3.5. Promoter analysis of ACS1 and

3.5. Promoter analysis of ACS1 and ERS1
Expression analyses of MdACS1 and MdERS1 gene suggest
that both genes are regulated by the levels of ethylene produced
which might be due to a common regulatory mechanism for the
expression of both the genes. To determine if promoters of both
genes posses some common cis-acting elements, we cloned
797 bp proximal promoter of MdERS1 gene (EMBL accession
no. AY359467) and the sequence of the MdACS1 promoter was
downloaded from the genebank (EMBL accession no
Fig. 4. Ethylene production (A) and accumulation of MdACS1 and MdERS1
transcripts (B) in GS apples fruits. Fruits were stored at 1 °C and then transferred
to 18 °C after 8 days post harvest. One day after transfer to 18 °C, some
fruits were treated with 1 ppm 1-MCP and connected to air supply (M). Time
points S1 and S2 refer to the time when fruits were harvested for northern
analysis. Northern blot analysis was carried out using 30 μg total RNA
samples electrophoresed and probed with respective radiolabelled probes.
Ethidium bromide staining of gel is shown below the blot as loading control.
⁎⁎⁎ significantly different from air at P≤0.001 according to Student's unpaired
t-test.
Fig. 5. Ethylene production and accumulation of MdERS1 and MdACS1
transcripts by immature green GS apple fruits treated with ethylene for 24 and
48 h. 1, preclimacteric control fruits; 2, preclimacteric fruit treated with ethylene
for 24 h; 3, preclimacteric fruits treated with ethylene for 48 h; 4, 11 days post
treatment with ethylene for 24 h; 5, 11 days post treatment with ethylene for
48 h. Northern blot analysis was carried out using 30 μg total RNA samples
electrophoresed and probed with respective radiolabelled probes. Ethidium
bromide staining of gel is shown below the blot as loading control. ⁎⁎ and ⁎⁎⁎
significantly different from 2 and 3 at P≤0.01 and 0.001, respectively,
according to Student's unpaired t-test.
M.H. Asif et al. / South African Journal of Botany 75 (2009) 137–144 141
AY062129). Both the promoters were analysed in silico and the
common cis-acting elements are shown in Table 1. Interestingly,
both the promoters contain ethylene responsive element (ERE)
similar to tomato E4 (Montgomery et al., 1993) and carnation
GST1 (Itzhaki et al., 1994) genes. Apart from ERE, both the
genes contain core element of a CuRE (copper-response
element) found in Cyc6 and Cpx1 genes in Chlamydomonas
for the oxygen-response (Quinn et al., 2000).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.5 การวิเคราะห์ก่อการ ACS1 และ ERS1
แสดงออกวิเคราะห์ MdACS1 และยีน MdERS1 แนะนำ
ว่ายีนทั้งสองถูกควบคุมโดยระดับของเอทิลีนที่ผลิต
ซึ่งอาจจะเป็นเพราะกลไกการควบคุมทั่วไปสำหรับ
การแสดงออกของยีนทั้งสอง เพื่อตรวจสอบว่าผู้สนับสนุนของทั้งสอง
ยีน posses องค์ประกอบบางอย่างถูกต้องทำหน้าที่ร่วมกันเราโคลน
797 bp ก่อการใกล้เคียงของยีน MdERS1 (EMBL ภาคยานุวัติ
ไม่มี. AY359467) และลำดับของการก่อการ MdACS1 ถูก
ดาวน์โหลดจาก genebank (EMBL ภาคยานุวัติไม่มี
รูปที่. 4 . การผลิตเอทิลีน (A) และการสะสมของ MdACS1 และ MdERS1
ใบรับรองผลการเรียน (B) ในผลไม้แอปเปิ้ล GS. ผลไม้ถูกเก็บไว้ ณ วันที่ 1 องศาเซลเซียสและจากนั้นก็ย้าย
ไปที่ 18 องศาเซลเซียสหลังจาก 8 วันหลังการเก็บเกี่ยว. วันหนึ่งหลังจากการถ่ายโอนถึง 18 องศาเซลเซียส บางส่วน
ผลไม้ที่ได้รับการรักษาด้วย 1 ppm 1-MCP และเชื่อมต่อกับแหล่งจ่ายอากาศ (M). เวลา
ชี้ S1 และ S2 หมายถึงเวลาที่ผลไม้ได้รับการเก็บเกี่ยวสำหรับภาคเหนือ
วิเคราะห์. วิเคราะห์ blot ภาคเหนือได้ดำเนินการโดยใช้ 30 ไมโครกรัม RNA รวม
ตัวอย่าง electrophoresed และ การตรวจสอบกับยานสำรวจรังสีตามลำดับ.
