู่บนปลายล่างของเยื่อเพื่อซ้อน 2 mm ครับ เป็นแผ่นกรองวางซ้อนกัน 2 เดือนบนปลายล่างของผันปล่อยแผ่นเป็นแผ่นตัวอย่างและแผ่นอื่น ( CF4 ) ถูกวางทับซ้อนกัน 2 เดือนบนปลายบนของเยื่อ แสดงเป็น แผ่นรองดูดซับ ชุมนุมเย็นเคลือบใช้ 8 ซม. กว้างใสเทปกาว ลามิเนต 26 × 8 ซม. ประกอบที่ถูกตัดเป็นแถบด้านข้าง - ไหล 8 × 04 เซนติเมตร แถบที่ถูกเก็บไว้ในขวดพลาสติกบรรจุภัณฑสารดูดความชื้นแพ็ค การสกัด tbsv ติดเชื้อมะเขือเทศมะเขือเทศใบเนื้อเยื่อที่ติดเชื้อโดย tbsv สกัด 5 มิลลิลิตร ( ph7.4 ( PBS ) สารละลายโดยใช้เครื่องบดเนื้อเยื่อ ( agdia , USA ) แล้วซับดิบตกตะกอนสั้นและสูงใช้ชุด rigs
specificity