An Agilent Capillary Electrophoresi

An Agilent Capillary Electrophoresis (3D-CE system) with a
built-in Diode-Array Detector (DAD; Agilent Technologies Inc.,
Waldbronn, Germany) was used. Agilent CE ChemStation was used
for the instrument control, data acquisition, and data analysis. The
CE capillary column was 75 cm total length (LT) of bare fusedsilica
column (66.5 cm of effective length to detector, Ld) with
50 m inner diameter (i.d.; Polymicro Tech. LLC, Phoenix, AZ, USA).
The new capillary was conditioned by flushing the column with
1 mol L−1 of sodium hydroxide solution for 10 min, DI water for
10 min and the running buffer (background electrolyte, BGE) for
10 min, in that order. The column cassette temperature was set
at 20 ◦C. The DAD wavelength was set at 260 nm for d-AMP, and
195 nm for As(III), Se(IV) and BrO3
−, respectively.
For comparative studies between PAEKI and hydrodynamic
injections, experimental conditions were as follows. For hydrodynamic
injection, 500 g mL−1 of d-AMP was injected for 5 s with
+50 mbar of hydrodynamic pressure resulting in a sample zone
volume of 0.57 nL (0.29 ng d-AMP). After the injection, +30 kV was
applied across the capillary for 0.5, 4.0, or 7.5 min to migrate of the
injected sample zone to a position in the column of 5, 50, or 95% of
the Ld (vd-AMP = 8.42 cm min−1). The voltage was then removed and
the sample plug was allowed to diffuse in 0 V cm−1 electric field
for a certain stagnant time. In PAEKI injection, a sample containing
500 ng mL−1 of d-AMP was injected by application of simultaneous
positive pressure of 50 mbar and negative voltage of 6 kV to the
inlet end of capillary for 3 min, unless otherwise noted. Similarly
to hydrodynamic injection, the injected sample plug was migrated
to 5, 50 or 95% of the Ld and FWHM was calculated as a function of
stagnant time. By peak area and peak height, the injected amount
of d-AMP in PAEKI was similar to the amount injected by hydrodynamic
injection. All separations were then conducted at +30 kV. The
peak area, peak height and FWHM were integrated and calculated
with the Agilent ChemStation software, respectively.
For studies determining the influence of analyte type, PAEKI
injections were performed under pressure and voltage conditions
above, however the sample solution was a mixture of d-AMP,
AsO4
3−, SeO3
2− and BrO3
−. Sample concentrations and PAEKI duration,
given in Table 1, were adjusted to ensure the final amount
of analyte injected was constant. Separations were conducted at
+30 kV immediately following PAEKI injection.
2.4. PAEKI-CE-ESI-MS/MS analysis of drinking water
Tap water samples from two office buildings and two residential
houses were collected following the EPA method [39]. Briefly, 40-
mL water was collected in clean amber glass bottles and stored at
4 ◦C before use. For each sampling site, a 40-mL sampling vial filled
with DI water was used with the transportation and the sampling
process as the field bank. Since drinking water samples presumably
have a simple matrix, they were suitable for use by PAEKI
without the need for any further pre-treatment. The samples were
analyzed by the addition method. Addition was accomplished by
spiking 1 mL samples with 10 L of DI water for the controls and 5
or 50 mg L−1 of spiking solution prepared in DI water. Spiking solutions
contained a mixture of the five analyte standards under study.
The final analyte concentration levels after addition were 50 and
500 ng mL−1. Calibration curves were constructed for As(III), As(V),
Se(IV), Se(VI) and BrO3
− from 5 to 5000 ng mL−1, using 500 ng mL−1
d-AMP as the internal standard. Calibration standards were analyzed
using PAEKI-CE-MS/MS via peak area. The calibration curves
were subsequently obtained by plotting the ratios of peak areas
of target analytes and the internal standard against the ratios of
the corresponding concentrations. The five regression lines had R2
coefficients all over 0.99.
All samples were analyzed by PAEKI-CE-MS/MS on an Agilent
3D-CE instrument linked to a 4000 QTRAP mass spectrometer
(Applied Biosystems, Canada). The Agilent CE instrument controlled
by the ChemStation software was used to inject samples
via PAEKI and separate analytes injected. The 4000 QTRAP was
controlled by the Analyst software and was used for monitoring
the analytes with multiple reaction monitoring (MRM) in negative
ion mode. The flow rates were 20 L min−1 of nitrogen for the curtain
gas (CUR), 2 L min−1 of nitrogen for the collision gas (CAD) and
5 L min−1 of zero air for the ion source gas. The ion spray voltage
(IS), the entrance potential, and the collision exit potential were
set to −5300, −10 and −5 V, respectively. Other MS parameters are
outlined in Table 2. The sheath liquid was prepared by adding 10%
(v/v) DI water to a solution of isopropanol and methanol, 2:1 (v/v),
for a final volume concentration of 60% isopropanol, 30% methanol
and 10% water. The sheath liquid flow rate was set to 3 L min−1. A
new capillary (LT = 110 cm; i.d. = 50 m) was

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Agilent ฝอย Electrophoresis (ระบบ 3D-ซีอี) ที่มี
ในตัวไดโอดอาร์เรย์ตรวจจับ (DAD; Agilent Technologies, Inc,
Waldbronn, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ Agilent CE ChemStation ถูกนำมาใช้
สำหรับการควบคุมเครื่องมือเก็บข้อมูลและการวิเคราะห์ข้อมูล
คอลัมน์ CE เส้นเลือดฝอย 75 ซม. ความยาวรวม (LT) ของ fusedsilica เปลือย
คอลัมน์ (66.5 ซม. ความยาวมีประสิทธิภาพในการตรวจจับ Ld) กับ
50 เมตรเส้นผ่าศูนย์กลางภายใน (ID. โพลีไมโครเทค LLC, ฟินิกซ์, AZ, USA).