Ethidium ย้อมสีโบรไมด์เจลที่แสดงด้านล่าง blot การควบคุมการโหลด.
⁎⁎⁎อย่างมีนัยสำคัญที่แตกต่างจากอากาศที่P≤0.001ตามนักศึกษา unpaired
t-test.
รูป. 5. การผลิตเอทิลีนและการสะสมของ MdERS1 และ MdACS1
จิตบำบัดโดยอ่อนสีเขียวผลไม้แอปเปิ้ล GS รับการรักษาด้วยเอทิลีน 24 และ
48 ชั่วโมง 1, ผลไม้ควบคุม preclimacteric; 2, ผลไม้ preclimacteric รับการรักษาด้วยเอทิลีน
เป็นเวลา 24 ชั่วโมง; 3, ผลไม้ preclimacteric รับการรักษาด้วยเอทิลีนเวลา 48 ชั่วโมง; 4, 11 วันที่โพสต์
การรักษาด้วยเอทิลีนเป็นเวลา 24 ชั่วโมง; 5, 11 วันที่โพสต์การรักษาด้วยเอทิลีนสำหรับ
48 ชั่วโมง การวิเคราะห์ทางตอนเหนือของดวงได้รับการดำเนินการโดยใช้ 30 ไมโครกรัมตัวอย่าง RNA ทั้งหมด
electrophoresed และการตรวจสอบกับยานสำรวจรังสีที่เกี่ยวข้อง ethidium
ย้อมสีโบรไมด์เจลที่แสดงด้านล่าง blot การควบคุมการโหลด ⁎⁎และ⁎⁎⁎
อย่างมีนัยสำคัญที่แตกต่างจากที่ 2 และ 3 ที่P≤0.01และ 0.001 ตามลำดับ
ตามที่นักศึกษา unpaired t-test.
MH ราวกับและคณะ / เซาท์แอฟริกันวารสารพฤกษศาสตร์ 75 (2009) 137-144 141
AY062129) ทั้งโปรโมเตอร์ถูกนำมาวิเคราะห์ใน silico และ
องค์ประกอบถูกต้องทำหน้าที่ร่วมกันจะแสดงในตารางที่ 1 ที่น่าสนใจ
ทั้งโปรโมเตอร์มีองค์ประกอบที่ตอบสนองต่อเอทิลีน (ERE)
คล้ายกับมะเขือเทศ E4 (Montgomery et al., 1993) และดอกคาร์เนชั่น
GST1 (Itzhaki และ al., 1994) ยีน นอกเหนือจาก ERE ทั้ง
ยีนที่มีองค์ประกอบหลักของการรักษา (ทองแดงตอบสนอง
องค์ประกอบ) ที่พบใน Cyc6 และยีน CPX1 ใน Chlamydomonas
สำหรับออกซิเจนการตอบสนอง (ควินน์ et al., 2000)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.5 . ผู้สนับสนุนการวิเคราะห์ acs1 และการแสดงออก ers1
การวิเคราะห์ mdacs1 และยีน mders1 แนะนำ
ทั้งยีนควบคุมโดยระดับของเอทิลีนที่ผลิต
ซึ่งอาจเกิดจากกลไกกฎระเบียบทั่วไปสำหรับ
การแสดงออกของทั้งสองยีน เพื่อตรวจสอบว่าโปรโมเตอร์ของยีน posses บางทั่วไป
CIS เป็นองค์ประกอบที่เราโคลน
797 BP ใกล้เคียงโปรโมเตอร์ของยีน mders1 ( สัตวภาคยานุวัติ
