2. Materials and methods2.1. Sample

2. Materials and methods
2.1. Sample set

The sample collection consisted of 64 samples of cold-pressed lemon oil obtained by industrial extraction from 3 different geographic origins: Italy (n=46), Argentina (n=13) and Spain (n=5). Italian lemon fruits were harvested from November 2010 to May 2011, while Argentinian lemon fruits were harvested in May and June 2011. Spanish fruits were harvested from November 2010 to May 2011. The samples were obtained from industrial suppliers and were a mix of several cultivars. Because samples were obtained from industrial suppliers who bought lemon fruits from different farmers, it was impossible to obtain monovarietal CPLOs. Argentinian samples were obtained from Eureka, Lisbon, and Genova cultivars, Spanish samples were obtained from Fino and Verna cultivars, and Italian samples were obtained mainly from Feminello but also from Commune, Santa Teresa, and Sfusato cultivars. In this work, the geographic origin denomination did not consider differences among the cultivars.

To distinguish between the different extraction processes, emphasis was placed on the Italian sample set. The Italian sample set consisted of 46 samples extracted with 4 main different processes: BOE (Brown Oil Extractor) (n=11), Sfumatrice (n=11), Pelatrice (n=11), and FMC (FMC© extractor) (n=13).

The most common method is the FMC-type extractor, which is widely used in orange processing worldwide. In this method, the oil and juice are simultaneously extracted by a cutter tube that pierces the fruit and removes the juice while the oil is extracted. The separate juice and oil products are then piped away for further processing and finishing (Reeve, 2005).

The Brown Oil Extractor (BOE or Brown) process is particularly common in the United States and South America, and rare in Europe. It differs from FMC because the oil is extracted from lemons, first, by gently puncturing the flavedo, or peel, with thousands of stainless steel needle points. The oil sacks are then ruptured, releasing the oil, which is subsequently captured in a water spray. Next, this water spray is centrifuged to separate the water and to polish and finish the oil (Reeve, 2005).

The third main method of processing involves Pelatrice-type rasping equipment. This process is similar to the Brown process, but rather than using stainless steel needle points to pierce the fruit and remove the oil, the fruit is subjected to rolling disc graters that allow the flavedo to be rasped (Reeve, 2005).

The last method, Sfumatrice, involves extracting the oil from the half peels without juice. Peels fall into the oil extracting section and are taken by a rotating drum that rolls and presses them against a stationary profile. This causes a repeated deformation of the half peel and a breakage of the oil sacks. Oil is collected by a water rain provided through a set of sprayers. The mixture of water and essential oil falls into a tank and is then conveyed to the following stages of finishing and separation (Reeve, 2005).

The volatile and non-volatile fractions of the oil were subjected to various analytical methods, as described above.

2.2. FT-MIR

Three spectra of each sample (one for the CPLOR) were recorded, using a PerkinElmer Spectrum One spectrometer equipped with a DTGS detector, an Ever-Glo source, and a KBr/germanium beam splitter. Samples were deposited without any preparation on an ATR cell equipped with a diamond crystal. Spectra were recorded between 4000 cm-1 and 650 cm-1 with a nominal resolution of 4 cm-1 and 16 co-added accumulations. Air was taken as reference for the background spectrum before each sample. Between spectra, the ATR plate was cleaned in situ by scrubbing with ethanol solution. A background spectrum was regularly collected and compared to the previous background spectrum to verify cleanliness. This procedure was also used as instrument qualification.

2.3. GC-FID and GC-MS

The CPLO was injected into a GC 6890 (Agilent) equipped with a double injector and two DB-1 capillary columns (60 m × 0.25 mm, film thickness 0.25 μm, J&W 122-1062). One column was connected to an MS 5973N (Agilent) for identification, and the other to an FID for quantitation. The temperature programme was as follows: 50 °C for 5 min, increased to 120 °C at a rate of 3 °C/min, then increased to 250 °C at a rate of 5 °C/min, 5 min isothermal, then increased to 300 °C at a rate of 15 °C/min, and then 20 min isothermal; split ratio, 1:50; injection volume, 0.2 μl; injector and detector temperatures, both 250 °C; carrier gas, helium at constant flow rates of 1.8 ml/min and 2.1 ml/min, respectively. The CPLO was diluted 1:10 in dichloromethane before being submitted to GC-FID-MS analysis. For all GC-MS analyses, mass spectra were generated by EI at 70eV at a scan ranging from m/z: 29-250 during the first 20 min and then at a scan ranging from m/z: 29-450.

