1. Semiquantitative RT-PCR analysis

1. Semiquantitative RT-PCR analysis: We extracted total RNA from cells with TRIZOL reagent (Invitrogen), according to the manufacturer’s instructions. RT-PCR experiments were carried out with cDNAs generated from 2 µg of total RNA using a GeneAmp RNA PCR kit (Applied Biosystems, Foster City, CA). The RT-PCR exponential phase was determined on 22-30 cycles to allow semiquantitative comparisons of cDNAs developed from identical reactions with TaKaRa ExTaq polymerase (TaKaRa Bioscience, Kyoto, Japan). The primers and PCR conditions are shown in supplementary Tables 1 and 2, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. semiquantitative RT-PCR วิเคราะห์: เราสกัดอาร์เอ็นเอทั้งหมดจากเซลล์กับ TRIZOL รีเอเจนต์ (Invitrogen), ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ทดลอง RT-PCR ได้ดำเนิน ด้วย cDNAs ที่สร้างขึ้นจากไมโครกรัมเป็นเครื่องที่ 2 ของอาร์เอ็นเอทั้งหมดที่ใช้ชุด GeneAmp PCR อาร์เอ็นเอ (Biosystems ใช้ ฟอสเตอร์ซิตี้ CA) RT-PCR เนนระยะกำหนดในรอบ 22-30 ให้เปรียบเทียบ semiquantitative cDNAs พัฒนาจากปฏิกิริยาเหมือนกับ TaKaRa ExTaq พอลิเมอเรส (ซื้อ TaKaRa เกียวโต ญี่ปุ่น) ไพรเมอร์และ PCR เงื่อนไขจะแสดงในตาราง 1 และ 2 เสริมตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. การวิเคราะห์เชิงกึ่งปริมาณ RT-PCR: เราสกัด RNA รวมจากเซลล์ที่มีสาร Trizol (Invitrogen) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต การทดลอง RT-PCR ได้ดำเนินการกับ cDNAs สร้างขึ้นจาก 2 ไมโครกรัมของอาร์เอ็นเอรวมใช้ GeneAmp RNA PCR ชุด (Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย) ขั้นตอน RT-PCR ชี้แจงถูกกำหนดในรอบ 22-30 เพื่อให้การเปรียบเทียบเชิงกึ่งปริมาณของ cDNAs พัฒนามาจากปฏิกิริยาเหมือนกันกับโพลิเมอร์ Takara ExTaq (Takara ชีววิทยาศาสตร์เกียวโตญี่ปุ่น) ไพรเมอร์และเงื่อนไข PCR จะแสดงในตารางที่เสริมที่ 1 และ 2 ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . การวิเคราะห์วิธีบริโภค : เราสกัดอาร์เอ็นเอรวมจากเซลล์ที่มี trizol Reagent ( Invitrogen ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต 4 . การทดลองกับ cdnas ที่เกิดจาก 2 µกรัมของอาร์เอ็นเอทั้งหมดใช้ geneamp RNA PCR Kit ( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย )RT-PCR ชี้แจงระยะคือ มุ่งมั่นในงาน 2 รอบ เพื่อให้บริโภคเปรียบเทียบ cdnas พัฒนาจากปฏิกิริยาที่เหมือนกันกับทาคาระ extaq Polymerase ( Takara วิทยาศาสตร์ชีวภาพ , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ไพรเมอร์และสภาวะ PCR จะแสดงในแบบตารางที่ 1 และ 2 ตามลำดับ