A 15-h stationary phase culture of

A 15-h stationary phase culture of E. coli O157:H7 strain
3704 was serially diluted in sterile, quarter-strength
Ringer's solution (Fisher Scienti®c UK Ltd). Dilutions
were plated on Luria Bertani (LB) agar and incubated at
37°C for 18 h and cell numbers calculated from the mean
number of colony forming units (cfu) obtained from
triplicate plates at the appropriate dilution. Soil (10 g
fresh weight) or water (10 ml) was then inoculated with
0á8 ml aliquots of this dilution series. To ensure even
distribution of added cells, soil and inocula were thoroughly
mixed using a sterile spatula and water samples
mixed by gentle, end over end inversion. After mixing,
1 g soil (fresh weight) or 1 ml of water was added to
sterile 50-ml plastic incubation tubes (Greiner Labortechnik
Ltd, Stonehouse, UK) containing 20 ml of Tryptone
Soya Broth (TSB) (Oxoid Ltd, Basingstoke, UK). Inoculated
tubes were incubated at 37°C with continuous
shaking (200 rev min±1) in an orbital shaker (Stuart
Scienti®c, Redhill, UK) for 15 h. Following incubation,
2 ml of primary enrichment was added to 20 ml of TSB
and incubated for 6 h under the conditions described.
Secondary enrichment cultures were then centrifuged at
10 000 g for 15 min. After centrifugation, supernatants
were discarded and cell pellets were frozen at ±20°C prior
to molecular analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรม 15 h กับระยะของ E. coli O157:H7 ต้องใช้3704 ถูก serially diluted พรึบกอซ ไตรมาส-โซลูชันของ ringer (Fisher Scienti ® c ราช อาณาจักร) Dilutionsชุบใน agar Luria Bertani (ปอนด์) และ incubated ที่37° C 18 h และเซลล์หมายเลขคำนวณจากค่าเฉลี่ยจำนวนหน่วย (cfu) ได้รับจากการเป็นอาณานิคมแผ่น triplicate ที่เจือจางที่เหมาะสม ดิน (10 gน้ำหนักสด) หรือน้ำ (10 มล.) แล้วมี inoculated ด้วยaliquots มล 0á8 ชุดนี้เจือจาง เพื่อให้มั่นใจได้การกระจายของเซลล์เพิ่ม ดิน และ inocula ได้อย่างละเอียดผสมโดยใช้ตัวอย่างน้ำและพายกอซผสมตามใจ สิ้นสุดเหนือกลับสิ้นสุด หลังจากการผสมดิน 1 กรัม (น้ำหนักสด) หรือ 1 ml ของน้ำถูกเพิ่มฟักตัวพลาสติก 50 มล.ใส่หลอด (Greiner Labortechnikจำกัด สโตนเฮาส์การ์เดนส์ สหราชอาณาจักร) ประกอบด้วย 20 ml ของ Tryptoneซุปถั่วเหลือง (TSB) (Oxoid Ltd, Basingstoke สหราชอาณาจักร) Inoculatedมี incubated หลอดที่ 37° C มีอย่างต่อเนื่องสั่น (200 เรฟ min±1) ในการเชคเกอร์ของวงโคจร (สจ๊วตC Scienti ® Redhill สหราชอาณาจักร) สำหรับ 15 h ต่อไปนี้คณะทันตแพทยศาสตร์2 ml ของบ่อหลักถูกเพิ่มปริมาณ 20 ml ของ TSBและ incubated สำหรับ h 6 ภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายไว้วัฒนธรรมที่โดดเด่นรองถูก centrifuged แล้วที่10 000 g สำหรับ 15 นาที หลังจาก centrifugation, supernatantsถูกละทิ้ง และเซลล์ขี้ถูกแช่แข็งที่ ±20 ° C ก่อนการวิเคราะห์ระดับโมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมเฟส 15 ชั่วโมงนิ่งของเชื้อ E. coli O157: H7 สายพันธุ์
