In order to easily identify the ori

In order to easily identify the origin of calli in this phase of the experiment, only calli produced in induction medium supplemented with 0.5 mg/l 2,4-D and 1.0 mg/l BAP (I1) were used for differentiation. Calli were subcultured 2–3 times for one month each round on the same medium used for callus multiplication, until calli numbers were sufficient for the regeneration experiment. The calli were divided into small pieces (2 cm × 2 cm), then one piece was transferred to each flask of differentiation media mentioned. Flasks were incubated under a 12 h photoperiod at 30–40 μmol/m2/s provided by fluorescent 20 W daylight lamps at 25 ± 1 °C for 30 d. A completely randomized design was used, with ten total replicates, each of six flasks, for each type of differentiation medium.

2.5. Plantlet rooting and transplanting

Healthy shoots differentiated from green calli with 3–4 true leaves were excised from the culture and transferred to one of four types of rooting media. All rooting media consisted of MS salts, 30 g/l sucrose, 6.5 g/l agar, and pH adjusted to 5.9–6.0. Each type (labeled as R1–R4 in Table 3) was supplemented with four levels of IBA (0, 0.05, 0.1, 0.2 mg/l) and subjected to autoclaving as previously described. The rooting experiment was again devised as complete randomized design, with 50 replicates of one regenerated plantlet per replicate at each level of IBA.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อที่จะสามารถระบุที่มาของแคลลัสในช่วงนี้จากการทดลองเพียงแคลลัสที่ผลิตในกลางเสริมด้วยการเหนี่ยวนำ 0.5 mg / l 2,4-D และ 1.0 mg / l BAP (I1) ถูกนำมาใช้สำหรับความแตกต่าง แคลลัสได้รับการเลี้ยง 2-3 ครั้งสำหรับหนึ่งเดือนในแต่ละรอบในสื่อเดียวกับที่ใช้สำหรับการคูณแคลลัสจนตัวเลขแคลลัสมีเพียงพอสำหรับการทดสอบการฟื้นฟู แคลลัสที่ถูกแบ่งออกเป็นชิ้นเล็ก ๆ (2 ซม. × 2 ​​ซม.) จากนั้นหนึ่งชิ้นถูกย้ายไปในแต่ละขวดของสื่อกล่าวถึงความแตกต่าง ขวดถูกบ่มภายใต้แสง 12 ชั่วโมงที่ 30-40 ไมโครโมล / m2 / s ให้โดยนีออน 20 วัตต์โคมไฟในเวลากลางวันที่ 25 ± 1 ° C เป็นเวลา 30 วัน การออกแบบที่สมบูรณ์แบบสุ่มถูกนำมาใช้กับสิบซ้ำรวมแต่ละหกขวดสำหรับแต่ละชนิดของสื่อที่แตกต่างกัน. 2.5 ต้นรากและปลูกถ่ายเพื่อสุขภาพที่แตกต่างจากแคลลัสสีเขียวที่มีใบจริง 3-4 ถูกตัดจากการเพาะเลี้ยงและการถ่ายโอนไปยังหนึ่งในสี่ประเภทของสื่อการขจัด สื่อการขจัดประกอบด้วย MS เกลือ 30 กรัม / ลิตรน้ำตาลซูโครส 6.5 กรัม / ลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อและปรับ pH 5.9-6.0 ไป แต่ละประเภท (ระบุว่าเป็น R1-R4 ในตารางที่ 3) ได้รับการเสริมด้วยสี่ระดับของไอบีเอ (0, 0.05, 0.1, 0.2 mg / l) และอยู่ภายใต้การนึ่งฆ่าเชื้อตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ การทดลองรากเป็นวิธีการอีกครั้งเป็นแบบสุ่มสมบูรณ์กับ 50 ซ้ำหนึ่งต้นต่อสร้างใหม่ทำซ้ำในระดับของแต่ละ IBA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อให้สามารถระบุแหล่งที่มาของแคลลัสในขั้นตอนของการทดลอง เปอร์เซ็นต์เท่านั้นที่ผลิตในกลางการเสริมด้วย 2 , 4-D 0.5 มก. / ล. และ 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร BAP ( i0 ) ใช้สำหรับการ . แคลลัส subcultured 2 – 3 ครั้งในหนึ่งเดือนแต่ละรอบกันกลางใช้สําหรับสูตรคูณ จนกว่าตัวเลขแคลลัสที่เพียงพอสำหรับการทดลองระดับแบ่งออกเป็นชิ้นเล็ก ๆ 2 cm × 2 ซม. ) แล้วหนึ่งชิ้นถูกย้ายไปยังแต่ละขวดของความแตกต่างของสื่อที่กล่าวถึง ขวดถูกบ่มในช่วง 12 ชั่วโมง 30 – 40 μโมล / ตารางเมตร / s โดยหลอด 20 w แสงโคมไฟที่ 25 ± 1 ° C 30 D . CRD ใช้กับสิบแบบรวมแต่ละหกขวด ,สำหรับแต่ละชนิดของความแตกต่างของสื่อ

2.5 การปลูกรากและหน่อ

สุขภาพแตกต่างจากแคลลัสสีเขียว 3 – 4 จริง ใบที่ถูกตัดจากวัฒนธรรมและโอนไปยังหนึ่งใน 4 ชนิดของรากสื่อ รากสื่อทั้งหมด ประกอบด้วย นางสาวเกลือ 30 กรัม / ลิตร ปริมาณ 6.5 กรัม / ลิตร วุ้น และปรับ pH 5.9 และ 6.0 .แต่ละประเภท ( ป้ายเป็น R1 r4 ในโต๊ะ ( 3 ) เสริมด้วยสี่ระดับของ IBA ( 0 , 0.05 , 0.1 , 0.2 มิลลิกรัม / ลิตร ) และภายใต้อัตราส่วนโฟกัสตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ รากทดลองอีกครั้งการวางแผนการออกแบบที่สมบูรณ์ มี 50 ซ้ำหนึ่งที่ได้ปลูกต่อทำซ้ำที่ระดับและอื่น ๆแต่ละ