Compounds were identified by analyzing and comparing mass spectra and linear retention indices

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ตัวอย่างการตั้งคอลเลกชันกลุ่มตัวอย่างจาก 64 ตัวอย่างของน้ำมันมะนาวเย็นกดที่ได้จากการสกัดอุตสาหกรรมจาก 3 ต้นกำเนิดทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกัน: อิตาลี (n = 46) อาร์เจนตินา (n = 13) และสเปน (n = 5) ผลไม้มะนาวอิตาลีเก็บเกี่ยวตั้งแต่เดือนพฤศจิกายน 2010 ถึงเดือนพฤษภาคม 2011, ในขณะที่ผลไม้มะนาวอาร์เจนติเก็บเกี่ยวในเดือนพฤษภาคมและเดือนมิถุนายน 2011 ผลไม้สเปนเก็บเกี่ยวตั้งแต่เดือนพฤศจิกายน 2010 ถึงเดือนพฤษภาคม 2011 กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับจากซัพพลายเออร์ในอุตสาหกรรมและมีการผสมผสานของหลายสายพันธุ์ เพราะตัวอย่างที่ได้รับจากซัพพลายเออร์ในอุตสาหกรรมผลไม้ที่ซื้อมะนาวจากเกษตรกรที่แตกต่างกันเป็นไปไม่ได้ที่จะได้รับ monovarietal CPLOs อาร์เจนติตัวอย่างที่ได้รับจากยูเรก้าลิสบอนและสายพันธุ์ Genova ตัวอย่างสเปนที่ได้รับจากสายพันธุ์ Fino และเวอร์และตัวอย่างของอิตาลีที่ได้รับส่วนใหญ่มาจาก Feminello แต่ยังมาจากจังหวัดซานตาเทเรซาและพันธุ์ Sfusato ในงานนี้นิกายต้นกำเนิดทางภูมิศาสตร์ไม่ได้พิจารณาความแตกต่างระหว่างพันธุ์. เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างกระบวนการสกัดที่แตกต่างกันที่เน้นถูกวางลงบนตัวอย่างอิตาลีชุด ตัวอย่างอิตาลีชุดประกอบด้วย 46 ตัวอย่างสกัดด้วย 4 กระบวนการที่แตกต่างหลักของกรมสรรพสามิต (สีน้ำตาลน้ำมันเครื่อง) (n = 11), Sfumatrice (n = 11), Pelatrice (n = 11) และเอฟเอ็ม (เอฟเอ็ม©ระบาย) (n = 13). วิธีที่พบมากที่สุดคือแยกประเภทเอฟเอ็มซึ่งเป็นที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการประมวลผลสีส้มทั่วโลก ในวิธีการนี้น้ำมันและน้ำผลไม้ที่สกัดพร้อมกันโดยหลอดเครื่องตัดโจมตีไปที่ผลไม้และขจัดน้ำในขณะที่น้ำมันสกัด น้ำผลไม้แยกต่างหากและผลิตภัณฑ์น้ำมันแล้วประปาไปประมวลผลต่อไปและการตกแต่ง (รีฟ 2005). สีน้ำตาลน้ำมันเครื่อง (BOE หรือสีน้ำตาล) กระบวนการเป็นเรื่องธรรมดาโดยเฉพาะอย่างยิ่งในประเทศสหรัฐอเมริกาและอเมริกาใต้และหายากในยุโรป มันแตกต่างจากเอฟเอ็มเพราะน้ำมันที่สกัดจากมะนาวเป็นครั้งแรกโดยละม่อมเจาะ flavedo หรือเปลือกที่มีมากมายของจุดที่เข็มสแตนเลส กระสอบน้ำมันจะแตกแล้วปล่อยน้ำมันซึ่งถูกจับในภายหลังสเปรย์น้ำ ถัดไป, สเปรย์น้ำนี้จะหมุนเหวี่ยงเพื่อแยกน้ำและการขัดและเสร็จสิ้นน้ำมัน (รีฟ 2005). วิธีการหลักที่สามของการประมวลผลที่เกี่ยวข้องกับการ Pelatrice ชนิดอุปกรณ์ที่ทำให้ระคายเคือง กระบวนการนี้จะคล้ายกับกระบวนการสีน้ำตาล แต่แทนที่จะใช้จุดเข็มสแตนเลสที่จะเจาะผลไม้และเอาน้ำมันผลไม้อยู่ภายใต้ graters แผ่นรีดที่ช่วยให้ flavedo ที่จะ rasped (รีฟ 2005). วิธีการที่ผ่านมา , Sfumatrice เกี่ยวข้องกับการสกัดน้ำมันจากเปลือกครึ่งโดยไม่มีน้ำ เปลือกตกอยู่ในส่วนการสกัดน้ำมันและมีการดำเนินการโดยกลองหมุนที่ม้วนและกดพวกเขากับโปรไฟล์นิ่ง นี้ทำให้เกิดความผิดปกติซ้ำของเปลือกครึ่งและแตกของถุงน้ำมัน น้ำมันจะถูกรวบรวมโดยฝนน้ำให้ผ่านชุดของเครื่องพ่น ส่วนผสมของน้ำและน้ำมันหอมระเหยตกอยู่ในถังและจะลำเลียงไปแล้วขั้นตอนต่อไปของการตกแต่งและการแยก (รีฟ 2005). โดยเศษระเหยและไม่ระเหยของน้ำมันถูกยัดเยียดให้วิธีการวิเคราะห์ต่าง ๆ ที่อธิบายข้างต้น2.2 FT-MIR สามสเปกตรัมของแต่ละตัวอย่าง (หนึ่งสำหรับ CPLOR) ถูกบันทึกไว้โดยใช้คลื่นความถี่ PerkinElmer หนึ่งสเปกโตรมิเตอร์ติดตั้งเครื่องตรวจจับ DTGS แหล่งเคย Glo และ KBr / แยกลำแสงเจอร์เมเนียม ตัวอย่างฝากโดยไม่ต้องเตรียมบนมือถือของเอทีอาร์ใด ๆ ที่มาพร้อมกับคริสตัลเพชร Spectra ถูกบันทึกไว้ระหว่าง 4000 ซม. -1 และ 650 ซม-1 ที่มีความละเอียดเล็กน้อยจาก 4 ซม-1 และ 16 ร่วมสะสมเพิ่ม อากาศถูกนำมาเป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับคลื่นความถี่พื้นหลังก่อนที่แต่ละตัวอย่าง ระหว่างสเปกตรัม, แผ่นเอทีอาร์ได้รับการทำความสะอาดในแหล่งกำเนิดโดยขัดกับการแก้ปัญหาเอทานอล สเปกตรัมพื้นหลังถูกเก็บรวบรวมเป็นประจำและเมื่อเทียบกับคลื่นความถี่พื้นหลังก่อนหน้านี้ในการตรวจสอบความสะอาด ขั้นตอนนี้ยังใช้เป็นเครื่องมือที่ใช้ในการรับรอง. 2.3 GC-FID และ GC-MS CPLO ถูกฉีดเข้าไปใน GC 6890 (Agilent) พร้อมกับหัวฉีดคู่และสอง DB-1 คอลัมน์ฝอย (60 เมตร× 0.25 มิลลิเมตรความหนาของฟิล์ม 0.25 ไมโครเมตร J & W 122-1062) คอลัมน์หนึ่งถูกเชื่อมต่อกับ MS 5973N (Agilent) เพื่อระบุตัวตนและอื่น ๆ ไปยัง FID หาปริมาณ โปรแกรมอุณหภูมิได้ดังนี้ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีเพิ่มขึ้นถึง 120 ° C ที่อัตรา 3 ° C / นาทีแล้วเพิ่มขึ้นถึง 250 ° C ในอัตรา 5 องศาเซลเซียส / นาที, 5 นาที isothermal แล้ว เพิ่มขึ้นถึง 300 ° C ที่อัตรา 15 ° C / นาทีและจากนั้น 20 นาที isothermal; อัตราส่วนแยก 01:50; ปริมาณการฉีด 0.2 ไมโครลิตร; หัวฉีดและอุณหภูมิเครื่องตรวจจับทั้ง 250 ° C; ก๊าซฮีเลียมในอัตราการไหลคงที่ 1.8 มล. / นาทีและ 2.1 มล. / นาทีตามลำดับ CPLO ถูกเจือจาง 1:10 ในไดคลอโรมีเทนก่อนที่จะถูกส่งไปวิเคราะห์ GC-FID-MS สำหรับทุกวิเคราะห์ GC-MS, สเปกตรัมมวลถูกสร้างขึ้นโดย EI ที่ 70eV ที่สแกนตั้งแต่ม. / z: 29-250 ในช่วงแรก 20 นาทีและจากนั้นในการสแกนตั้งแต่ม. / z:. 29-450 สารประกอบที่ถูกระบุ โดยการวิเคราะห์และเปรียบเทียบสเปกตรัมมวลและดัชนีการเก็บรักษาเชิงเส้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

与