3704
ถูกเจือจางลำดับในการฆ่าเชื้อไตรมาสแรงแก้ปัญหาของริงเกอร์(ฟิชเชอร์Scienti®c UK Ltd) เจือจางถูกชุบใน Luria Bertani (LB) วุ้นและบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมงและจำนวนเซลล์คำนวณจากค่าเฉลี่ยจำนวนการสร้างอาณานิคมหน่วย(cfu) ที่ได้รับจากแผ่นเพิ่มขึ้นสามเท่าในการลดสัดส่วนที่เหมาะสม ดิน (10 กรัมน้ำหนักสด) หรือน้ำ (10 มล.) ได้รับเชื้อแล้วกับaliquots มล0á8ของซีรีส์นี้เจือจาง เพื่อให้แน่ใจว่าแม้แต่การกระจายของเซลล์เพิ่มดินและ inocula อย่างละเอียดถูกผสมโดยใช้ไม้พายผ่านการฆ่าเชื้อและตัวอย่างน้ำผสมโดยอ่อนโยนปลายมากกว่าผกผันท้าย หลังจากผสม1 กรัมดิน (น้ำหนักสด) หรือ 1 มิลลิลิตรของน้ำถูกบันทึกอยู่ในการฆ่าเชื้อ50 มิลลิลิตรหลอดบ่มพลาสติก (Greiner Labortechnik จำกัด Stonehouse สหราชอาณาจักร) ที่มี 20 มล Tryptone ถั่วเหลืองน้ำซุป (TSB) (Oxoid จำกัด เบซิง สหราชอาณาจักร) เชื้อหลอดถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสที่มีอย่างต่อเนื่องเขย่า(200 รอบต่อนาที± 1) ในเครื่องปั่นโคจร (Stuart Scienti®c, ฮิลล์สหราชอาณาจักร) 15 ชั่วโมง ต่อไปนี้การบ่ม2 มิลลิลิตรของการเพิ่มปริมาณหลักถูกบันทึกอยู่ใน 20 มิลลิลิตร TSB และบ่มเป็นเวลา 6 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขที่อธิบาย. วัฒนธรรมการตกแต่งรองถูกปั่นแล้วที่10 000 กรัมเป็นเวลา 15 นาที หลังจากที่หมุนเหวี่ยง supernatants ถูกโยนทิ้งและเม็ดเซลล์ถูกแช่แข็งที่± 20 ° C ก่อนการวิเคราะห์โมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็น 15-h นิ่งระยะวัฒนธรรมของ E . coli เป็นสมาชิก : H7 สายพันธุ์
3767 กำลังเป็นเจือจางในหมันไตรมาสแรง
เสียงโซลูชั่น ( Fisher scienti ® C UK Ltd ) เจือจาง
ถูกชุบบนลุเรียแบร์ตานิ ( LB ) วุ้น และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศา C
18 H และเซลล์ตัวเลขที่คำนวณจากค่าเฉลี่ย
จำนวนสร้างหน่วยอาณานิคม ( CFU ) ที่ได้จาก
แผ่นทำสำเนาสามฉบับในการเจือจางที่เหมาะสม ดิน ( 10
กรัมน้ำหนักสด ) หรือน้ำ ( 10 ml ) แล้วใส่
0 . kgm 8 ml เฉยๆของ 2 ชุดนี้ เพื่อให้แน่ใจว่าการกระจาย
เซลล์เพิ่ม ดิน และ inocula กราวรูด
ผสม ใช้ไม้พายคนเป็นหมันและน้ำตัวอย่าง
ผสมอ่อนโยนกว่าการสิ้นสุดจบ หลังจากผสมดิน
1 กรัม ( น้ำหนักสด ) หรือ 1 มิลลิลิตรของน้ำเพิ่ม

50 มล. บ่มหลอดพลาสติกปราศจากเชื้อ ( ไกรเนอร์ labortechnik
จำกัดสโตนเฮาส์ , UK ) บรรจุ 20 ml ของทริพโทน
ซุปถั่วเหลือง ( TSB ) ( oxoid Ltd Basingstoke , สหราชอาณาจักร )
หลอดเป็นเชื้อบ่มที่ 37 ° C อย่างต่อเนื่อง
สั่น ( 200 ) มิน± 1 ) ในเครื่องปั่นโคจร ( Stuart
scienti ® C , Redhill , สหราชอาณาจักร ) 15 ชั่วโมง ตามระยะเวลา
2 มิลลิลิตร การเสริมเพิ่ม 20 ml ของ TSB
บ่มเป็นเวลา 6 ชั่วโมง ภายใต้เงื่อนไขที่อธิบายไว้ .
วัฒนธรรมการมัธยมศึกษาเป็นระดับที่
10 000 กรัมเป็นเวลา 15 นาที หลังการปั่นเหวี่ยง supernatants
, ถูกละทิ้งและเซลล์เม็ดถูกแช่แข็งที่± 20 ° C ก่อน
การวิเคราะห์โมเลกุล