Lipid peroxidation assay (Ferric thiocyanate method, FTC)
Inhibition of the peroxidation-mediated degradation of a lipid matrix (linoleic acid as the model compound and 2,2’-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH), as the free radical initiator) was measured using the ferric thiocyanate method (FTC), following the procedure reported by Olszewska, Presler, and Michel (2012), olive oils with IM < 2, for the 2012/2013 crop season were used.
To a methanolic solution of the olive oil (5.6 mg/ml, 37 μl) and 1.3% (w/v) methanolic linoleic acid (175 μl) in H2O (88 μl) and 0.2 M phosphate buffer (pH 7.0, 175 μl) in a screw-cap vial was added AAPH in buffer (55.3 mM , 25 μl). The control solution was prepared by adding pure MeOH (37 μl), instead of the sample. The vial was incubated at 50 ± 0.1 °C for 24 h in the darkness. After that, an aliquot (30 μl) of the reaction mixture was dissolved in a 3:1 (v/v) H2O–MeOH solution (2.91 ml), and a 10% aqueous solution of NH4SCN (30 μl) and 20 mM FeCl2 in 3.5% HCl (30 μl) were added; after 3 min of incubation at rt, the absorbance was measured at 546 nm against the corresponding blank.
The results are expressed as the percentage of lipid peroxidation inhibition:
Turn MathJax on
Acontrol refers to the solution containing pure MeOH instead of the sample, and Asample refers to the absorbance of oil-containing solutions.
ทดสอบ peroxidation ของไขมัน (thiocyanate เฟอร์วิธี FTC)
ยับยั้งการย่อยสลาย peroxidation mediated ของเมทริกซ์ไขมัน (กรด linoleic ในรูปสารประกอบและ 2,2'-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH), เป็นอุปกรณอนุมูลอิสระเป็น) ถูกวัดโดยใช้วิธี thiocyanate เฟอร์ (FTC), ขั้นตอนการรายงาน โดย Olszewska, Presler, Michel (2012), น้ำมันมะกอกกับ IM < 2 สำหรับฤดูกาล 2012/2013 พืชใช้
โซลูชัน methanolic น้ำมันมะกอก (5.6 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร 37 μl) และ 1.3% (w/v) methanolic linoleic กรด (175 μl) H2O (88 μl) และ 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0, 175 μl) ในคอนแทคสกรูฝาเพิ่ม AAPH ในบัฟเฟอร์ (55.3 มิลลิเมตร 25 μl) โซลูชั่นควบคุมถูกเตรียม โดยการเพิ่มทานอบริสุทธิ์ (37 μl), แทนที่เป็นตัวอย่าง คอนแทคไม่ incubated ที่ 50 ± 0.1 ° C ใน 24 ชมในความมืด หลังจากนั้น เป็นส่วนลงตัว (30 μl) ของผสมปฏิกิริยาถูกละลายในโซลูชัน 3:1 (v/v) ทานอเอชทูโอ (2.91 มล), และละลาย 10% ของ NH4SCN (30 μl) และ 20 มม. FeCl2 3.5% HCl (30 μl) เพิ่ม หลังจาก 3 นาทีของคณะทันตแพทยศาสตร์ที่ rt, absorbance ที่ถูกวัดที่ 546 nm กับว่างตรงกัน
ผลลัพธ์จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของไขมัน peroxidation ยับยั้ง:
MathJax เปิดบน
Acontrol ถึงโซลูชันที่ประกอบด้วยการทานอบริสุทธิ์แทนตัวอย่าง และ Asample ถึง absorbance ของน้ำมันที่ประกอบด้วยโซลูชั่น
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
Lipid peroxidation assay (Ferric thiocyanate method, FTC)
Inhibition of the peroxidation-mediated degradation of a lipid matrix (linoleic acid as the model compound and 2,2’-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH), as the free radical initiator) was measured using the ferric thiocyanate method (FTC), following the procedure reported by Olszewska, Presler, and Michel (2012), olive oils with IM < 2, for the 2012/2013 crop season were used.
To a methanolic solution of the olive oil (5.6 mg/ml, 37 μl) and 1.3% (w/v) methanolic linoleic acid (175 μl) in H2O (88 μl) and 0.2 M phosphate buffer (pH 7.0, 175 μl) in a screw-cap vial was added AAPH in buffer (55.3 mM , 25 μl). The control solution was prepared by adding pure MeOH (37 μl), instead of the sample. The vial was incubated at 50 ± 0.1 °C for 24 h in the darkness. After that, an aliquot (30 μl) of the reaction mixture was dissolved in a 3:1 (v/v) H2O–MeOH solution (2.91 ml), and a 10% aqueous solution of NH4SCN (30 μl) and 20 mM FeCl2 in 3.5% HCl (30 μl) were added; after 3 min of incubation at rt, the absorbance was measured at 546 nm against the corresponding blank.
The results are expressed as the percentage of lipid peroxidation inhibition:
Turn MathJax on
Acontrol refers to the solution containing pure MeOH instead of the sample, and Asample refers to the absorbance of oil-containing solutions.
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
การเกิด lipid peroxidation assay ( วิธี ไทโอไซยาเนตเฟอร์ FTC )
- โดยการยับยั้งของการย่อยสลายของเมทริกซ์ไขมัน ( กรด linoleic เป็นแบบผสมและ 2 , 2 ' - azobis ( 2-methylpropionamidine ) : ( aaph ) เป็นปฏิกิริยาอนุมูลอิสระ ) คือการวัดโดยใช้วิธีไทโอไซยาเนตเฟอร์ริก ( FTC ) , ทำตามขั้นตอน olszewska รายงานโดย presler , และ มิเชล ( 2012 )น้ำมันมะกอกกับ im < 2 สำหรับฤดูกาล 2012 / 2013 ใช้
ให้สารละลายเมทานอลของน้ำมันมะกอก ( 5.6 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร , 37 μ L ) และ 1.3 % ( w / v ) เมทานอลกรด linoleic ( 175 μ L ) ใน H2O ( 88 μ L ) และ 0.2 M ฟอสเฟต บัฟเฟอร์ pH 7.0 , 175 μ L ) ในสกรูฝาขวดเพิ่ม aaph ในบัฟเฟอร์ ( 55.3 มิลลิเมตร 25 μ L ) โซลูชั่นการควบคุมถูกเตรียมโดยการเพิ่มปริมาณบริสุทธิ์ ( 37 μ L ) แทนตัวอย่างขวดถูกบ่มที่อุณหภูมิ 50 ± 0.1 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในที่มืด หลังจากนั้น มีการเทศนา ( 30 μ L ) ของปฏิกิริยาละลายในส่วนผสมที่ 3 : 1 ( v / v ) และปริมาณ h2o โซลูชั่น ( 2.91 มิลลิลิตร ) และ 10 % สารละลายของ nh4scn ( 30 μ L ) และ 20 มิลลิเมตร fecl2 ใน 3.5 % HCL ( 30 μ L ) เพิ่ม หลัง 3 มินของการบ่มที่ RT , ค่าวัดที่ 546 นาโนเมตรต่อ
ว่างตรงกันผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นร้อยละของการยับยั้ง lipid peroxidation :
เปิด mathjax บนๆ ละ 15 หมายถึง สารละลายที่มีปริมาณบริสุทธิ์แทนของกลุ่มตัวอย่าง และจำนวนน้ำมันที่อ้างถึงค่า
โซลูชั่น .
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)