.ay359467 ) และการเรียงลำดับของ mdacs1 promoter คือ
ดาวน์โหลดได้จาก genebank ( สัตวชนิดไม่
รูปที่ 4 การผลิตเอทิลีน ( ) และการสะสมของ mdacs1 mders1
( B ) และเก็บไว้ใน GS แอปเปิ้ลผลไม้ ผลไม้ที่ถูกเก็บไว้ที่ 1 ° C และโอน
18 ° C เป็นเวลา 8 วัน หลังการเก็บเกี่ยว . หลังจากวันที่โอน 18 /
c , บางผลของการเก็บรักษา 1 ppm และสามารถเชื่อมต่อกับแหล่งจ่ายอากาศ ( M ) เวลา
จุด S1 และ S2 ดูตอนที่ผลเก็บเกี่ยวสำหรับการวิเคราะห์ทางเหนือ

Northern blot analysis พบว่าการใช้ 30 μกรัมรวมตัวอย่าง RNA
electrophoresed ตรวจสอบที่เกี่ยวข้องและ radiolabelled probes .
คู่ bromide staining เจลที่แสดงด้านล่างเป็นรอยเปื้อน
โหลดการควบคุม⁎⁎⁎แตกต่างจากอากาศที่ P ≤ 0.001 ตามสถิติ Unpaired

นักเรียน รูปที่ 5 การผลิตเอทิลีน และการสะสมของ mders1 mdacs1
ใบอ่อนและสีเขียวแอปเปิ้ลผลไม้โดย GS ได้รับเอทิลีนที่ 24 และ 48 ชั่วโมง ผลไม้ 1
, ควบคุม preclimacteric 2 , ผลไม้ preclimacteric ได้รับเอทิลีน
24 H ; 3 , ผลไม้ preclimacteric ได้รับเอทิลีน 48 h ; 411 วันโพสต์
รักษาเ 24 H ; 5 , 11 วัน หลังการรักษาด้วยเอทิลีน
48 ชั่วโมง ภาคเหนือ เปรอะเปื้อน วิเคราะห์โดยใช้ 30 μกรัมรวมอาร์เอ็นเอตัวอย่าง
electrophoresed ตรวจสอบที่เกี่ยวข้องและ radiolabelled เครื่องมือตรวจสอบ
bromide staining คู่ของเจลที่แสดงด้านล่างเป็นโหลดต่อการควบคุม และ⁎⁎⁎⁎⁎
แตกต่างกันจาก 2 และ 3 ที่ P ≤ 0.01 และ 0.001 ตามลำดับ
ตามสถิติ Unpaired นักเรียน .
m.h. Asif et al . / แอฟริกาใต้วารสารพฤกษศาสตร์ 75 ( 2009 ) 137 - 144 141
ay062129 ) ทั้งโปรและวิเคราะห์สำหรับ
CIS ทั่วไปแสดงองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 1 น่าสนใจ ทั้งโปรโมเตอร์ ประกอบด้วยเอทิลีน
องค์ประกอบการตอบสนอง ( ERE )
คล้ายกับ e4 มะเขือเทศ ( Montgomery et al . , 1993 ) และ gst1 คาร์เนชั่น
( itzhaki et al . , 1994 ) ยีนนอกจากนี่ ทั้ง
ยีนประกอบด้วยองค์ประกอบหลักของการรักษา ( ตอบสนอง
ธาตุทองแดง ) และพบใน cyc6 cpx1 ยีนในแคลมิโดโมแนส
สำหรับออกซิเจนการตอบสนอง ( Quinn et al . , 2000 )