Fluorescent DNA sequencing can also

Fluorescent DNA sequencing can also be performed using a chemistry in which the dyes are attached to the ddNTPs, thereby requiring only one reaction tube per sample, instead of four. Since only one reaction tube is required for the dye terminator reaction, this chemistry is simpler to use than dye primer chemistry. DNA template, unlabeled primer, buffer, the four dNTPs, the four fluorescently labeled ddNTPs, and AmpliTaq® DNA Polymerase are added to the reaction tube. Fluorescent fragments are generated by incorporation of dye-labeled ddNTPs. Each different ddNTP (ddATP, ddCTP, ddGTP, or ddTTP) will carry a different color of dye. All terminated fragments (those ending with a ddNTP), therefore, contain a dye at their 3’ end (Figure 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นอกจากนี้ยังสามารถทำลำดับดีเอ็นเอเรืองแสงใช้เคมีที่ย้อมติดแนบอยู่กับ ddNTPs ดังนั้นจึงต้องใช้หลอดเดียวปฏิกิริยาต่อตัวอย่าง แทนสี่ เนื่องจากหลอดเดียวปฏิกิริยาสำหรับปฏิกิริยาย้อมเทอร์มิเนเตอร์ เคมีนี้จะง่ายกว่าการใช้กว่าย้อมพื้นเคมี ดีเอ็นเอต้นแบบ สีรองพื้นไม่ บัฟเฟอร์ dNTPs สี่ สี่ป้าย fluorescently ddNTPs และ AmpliTaq ®ดีเอ็นเอพอลิเมอเรสจะถูกเพิ่มลงในหลอดปฏิกิริยา บางส่วนของฟลูออเรสสร้างขึ้น โดยการประสานของสีย้อมป้าย ddNTPs แต่ละ ddNTP แตกต่างกัน (ddATP, ddCTP, ddGTP หรือ ddTTP) จะมีสีแตกต่างกันของสีย้อม ทั้งหมดตัดชิ้นส่วน (ที่ลงท้าย ด้วย ddNTP ความ), ดังนั้น ประกอบด้วยสีท้ายของ 3' (3 รูป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลำดับดีเอ็นเอเรืองแสงนอกจากนี้ยังสามารถดำเนินการโดยใช้เคมีที่อยู่ในสีย้อมที่แนบมากับ ddNTPs จึงต้องใช้เพียงหนึ่งหลอดปฏิกิริยาต่อตัวอย่างแทนที่จะเป็นสี่ ตั้งแต่เพียงหนึ่งหลอดปฏิกิริยาเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับปฏิกิริยาเทอร์มิย้อมสีเคมีนี้จะง่ายกว่าที่จะใช้ย้อมเคมีรองพื้น แม่แบบดีเอ็นเอไพรเมอร์ที่ไม่มีป้ายกำกับบัฟเฟอร์สี่ dNTPs สี่ ddNTPs ติดป้าย fluorescently และดีเอ็นเอAmpliTaq®โพลิเมอร์มีการเพิ่มท่อปฏิกิริยา เศษเรืองแสงจะถูกสร้างโดย บริษัท ของ ddNTPs สีย้อมที่มีสัญลักษณ์ แต่ละ ddNTP แตกต่างกัน (ddATP, ddCTP, ddGTP หรือ ddTTP) จะดำเนินการสีที่แตกต่างของสีย้อม เศษยกเลิกทั้งหมด (ที่ลงท้ายด้วย ddNTP) จึงมีสีย้อมที่ 3 ของพวกเขา 'ปลาย (รูปที่ 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การจัดลำดับดีเอ็นเอเรืองแสงยังสามารถดำเนินการโดยใช้เคมีที่ติดแนบกับ ddntps งบเพียงหนึ่งหลอดปฏิกิริยาต่อตัวแทนของ 4 ตั้งแต่เพียงหนึ่งหลอดที่ใช้เป็นสีย้อมปฏิกิริยา ปฏิกิริยาเคมีนี้ Terminator , ง่ายที่จะใช้กว่าสีรองพื้นเคมี แม่แบบ unlabeled ไพรเมอร์ บัฟเฟอร์ dntps ดีเอ็นเอ , สี่ ,4 fluorescently ป้าย ddntps และ amplitaq ® DNA polymerase จะเพิ่มปฏิกิริยาหลอด เศษที่ถูกสร้างขึ้นโดยการเรืองแสงสีป้าย ddntps . ที่แตกต่างกันในแต่ละ ddntp ( ddatp ddctp ddgtp , , , หรือ ddttp ) จะมีสีที่แตกต่างกันของสีย้อม ยกเลิกทั้งหมดเศษ ( ที่ลงท้ายด้วย ddntp ) จึงมีการย้อมที่ 3 จบ ( รูปที่ 3 )