2.5. Protein surface hydrophobicity

2.5. Protein surface hydrophobicity (S0)
Hydrophobicity was determined as described by LiChan,
Nakai, and Wood (1985) with some minor
modifications. Briefly, total soluble proteins extracted
according to Farouk and Swan (1998a) were diluted
to 0.02–0.06% protein using a 0.1 M phosphate buffer
(pH 7.0) containing 0.002% SDS. Anilinonaphthalene
sulfonates (15 mL; ANS, 8.0 mM in 0.1 M phosphate
buffer, pH 7.0) was added to 3 ml protein solutions.
ANS-protein conjugates were excited at 320 nm and
the relative florescence intensity (RFI) was measured
at emission wavelength of 440 nm and a bandwidth
of 10 nm with a Hitachi F-2000 Fluorescence Spectrofluorometer.
The initial slopes of RFI versus %
protein were calculated using TableCurve 2D (Jandel
Scientific Software version 4) linear regression
options.
2.6. Sulphydryl (SH)
Reactive SH were determined as described by Ellman
(1959) with some modification. Briefly, total soluble
proteins extracted according to Farouk and Swan
(1998a) was diluted to a 2% protein solution with a
0.1 M phosphate buffer (pH 8.0). Twenty microlitres
of 5, 50
-dithiobis (2-nitrobenzoic acid) (DTNB, 10
mM in phosphate buffer, pH 7.0) was added to 3 ml
of the solution and then vortexed. The mixture was
held for 1 h at 5 C and the SH content was measured
with a spectrophotometer (GBC, UV/VIS 918)
at 420 nm using a molar extinction coefficient of
13 600 M1
cm1

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 โปรตีนผิว hydrophobicity (S0)กำหนด hydrophobicity ตามที่อธิบายไว้ โดย LiChanมาซาฮิโระ และไม้ (1985) กับบางวิชารองปรับเปลี่ยน สั้น ๆ รวมละลายโปรตีนสกัดตาม Farouk และสวอน (1998a) ถูกทำให้เจือจางไป 0.02-0.06% โปรตีนโดยใช้บัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.1 M(pH 7.0) ที่มี SDS 0.002% Anilinonaphthalenesulfonates (15 mL ANS ฟอสเฟต 0.1 M 8.0 mMบัฟเฟอร์ pH 7.0) ถูกเพิ่มเข้าไป 3 มล.โปรตีนโซลูชั่นANS-โปรตีน conjugates ได้ตื่นเต้นที่ 320 nm และเป็นวัดความเข้มสัมพัทธ์ florescence (RFI)ที่ความยาวคลื่นปล่อยก๊าซของ 440 nm และมีแบนด์วิดท์10 nm พร้อมกับฮิตาชิ F 2000 Fluorescence Spectrofluorometerลาดเริ่มต้นของ RFI กับ%โปรตีนถูกคำนวณโดยใช้ TableCurve 2D (Jandelการถดถอยเชิงเส้นของวิทยาศาสตร์ซอฟต์แวร์รุ่น 4)ตัวเลือก2.6. Sulphydryl (SH)SH ปฏิกิริยาได้ถูกกำหนดโดย Ellman(1959) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง สั้น ๆ รวมละลายโปรตีนสกัดตาม Farouk และสวอน(1998a) ถูกทำให้เจือจางไปโซลูชัน 2% โปรตีนด้วยการ0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 8.0) Microlitres 205, 50-dithiobis (2-nitrobenzoic กรด) (DTNB, 10มม.ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0) ถูกเพิ่มเข้าไป 3 mlโซลูชันและจากนั้น vortexed มีส่วนผสมสำหรับ h 1 ที่ 5 C และเนื้อหาดีมีวัดที่จัดขึ้นกับเป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง (GBC, UV/VIS 918)ที่ 420 nm โดยใช้สัมประสิทธิ์สบดับของ13 600 M1cm1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 พื้นผิวโปรตีนไฮโดร (S0)
hydrophobicity ถูกกำหนดตามที่อธิบาย LiChan,
Nakai และไม้ (1985) กับผู้เยาว์บางส่วน
ปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , โปรตีนสกัดที่ละลายได้ทั้งหมด
ตามที่ฟารุกและหงส์ (1998) ได้รับการปรับลด
การ 0.02-0.06% โดยใช้โปรตีน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(pH 7.0) ที่มี 0.002% SDS Anilinonaphthalene
sulfonates (15 มิลลิลิตร; ANS 8.0 มิลลิใน 0.1 M ฟอสเฟต
บัฟเฟอร์ค่า pH 7.0) ถูกบันทึกอยู่ใน 3 มล. โซลูชั่นโปรตีน.