เส้นเลือดฝอยใหม่ ได้รับการปรับอากาศโดยการล้างคอลัมน์ที่มี
L-1 สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซ 1 โมลเป็นเวลา 10 นาทีน้ำ DI สำหรับ
10 นาทีและบัฟเฟอร์ทำงาน (อิเล็กโทรไลพื้นหลัง BGE) สำหรับ
10 นาทีในลำดับที่ อุณหภูมิเทปคอลัมน์ถูกกำหนด
ที่ 20 ◦C ความยาวคลื่นพ่อถูกตั้งไว้ที่ 260 นาโนเมตรสำหรับ D-AMP และ
195 นาโนเมตรสำหรับ As (III), Se (IV) และ BrO3
-. ตามลำดับ
สำหรับการศึกษาเปรียบเทียบระหว่าง PAEKI และอุทกพลศาสตร์
ฉีดเงื่อนไขการทดลองสรุปได้ดังนี้ สำหรับอุทกพลศาสตร์
ฉีด 500 กรัม ML-1 ของ D-AMP ถูกฉีด 5 S กับ
50 เอ็มบาร์ของความดันอุทกพลศาสตร์ส่งผลให้ในโซนตัวอย่าง
ปริมาณ 0.57 nL (0.29 NG D-AMP) หลังจากฉีด 30 กิโลโวลต์ถูก
นำไปใช้ทั่วฝอย 0.5, 4.0 หรือ 7.5 นาทีในการโยกย้ายของ
โซนตัวอย่างฉีดไปยังตำแหน่งในคอลัมน์ 5, 50, หรือ 95% ของ
เหอะ (VD-AMP = 8.42 ซม. นาที 1) แรงดันไฟฟ้าจะถูกลบออกแล้ว
เสียบตัวอย่างได้รับอนุญาตให้กระจายใน 0 ซม. V-1 สนามไฟฟ้า
เป็นเวลานิ่งบางอย่าง ในการฉีด PAEKI ตัวอย่างที่มี
500 NG ML-1 ของ D-AMP ถูกฉีดโดยการประยุกต์ใช้พร้อมกัน
ดันเป็นบวก 50 เอ็มบาร์และแรงดันไฟฟ้าเชิงลบของ 6 กิโลโวลต์ไปที่
ปลายขาเข้าของเส้นเลือดฝอยเป็นเวลา 3 นาทีเว้นแต่จะระบุไว้เป็นอย่างอื่น ในทำนองเดียวกัน
การฉีดอุทกพลศาสตร์ตัวอย่างปลั๊กฉีดถูกอพยพ
5, 50 หรือ 95% ของ Ld และ FWHM ที่คำนวณได้เป็นหน้าที่ของ
เวลาที่หยุดนิ่ง ตามพื้นที่จุดสูงสุดและความสูงของยอดจำนวนเงินที่ฉีด
ของ D-AMP ใน PAEKI ก็คล้ายคลึงกับจำนวนเงินที่ฉีดโดยอุทกพลศาสตร์
ฉีด แยกทั้งหมดได้ดำเนินการแล้ว 30 กิโลโวลต์
บริเวณยอดเขาสูงสูงสุดและ FWHM ถูกรวมและนำมาคำนวณ
กับซอฟต์แวร์ Agilent ChemStation ตามลำดับ.
สำหรับการศึกษาอิทธิพลของการกำหนดประเภทวิเคราะห์ที่ PAEKI
ฉีดได้ดำเนินการภายใต้ความกดดันและแรงดันไฟฟ้าเงื่อนไข
ดังกล่าวข้างต้น แต่การแก้ปัญหาตัวอย่างเป็นส่วนผสมของ D- แอมป์
AsO4
3- SeO3
2 และ BrO3
- ความเข้มข้นและระยะเวลาตัวอย่าง PAEKI,
ที่กำหนดในตารางที่ 1 มีการปรับเพื่อให้แน่ใจว่าจำนวนเงินสุดท้าย
ของการวิเคราะห์ฉีดคงที่ แยกได้ดำเนินการใน
30 กิโลโวลต์ทันทีหลังจากฉีด PAEKI.
