Extractions and assays of ATP, ADP

Extractions and assays of ATP, ADP and AMP were conducted by applying the method of Ozogul et al. (2000) with a minor modification. Longan pericarp tissue (5 g from 10 fruit) was ground in liquid nitrogen to obtain a fine powder. The powder was then homogenized with 25 mL of 0.6 M perchloric acid. The homogenate was centrifuged at 16,000 × g for 10 min at 4◦C. The supernatant(10 mL) was quickly neutralized to pH 6.5–6.8 using 1 M KOH, and then diluted to 4 mL and passed through a 0.45 m filter. Contents of ATP, ADP and AMP were measured by a Waters 2695 analytical high performance liquid chromatography with DAD detector(HPLC, Waters Corporation, USA) using a Megres TMC 18 column(4.6 mm × 250 mm) and an ultraviolet detector at 254 nm. Mobile phase A consisted of 0.05 M dipotassium hydrogen phosphate and0.05 M potassium dihydrogen phosphate dissolved in deionized water and then was adjusted to pH 7.0 with 0.1 M KOH. Mobile
phase B was pure methanol. The elution was conducted by a linear gradient program with 85–100% A and 0–15% B for 35 min, with flow rate of 20 L s−1. Samples of 50 L were injected into the HPLC.ATP, ADP and AMP contents were calculated according to the external standard program. Energy charge was calculated by [ATP + 1/2 ADP]/[ATP + ADP + AMP]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดและ assays ATP, ADP และ AMP ได้ดำเนินการ โดยใช้วิธีของ Ozogul et al. (2000) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เนื้อเยื่อ pericarp ลำไย (5 กรัมจากผลไม้ 10) ถูกพื้นในไนโตรเจนเหลวเพื่อให้ได้ผงดี ผงถูกแล้ว homogenized เป็นกลุ่มกับ 25 มิลลิลิตรของกรด perchloric 0.6 M Homogenate ถูก centrifuged ที่ 16000 × g ใน 10 นาทีที่ 4◦C Supernatant (10 มล.) ได้อย่างรวดเร็ว neutralized กับค่า pH 6.5-6.8 M 1 เกาะ ใช้แล้วผสมกับ 4 mL และผ่านตัวกรอง 0.45 m เนื้อหาของ ATP, ADP และ AMP ถูกวัด โดย chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงวิเคราะห์น้ำ 2695 จับพ่อ (HPLC น้ำ Corporation, USA) โดยใช้คอลัมน์ Megres TMC 18 (4.6 มม. × 250 มม.) และมีเครื่องตรวจจับรังสีอัลตราไวโอเลตที่ 254 nm เฟสเคลื่อนที่ A ประกอบด้วย 0.05 M dipotassium ไฮโดรเจนฟอสเฟต and0.05 M โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟตละลายในน้ำ deionized และถูกปรับให้ค่า pH 7.0 0.1 เมตรเกาะ โทรศัพท์มือถือระยะ B มีเมทานอลบริสุทธิ์ Elution ที่ถูกดำเนินการโปรแกรมเชิงเส้นไล่ระดับ A 85 – 100% และ 0 – 15% B 35 นาที มีอัตราการไหลของ s−1 20 L ตัวอย่างของ 50 L ถูกฉีดเข้าไปในการ HPLCATP, ADP และ AMP เนื้อหามีคำนวณตามโปรแกรมมาตรฐานภายนอก มีคำนวณค่าพลังงานโดย [1/2 + ATP ADP] / [ATP ADP + AMP]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดสารและการตรวจของเอทีพี ADP และแอมป์ได้รับการดำเนินการโดยใช้วิธีการของÖzogulและคณะ (2000) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เนื้อเยื่อเปลือกลำไย (5 กรัมจาก 10 ผลไม้) เป็นพื้นดินในไนโตรเจนเหลวที่จะได้รับเป็นผงละเอียด ผงที่ได้รับการหดหายแล้วด้วย 25 มิลลิลิตร 0.6 M กรด perchloric homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 16,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่4◦C ใส (10 มิลลิลิตร) ได้เป็นกลางอย่างรวดเร็วเพื่อให้ค่า pH 6.5-6.8 โดยใช้ 1 M KOH และลดลงเหลือ 4 มิลลิลิตรและผ่าน 0.45? เมตรกรองแล้ว เนื้อหาของเอทีพีและ ADP AMP ถูกวัดโดยการวิเคราะห์ของเหลว chromatography 2695 น้ำประสิทธิภาพสูงที่มีเครื่องตรวจจับ DAD (HPLC น้ำคอร์ปอเรชั่นสหรัฐอเมริกา) โดยใช้ Megres TMC 18 คอลัมน์ (4.6 มิลลิเมตร× 250 มิลลิเมตร) และเครื่องตรวจจับรังสีอัลตราไวโอเลตที่ 254 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.05 M dipotassium ฟอสเฟตไฮโดรเจน and0.05 M โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟตที่ละลายในน้ำปราศจากไอออนและจากนั้นได้รับการปรับค่า pH 7.0 กับ 0.1 M KOH โทรศัพท์มือถือ
ขั้นตอน B เป็นเมทานอลบริสุทธิ์ ชะได้ดำเนินการโดยโปรแกรมลาดเชิงเส้นที่มี 85-100% และ 0-15% B 35 นาที, มีอัตราการไหลของ 20? L s-1 ตัวอย่างจาก 50? L ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC.ATP, ADP และเนื้อหา AMP จะถูกคำนวณตามโปรแกรมมาตรฐานภายนอก ค่าใช้จ่ายพลังงานที่คำนวณได้จาก [เอทีพี + 1/2 ADP] / [เอทีพี + ADP + แอมป์]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดหรือ ATP ADP และ , และแอมป์ได้ดำเนินการโดยการใช้วิธีการ ozogul et al . ( 2000 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เนื้อเยื่อเปลือกลำไย ( 5 กรัมจาก 10 ผลไม้ ) คือบดในไนโตรเจนเหลว เพื่อให้ได้ผงละเอียด แป้ง แล้วบดกับ 25 มล. 0.6 M เปอร์คลอริกแอซิด . โดยแยกเป็นระดับที่ 16000 × G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ◦ Cและน่าน ( 10 ml ) ได้อย่างรวดเร็วทำให้ pH 6.5 ( 6.8 ใช้ 1 M เกาะแล้วประมาณ 4 ml และผ่าน 0.45  M ตัวกรอง เนื้อหาของ ATP ADP และแอมป์ , วัดน้ำประสิทธิภาพสูง โดย 2695 วิเคราะห์ของเหลว chromatography ( HPLC และเครื่องตรวจจับพ่อน้ำ Corporation , USA ) ใช้ megres TMC 18 คอลัมน์ ( × 4.6 มม. 250 มม. ) และเครื่องตรวจจับรังสีอัลตราไวโอเลตที่ 254 นาโนเมตรเฟสเคลื่อนที่เป็นจำนวน 0.05 M ไดไฮโดรเจนฟอสเฟต and0.05 M โพแทสเซียม dihydrogen ฟอสเฟตที่ละลายในน้ำ และก็คล้ายเนื้อเยื่อประสานค่า pH 7.0 ด้วย 0.1 M โค โทรศัพท์มือถือ
เฟส B บริสุทธิ์ เมทานอล ที่ได้มาโดยโปรแกรมไล่ระดับเส้น 85 – 0 – 100 % และ 15 % B 35 นาที อัตราการไหลของ 20  L s − 1 ตัวอย่างของ 50  ผมถูกฉีดเข้าไปใน hplc.atp ,ADP และแอมป์เนื้อหาได้ตามโปรแกรมมาตรฐานภายนอก ประจุพลังงานถูกคำนวณโดย ATP ADP [ 1 / 2 ] / [ ATP ADP แอมป์ ]