conjugates ANS โปรตีนมีความตื่นเต้นที่ 320 นาโนเมตรและ
ความเข้มของบานสะพรั่งญาติ (RFI) วัด
ที่ความยาวคลื่นปล่อย 440 นาโนเมตรและแบนด์วิดธ์
จาก 10 นาโนเมตรกับ บริษัท ฮิตาชิ F-2000 เรืองแสง Spectrofluorometer.
ลาดเริ่มต้นของ RFI% เมื่อเทียบกับ
โปรตีนจะถูกคำนวณโดยใช้ TableCurve 2D (Jandel
วิทยาศาสตร์ซอฟแวร์รุ่น 4) การถดถอยเชิงเส้น
ตัวเลือก.
2.6 Sulphydryl (SH)
ปฏิกิริยา SH ได้รับการพิจารณาตามที่อธิบาย Ellman
(1959) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง สั้น ๆ ที่ละลายได้ทั้งหมด
โปรตีนสกัดตามฟารุกและหงส์
(1998) ถูกเจือจางเพื่อแก้ปัญหาโปรตีน 2% กับ
0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 8.0) ยี่สิบ microlitres
5, 50
-dithiobis (กรด 2 nitrobenzoic) (DTNB 10
มิลลิในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.0) ถูกบันทึกอยู่ใน 3 มล.
ของการแก้ปัญหาแล้วการ vortex ส่วนผสมที่ถูก
จัดขึ้นเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 5 C และเนื้อหา SH วัด
กับ spectrophotometer (GBC, UV / VIS 918)
ที่ 420 นาโนเมตรโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกรามของ
13 600 M1
CM1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ไม่ชอบพื้นผิวโปรตีน ( Name )
ไม่ชอบถูกกำหนดตามที่อธิบายไว้โดย lichan
, นากา และไม้ ( 1985 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
บาง สั้น ๆ , รวมโปรตีนที่สกัด
ตามฟารุค และหงส์ ( 1998a ) ลด
ถึง 0.02 – 0.06% โปรตีนใช้ 0.1 M phosphate buffer pH 7.0 )
( 0.002 % SDS . anilinonaphthalene
sulfonates ( 15 มิลลิลิตร ; ans , 8.0 มม. ใน 0.1 M phosphate
บัฟเฟอร์ พีเอช 7.0 ) คือการเพิ่มโซลูชั่น 3 ml . โปรตีน โปรตีนและสารประกอบ
ตื่นเต้นที่ 320 nm และ
เข้มรสเซนสญาติ ( RFI ) วัด
ที่ปล่อยความยาวคลื่น nm และแบนด์วิดธ์
10 nm กับ spectrofluorometer เรืองแสง ฮิตาชิ f-2000 .
%
ความชันเริ่มต้นของ RFI เมื่อเทียบกับโปรตีน คำนวณการใช้ tablecurve 2D ( jandel
ซอฟต์แวร์รุ่นทางวิทยาศาสตร์ 4 ) การถดถอยเชิงเส้นตัว
.
2.6 ซัลฟดริล ( SH )
3 อาจเป็นตามที่อธิบายไว้โดยเอลเมิ่น
( 1959 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , โปรตีนละลาย
รวมสกัดตามฟารุค และหงส์
( 1998a ) คือประมาณ 2% สารละลายโปรตีนที่มี
0.1 M phosphate buffer pH 8.0 ) ยี่สิบ microlitres
5 , 50
- dithiobis ( 2-nitrobenzoic acid ) ( dtnb 10
อืมในฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) คือเพิ่ม 3 ml
ของสารละลายแล้ว vortexed . ส่วนผสมจะถูกจัดขึ้นสำหรับ 1 H
5 C และ sh เนื้อหาวัด
กับ Spectrophotometer ( GBC , UV / VIS 918 )
ที่ 420 นาโนเมตรโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์โมล
13 600 M1
CM1