2.4 วิเคราะห์ PAEKI-CE-ESI-MS / MS ของการดื่มน้ำ
ตัวอย่างน้ำประปาจากสองอาคารสำนักงานและที่อยู่อาศัยสอง
บ้านถูกเก็บตามวิธีการของ EPA [39] สั้น ๆ , 40-
น้ำมิลลิลิตรเก็บในขวดแก้วสีเหลืองอำพันที่สะอาดและเก็บไว้ที่
4 ◦Cก่อนการใช้งาน สำหรับเว็บไซต์สุ่มตัวอย่างแต่ละขวดสุ่มตัวอย่าง 40 มลเต็มไป
ด้วยน้ำ DI ถูกนำมาใช้กับการขนส่งและการสุ่มตัวอย่าง
กระบวนการเป็นธนาคารสนาม เนื่องจากดื่มน้ำตัวอย่างสมมุติ
มีเมทริกซ์ง่ายที่พวกเขามีความเหมาะสมสำหรับการใช้งานโดย PAEKI
โดยไม่จำเป็นต้องเพิ่มเติมใด ๆ ก่อนการรักษา ตัวอย่างถูก
วิเคราะห์โดยวิธีนอกจากนี้ นอกจากนี้ก็ประสบความสำเร็จโดย
องศา 1 ตัวอย่างมิลลิลิตร 10 ลิตรน้ำ DI สำหรับการควบคุมและ 5
หรือ 50 มิลลิกรัม L-1 ขององศาการแก้ปัญหาเตรียมในน้ำ DI โซลูชั่นองศา
ที่มีส่วนผสมของมาตรฐานการวิเคราะห์ห้าภายใต้การศึกษา.
สุดท้ายระดับความเข้มข้นวิเคราะห์หลังนอกจากนี้จำนวน 50 คนและ
500 นาโนกรัม ML-1 เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกสร้างขึ้นสำหรับ As (III) ในฐานะที่เป็น (V),
Se (IV), Se (vi) และ BrO3
- 5-5000 NG ML-1 โดยใช้ 500 NG ML-1
D-AMP เป็นมาตรฐานภายใน มาตรฐานการสอบเทียบที่ได้มาวิเคราะห์
โดยใช้ PAEKI-CE-MS / MS ผ่านพื้นที่สูงสุด เส้นโค้งการสอบเทียบ
ที่ได้รับภายหลังจากพล็อตของอัตราส่วนพื้นที่จุดสูงสุด
ของการวิเคราะห์เป้าหมายและมาตรฐานภายในกับอัตราส่วนของ
ความเข้มข้นที่สอดคล้องกัน ห้าเส้นถดถอยมี R2
สัมประสิทธิ์ทั่ว 0.99.
ทุกตัวอย่างมาวิเคราะห์โดย PAEKI-CE-MS / MS บน Agilent
ตราสาร 3D-CE ที่เชื่อมโยงกับสเปกโตรมิเตอร์มวล 4000 QTRAP
(Applied Biosystems แคนาดา) ตราสาร Agilent CE ควบคุม
โดยซอฟต์แวร์ ChemStation ที่ใช้ในการฉีดตัวอย่าง
ผ่าน PAEKI และวิเคราะห์แยกต่างหากฉีด 4000 QTRAP ถูก
ควบคุมโดยซอฟต์แวร์นักวิเคราะห์และถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบ
วิเคราะห์ที่มีการตรวจสอบปฏิกิริยาหลาย ๆ (MRM) ในเชิงลบ
โหมดไอออน อัตราการไหล 20 ลิตรนาที 1 ไนโตรเจนสำหรับผ้าม่าน
ก๊าซ (CUR) 2 ลิตรนาที 1 ไนโตรเจนก๊าซชน (CAD) และ
5 ลิตรนาที 1 ศูนย์อากาศสำหรับก๊าซแหล่งกำเนิดไอออน แรงดันสเปรย์ไอออน
(IS) ที่มีศักยภาพทางเข้าและมีศักยภาพในการปะทะกันทางออกที่ถูก
ตั้งค่าให้ -5300, -10 และ -5 V ตามลำดับ พารามิเตอร์ MS อื่น ๆ ที่
ระบุไว้ในตารางที่ 2 ของเหลวฝักถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 10%
(v / v) น้ำ DI ที่จะแก้ปัญหาของ isopropanol และเมทานอล 2: 1 (v / v),
สำหรับความเข้มข้นเล่มสุดท้ายของ 60% isopropanol เมทานอล 30%
และ 10% น้ำ อัตราการไหลของของเหลวฝักถูกกำหนดให้ 3 นาที L-1
เส้นเลือดฝอยใหม่ (น้อยกว่าหรือเท่ากับ 110 ซม id = 50 เมตร) เป็น